Se estudiaron 12 cepas de
Klebsiella pneumoniae
con un patrón inusual de resistencia a las cefalosporinas de amplio espectro y al aztreonam. Estas cepas se aislaron de pacientes neonatos con septicemia nosocomial recluidos en el Hospital Universitario de Los Andes, Mérida, Venezuela. Además de la resistencia a los b-lactámicos, los aislados clínicos también fueron resistentes a gentamicina, kanamicina, tetraciclina y cloramfenicol, pero permanecieron susceptibles a las cefamicinas y al imipenem. Mediante conjugación, se pudo transferir todos los marcadores de resistencia a cléulas de
Escherichia coli MKD135 y, posterior al tratamiento con naranja de acridina, se observó que se perdían estos marcadores. El análisis de los transconjugantes por isoelectroenfoque, permitió detectar la actividad de dos b-lactamasas: una de punto isoeléctrico (pI) 5,4 y otra de pI 8,2. Los genes que codifican ambas enzimas fueron localizados en un plásmido autotransferible de 87 kpb (pNU147). Los ensayos de hibridación, clonación y secuenciación demostraron que el gen
blaTEM-1, que codifica la b-lactamasa TEM-1, se encuentra en un fragmento
EcoRI de 6 kpb proveniente del plásmido pNU147. En otro fragmento
EcoRI de 3 kpb del mismo plásmido, se localizó el determinante que media la producción de una b-lactamasa de espectro extenso (bLEE) de tipo SHV-5. Este estudio confirma que el determinante de la bLEE de tipo SHV-5, el de la b-lactamasa TEM-1 y los genes que confieren resistencia a otros antibióticos no relacionados, son transportados por un plásmido conjugativo (pNU147) capaz de diseminarse entre cepas de
K. pneumoniae de origen nosocomial.
