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Biotecnologia Aplicada
Elfos Scientiae
ISSN: 0684-4551
Vol. 14, No. 1, 1997, pp. 33-39
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Bioline Code: ba97004
Full paper language: Spanish
Document type: Research Article
Document available free of charge
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Biotecnologia Aplicada, Vol. 14, No. 1, 1997, pp. 33-39
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Diseno y construccion de un secuenciador de proteinas automatico y compacto, a partir de elementos disponibles comercialmente
Cruz, Jose M.; Huerta, Vivian; Morera, Vivian; Lopez, Sergio; del Rey, Rolando; Randulfe, Jesus; Rodriguez-Maribona, Alicia; Doncel, Elio; Niubo, Irene & Menendez, Nelson
Resumen
Se describe un secuenciador de proteinas, construido a partir de elementos comercialmente disponibles. En el se utilizan valvulas de membrana de cero volumen muerto; las trayectorias de los reactivos y solventes es minima y se usa una camara de reaccion de flujo transversal. Todo ello contribuye al bajo consumo de reactivos. Se emplean valvulas miniaturizadas para el control del gas inerte y del vacio. El secuenciador y el sistema cromatografico son controlados a traves de una computadora personal IBM- compatible. Se desarrollo un programa que brinda numerosas facilidades de operacion, permite la adquisicion de la senal de absorbancia y el procesamiento de los cromatogramas. El sistema puede manejar bombas de control analogico o por comunicacion serie RS232. Permite secuenciar en el rango de 10 pmol de muestra con un rendimiento inicial de 57-74 %, un rendimiento repetitivo de 94-98 % y bajos niveles de fondo en los cromatogramas (< 1 pmol).
Palabras-clave
PTH-aminoacidos, rendimiento repetitivo, secuenciacion automatica
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Cruz, Jose M.; Huerta, Vivian; Morera, Vivian; Lopez, Sergio; del Rey, Rolando; Randulfe, Jesus; Rodriguez-Maribona, Alicia; Doncel, Elio; Niubo, Irene & Menendez, Nelson
Abstract
We describe a protein sequencer, built-in with commercially available elements. It uses zero dead-volume membrane valves and a cross-flow-reactor. Solvents and reagents path lengths are minimal. As a consequence, the consumption of reagents is low. Miniature valves are used to control vacuum and inert gas supply. Sequencer and the chromatographic system are controlled by an IBM-compatible personal computer. A software was developed that offers several operational facilities, allows the acquisition of the absorbance signal and the chromatograms processing. The system can control either analogue or RS232 high performance liquid chromatography pumps. Sample amounts around 10 pmol can be sequenced with an initial yield of 57-74 %, a repetitive yield of 94-98 % and low background signals in chromatograms (< 1 pmol).
Keywords
PTH-amino acids, repetitive yield, automatic sequencing
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