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Protocol optimisation for micropropagation of Ethiopian yam Birhan, D.; Obssi, D. & Mulugeta, K. Abstract Yam ( Dioscorea spp.) is a monocotyledonous tuber forming tropical vine, which belongs to the family Dioscoreaceae, and genus Dioscorea. Yam is well known for medicinal properties, as well as nutritional values. Conventional propagation of yam is limited by low propagation rates; hence, in vitro propagation provides the best alternative to overcome such limitations. The objective of this study was to optimise a protocol for in vitro micro-propagation of Ethiopian yam ( D. alata , bulcha variety). Explants were obtained from young leaves of bulcha variety, and sterilised using different concentrations of NaOCl, for different time exposures. Sodium hypochlorite (1%) at 15 minutes exposure time, showed 100% survival of explants. The combination of 0.5 BAP with 1mgl-1 NAA was the best concentration for shoot induction. For shoot multiplication, BAP at 1.5 mg l-1 gave the highest shoots per explants (7.28±0.07), with shoot length of 8.72±0.43 cm. MS medium with 2.0 mg l-1 NAA and 1.5 mg l-1 IBA gave the highest rooting percentage and root number (10.6±0.44), with a root length of 13.80±0.44. In vitro acclimatised plantlets,which were transferred to a greenhouse for hardening, had 90% survival rate on soil medium. Thus, for micropropagation of bulcha yam variety, MS + 1.5 mg l-1 and MS plus 2.0 mg l-1 NAA + 1.5 mg l-1 IBA is the best phytohormonal combination for shoot multiplication and invitro rooting, respectively. Keywords Dioscorea; MS Medium; nodal vine

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Birhan, D.; Obssi, D. & Mulugeta, K. Résumé L’igname ( Dioscorea spp.) est un tubercule monocotylédone qui forme la vigne tropicale, qui appartient à la famille des Dioscoreaceae et au genre des Dioscorea. L’igname est bien connue pour ses propriétés médicinales, ainsi que pour ses valeurs nutritionnelles. La propagation conventionnelle de l’igname est limitée par de faibles taux de propagation; par conséquent, la propagation in vitro offre la meilleure alternative pour surmonter ces limitations. L’objectif de cette étude était d’optimiser un protocole de micro-propagation in vitro de l’igname Ethiopienne ( D. alata , variété bulcha). Des explants ont été obtenus à partir de jeunes feuilles de la variété bulcha et stérilisés en utilisant différentes concentrations de NaOCl, pour des expositions temporelles différentes. L’hypochlorite de sodium (1%) à un temps d’exposition de 15 minutes a montré une survie de 100% des explants. La combinaison de 0,5 BAP avec 1mgl-1 NAA s’est avérée être la meilleure concentration pour l’induction des pousses. Pour la multiplication des pousses, le BAP à 1,5 mg l-1 a donné les pousses les plus élevées par explants (7,28 ± 0,07), avec une longueur de pousses de 8,72 ± 0,43 cm. Le milieu MS avec 2,0 mg l-1 NAA et 1,5 mg l-1 IBA a donné le pourcentage d’enracinement et le nombre de racines les plus élevés (10,6 ± 0,44), avec une longueur de racine de 13,80 ± 0,44. Les plantules acclimatées in vitro, qui ont été transférées dans une serre pour durcissement, avaient un taux de survie de 90% sur un milieu de sol. Ainsi, pour la micropropagation de la variété bulcha yam, MS + 1,5 mg l-1 et MS plus 2,0 mg l-1 NAA + 1,5 mg l-1 IBA est la meilleure combinaison phytohormonale pour la multiplication des pousses et l’enracinement in vitro, respectivement. Mots Clés Dioscorea; Milieu MS; vigne nodale

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