Biotecnologia Aplicada 1999; Vol. 16 No. 1, pp. 29 -
30
Detection Of Deoxyribonuclease
Activities Using A PCR-Generated Radiolabeled DNA
Substrate
Frank Miranda, Luis E Trujillo, Félix Dafhnis,
Enrique Pérez, José E Brito
Code Number: BA99007
ABSTRACT
Here we evaluated a radioactive DNA substrate for the
efficient detection of deoxyribonuclease activities in final
preparations of DNA restriction and modifying enzymes and other
biological reagents as acetylated BSA. The substrate was obtained
by radioactive PCR and it was found to be more sensitive in the
detection of deoxyribonuclease activities (more than 10-5 units of
a commercial DNAse I in 20 min of reaction) than the
non-radioactive substrates commonly used for these purposes.
Keywords: deoxyribonuclease activity, PCR, quality
control
RESUMEN
En este trabajo se evalúa un sustrato radiactivo
creado para la detección eficiente de actividades de
desoxirribonucleasas contaminantes de las preparaciones finales de
enzimas de restricción y modificación del ADN y otros
reactivos biológicos como la BSA acetilada. Este sustrato
obtenido mediante PCR radiactivo resultó ser más
sensible en la detección de desoxirribonucleasas (más
de 10-5 unidades de ADNasa I comercial en 20 min de
reacción) que los sustratos no marcados radiactivamente
utilizados comúnmente para estos propósitos.
Palabras claves: actividad de desoxirribonucleasa,
control de calidad, RCP
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