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Serological detection of seed borne viruses in cowpea regenerated germplasm using Protein A sandwich enzyme linked immunorsorbent assay Ojuederie, O.B.; Odu, B.O. & Ilori, C.O. Abstract Cowpea ( Vigna unguiculata (L.) Walp) is susceptible to a number of fungal, bacterial and viral diseases. The effects of viruses can be devastating and are a major constraint to the production of cowpea. A study was carried out to detect the presence of seed borne viruses in fourteen cowpea accessions screened from 300 regenerated cowpea germplasm from the genebank collection of the International Institute of Tropical Agriculture (IITA) in Nigeria. Protein A Sandwich Enzyme linked Immunosorbent Assay (PAS ELISA) was used to detect seed borne viruses in the accessions. Out of 36 accessions of TVu 2033 indexed, 31 were infected with Cowpea aphid-borne mosaic virus genus Potyvirus, which is of great economic importance in germplasm conservation and exchange between countries as it causes great loss. Southern bean mosaic virus was not detected in any of the accessions evaluated. Seeds were harvested from the infected mother plants at maturity and the embryos excised in vitro onto hormone free medium composed of 4.43 g MS basal salt, 30 g sucrose and 8 g of agar. The seedlings obtained were serologically indexed to detect any seed-borne viruses after acclimatisation to screen house conditions. The seedlings obtained from excised embryos got from harvested seeds gave a negative ELISA result. Keywords Embryo culture, PAS ELISA, Vigna unguiculata

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Ojuederie, O.B.; Odu, B.O. & Ilori, C.O. Résumé Le niébé ( Vigna unguiculata (L.) Walp) est sensible à un certain nombre de maladies fongiques, bactériennes et virales. Les effets des virus peuvent être dévastateurs et constituent un obstacle majeur à la production de niébé. Une étude a été effectuée pour détecter la présence de virus transmis par la semence dans quatorze accessions de niébé sélectionnées parmi les 300 régénérées à partir du germoplasme collecté dans la banque de gènes de l'Institut International d'Agriculture Tropicale (IITA) au Nigeria. Un test PAS ELISA (Protein A Sandwich Enzyme linked Immunosorbent Assay) a été utilisé pour détecter les virus transmis par la semence dans les accessions. Parmi les 36 accessions testées de TVu 2033 indexées, 31 étaient infectées par le virus du genre Potyvirus (Cowpea aphid-borne mosaic virus ), virus réputé d'une grande importance économique dans la conservation du germoplasme et l'échange entre les pays eu égard aux pertes qu'il entraîne. "Southern bean mosaic virus" n'a pas été détecté dans aucune des accessions évaluées. Les semences ont été récoltées à la maturité à partir des plantes mères infectées et les embryons excisés in vitro sur un milieu sans hormone, composé de 4,43 g de sel MS, 30 g de saccharose et de 8 g d'agar. Les plantules obtenues ont subi un test sérologique afin de détecter tous les virus transmis par la semence après l'acclimatation dans la serre. Les plantules obtenues à partir d'embryons de graines excisées ont donné le résultat négatif d'ELISA. Mots Clés Culture d'embryon, PAS ELISA, Vigna unguiculata

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