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Biotecnologia Aplicada
Elfos Scientiae
ISSN: 0684-4551
Vol. 16, No. 4, 1999
Bioline Code: ba99040
Full paper language: English
Document type: Research Article
Document available free of charge

Biotecnologia Aplicada, Vol. 16, No. 4, 1999

 en Human Anti-ganglioside IgG Antibody Response Induced by in vitro Immunization with Liposomes Containing GM3(NeuGc) Ganglioside

Abstract

Biotecnología Aplicada 1999;16:246-248

Human Anti-ganglioside IgG Antibody Response Induced by in vitro Immunization with Liposomes Containing GM3(NeuGc) Ganglioside

Mauro Alfonso, Peter Ifversen, Jesper Zeuthen

Code Number:BA99040

ABSTRACT

A new in vitro immunization system of human peripheral blood lymphocytes using liposomes containing gangliosides, is described. Purified human B lymphocytes were cultured in the CD40 system in the presence of liposomes containing different concentrations of GM3(NeuGc) ganglioside, ranging from 1 to 1000 ng/mL. After an initial primary in vitro immunization period (34 days), antigen-stimulated B cells and autologous activated CD4+ T lymphocytes previously activated with an anti-CD3 monoclonal antibody were cultured in the presence of staphylococcal enterotoxin A. Human antibody production was measured by an anti-ganglioside ELISA after 4 and 8 days of culture. Specific antibody responses against GM3(NeuGc) of IgM and IgG isotypes were induced after 4 days in culture, and a predominant antigen-specific IgG antibody production was observed 8 days after antigenic stimulation.

Keywords: ganglioside, human antibody, in vitro immunization

RESUMEN

Respuesta de anticuerpos humanos anti-gangliósidos inducida por inmunización in vitro con liposomas que contienen al gangliósido NeuGcGM3. Se describe un nuevo sistema de inmunización in vitro de linfocitos humanos de sangre periférica mediante el uso de liposomas que contienen gangliósidos. Linfocitos B humanos purificados fueron cultivados en el sistema CD40 en presencia de liposomas que contenían al gangliósido NeuGcGM3 a diferentes concentraciones (11 000 ng/mL), y después de un período inicial de inmunización in vitro primaria (34 días), células B estimuladas por el antígeno y linfocitos T CD4+ autólogos activados previamente con un anticuerpo monoclonal anti-CD3, fueron cultivados en presencia de la enterotoxina A estafilocóccica. La producción de anticuerpos humanos en los sobrenadantes de cultivo fue analizada mediante un ELISA anti-gangliósidos después de 4 y 8 días de cultivo. Se obtuvieron respuestas de anticuerpos específicos de tipo IgM e IgG contra NeuGcGM3 después de 4 días de cultivo, mientras que 8 días después de la estimulación antigénica, se encontró una producción de anticuerpos humanos específicos para el antígeno predominantemente de tipo IgG.

Palabras claves: anticuerpo humano, gangliósido, inmunización in vitro

Copyright Elfos Scientiae 1999

 

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