Utilizando el clasico metodo de seleccion para el fenotipo de modificacion, se aislaron los genes que codifican para la restrictasa y la metilasa
Hinf I. Se utilizo el plasmido pUC18 para la construccion de la libreria genomica, asi como para la expresion de estas proteinas en
Escherichia coli
. El clon obtenido a partir del proceso de seleccion (pERHinf4) mostro expresion de la restrictasa en la cepa de
E. coli HB101. Los extractos celulares obtenidos a partir de esta cepa transformada mostraron el doble de la cantidad (U/g de biomasa) de restrictasa que usualmente contienen los de la cepa
Haemophilus influenzae
Rf. En este trabajo describimos un procedimiento de purificacion de esta restrictasa recombinante expresada en
E. coli. Este procedimiento permite obtener una preparacion libre de fosfatasas y exonucleasas contaminantes, con un recobrado final de enzima equivalente al 33% de la actividad total presente en el extracto.