Biotecnología Aplicada 1998;15:250-253
A new format ELISA for the detection of HBsAg
Rolando Ochoa Azze
Code Number: BA98041
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ABSTRACT
A new ELISA has been standardised, using two
monoclonal
antibodies directed against HBsAg. The sheep anti-HBsAg/alkaline
phosphatase conjugate and
the positive control were dehydrated at 37C for 18 h and 35%
relative humidity. Sucrose was
used as stabiliser with an optimum concentration of 125 mg/mL. The
one step ELISA is
carried out by adding a washing solution into control wells and
samples into the remainder.
Sensitivity and specificity were 100%. Discrimination value was
0.22 U/mL. Stability was
studied for coating antibodies, dehydrated conjugate and the
dehydrated positive control. The
stability during their use was over 80% at 150 days and storage
stability at 2-8 C was over
80% a year after.
Keywords: conjugate stability, HBsAg, HBsAg stability,
new format ELISA, one
step ELISA
RESUMEN
Se estandarizó un ELISA en el que se
usan dos
anticuerpos monoclonales de captura anti-HBsAg de diferente
especificidad. El conjugado
anti-HBsAg (ovino)/fosfatasa alcalina y el control positivo se
presentan desecados en los
pocillos mediante incubación por 18 h a 37C y humedad de
35%. La
concentración óptima de sacarosa empleada como
elemento estabilizador fue
de 125 mg/mL. Para el ELISA en un paso de reacción se
requiere tan sólo
añadir solución de lavado en los pocillos
correspondientes a los controles, las
muestras se adicionan en los pocillos restantes. La sensibilidad y
especificidad fueron del
100%. El valor de discriminación de 0,22 U/mL. La
estabilidad de uso y en anaquel
(2-8C), fue superior al 80% a los 150 días y al año
respectivamente, tanto para
los anticuerpos de recubrimiento como para el conjugado y el
control positivo desecados.
Palabras claves: ELISA de nuevo formato, ELISA en un
paso, estabilidad de
conjugados, estabilidad del HBsAg
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