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Estudio comparativo mediante diferentes soluciones para eluir el interferon alfa recombinante de una columna de inmunoafinidad Hernandez, Jose R.; Gil, Miriela; Cruz, Yai; Bouyon, Rebeca; Segredo, Jorge & Rodes, Lorenzo Resumen Para eluir el interferon (IFN) alfa 2b humano recombinante, adsorbido a una columna de inmunoafinidad cargada con anticuerpos monoclonales CB IFN 2.4, se usaron 3 soluciones: 1) glicina NaCl - HCl; 2) acido acetico - NaCl y 3) urea NaCl - acido acetico. Los mejores resultados se obtuvieron con la solucion urea - NaCl - acido acetico, en la cual el IFN fue eluido de la columna a un pH mayor, sin perdida en la resolucion del proceso y con un incremento del 18 % de la recuperacion del producto. La presencia de urea a bajas concentraciones en la solucion de elucion modifico el nivel de la interaccion antigeno-anticuerpo y evito la agregacion entre las moleculas de IFN; ello permitio concentrar los eluatos hasta valores superiores a 1,5 mg/mL sin observarse precipitacion. Palabras-clave interferon alpha recombinante, elucion, IFN, cromatografia de inmunoafinidad

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Hernandez, Jose R.; Gil, Miriela; Cruz, Yai; Bouyon, Rebeca; Segredo, Jorge & Rodes, Lorenzo Abstract Three solutions were tested to elute the recombinant human alpha 2b interferon (IFN), from an affinity column containing monoclonal antibodies CB IFN 2.4: 1) glycine NaCl - HCl, 2) acetic acid - NaCl and 3) urea NaCl acetic acid. The best performance was obtained with the solution containing urea. The protein was eluted at a higher pH with a higher resolution process and a recovery of the product 18 % greater than the HCl - glycine solution. The presence of urea at low concentrations in the elution modified the antigen-antibody interaction and avoided the aggregation between the IFN molecules. This allowed to concentrate the resulting IFN solution to values greater than 1.5 mg/mL without precipitation of the protein. Keywords recombinant alpha IFN, elution, IFN, immunoaffinity chromatography

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