Las estrategias para el desarrollo de vectores bacterianos efectivos, se han basado fundamentalmente en la manipulación genética de microorganismos seleccionados para garantizar una correcta presentación, al sistema inmune. En este estudio se desarrolló una nueva estrategia basada en la liberación oral de vectores bacterianos que portan cantidades adecuadas de antígenos foráneos previamente expresados
in vitro. Se estudió la expresión
in vitro por inducción exógena de la subunidad de unión de la toxina del cólera (CTB) en el vector recombinante
Salmonella typhi
Ty21a, con el propósito de crear una herramienta experimental para evaluar este procedimiento. Se evaluaron parámetros relacionados con la efectividad de la inmunización, como la estabilidad del plásmido, la viabilidad bacteriana y el tiempo de inducción. La expresión de la CTB y su localización intracelular, se analizaron mediante un GM1-ELISA a partir de muestras tomadas cada 1 h de cultivos inducidos a las 2, 3, 4 y 5 h después de la inoculación, y crecidos durante otras 6 h. La cinética de expresión de CTB dependió en gran medida del estadio de inducción. La actividad máxima promedio (800 ng/mL de cultivo) se alcanzó entre 2 y 3 h despúes de la inducción, se mantuvo estable en 750 ng/mL y 70% de la actividad se localizó en el periplasma. Entre los cultivos inducidos y los controles, sólo se observaron diferencias en la expresión del antígeno. Estos resultados son de valor práctico para evaluar experimentalmente el procedimiento sugerido.
