Se comparó la expresión del gen
dexA aislado del hongo
Penicillium minioluteum
y que codifica la enzima dextranasa, en dos cepas diferentes de la levadura metilotrófica
Pichia pastoris
, mediante el empleo de vectores que portan marcadores auxotróficos diferentes. En ambos casos, el gen
dexA se fusionó a la secuencia señal del gen
SUC2 de
Saccharomyces cerevisiae
y se insertó en el genoma de ambas levaduras en el locus
AOX1. Los transformantes capaces de secretar la enzima activa, fueron identificados por la aparición de zonas de aclaramiento alrededor de las colonias crecidas en placas que contienen dextrana azul y metanol como inductor. En el caso de la cepa MP36
(his3-),todos los transformantes seleccionados portaron el fragmento de expresión y secretaron dextranasa activa al medio de cultivo. Sin embargo, en el caso de la cepa GS115
(his4-), sólo 50% de los transformantes expresó la enzima activa. Además, los transformantes derivados de la cepa MP36 expresaron la enzima a niveles más altos que los derivados de la cepa GS115, probablemente debido a diferencias a nivel trasncripcional.
