search
for
 About Bioline  All Journals  Testimonials  Membership  News  Donations


Revista Colombia Médica
Universidad del Valle - Facultad de Salud
ISSN: 0120-8322
EISSN: 1657-9534
Vol. 42, No. 2, 2011, pp. 154-165
Bioline Code: rc11021
Full paper language: English
Document type: Research Article
Document available free of charge

Revista Colombia Médica, Vol. 42, No. 2, 2011, pp. 154-165

 en Leishmania (Viannia) panamensis expresses a nuclease with molecular and biochemical features similar to the Endonuclease G of higher eukaryotes*
Miguel A. Toro-Londoño; Edwin Bairon Patiño; Sara María Robledo; Antonio Jiménez-Ruiz & Juan Fernando Alzate

Abstract

Objective: To characterize the molecular and biochemical features of the Endonuclease G of Leishmania (Viannia) panamensis.
Methods: The gene of the putative L. (V.) panamensis Endonuclease G was amplified, cloned, and sequenced. The recombinant protein was produced in a heterologous expression system and biochemical assays were run to determine its ion, temperature, and pH preferences.
Results: The L. (V.) panamensis rENDOG has biochemical features similar to those found in other trypanosomatids and higher eukaryotes. In addition, phylogenetic analysis revealed a possible evolutionary relationship with metazoan ENDOG.
Conclusions: L. (V.) panamensis has a gene that codifies an ENDOG homologous to those of higher organisms. This enzyme can be produced in Escherichia coli and is able to degrade covalently closed circular double-stranded DNA. It has a magnesium preference, can be inhibited by potassium, and is able to function within a wide temperature and pH range.

Keywords
Leishmania panamensis; Endonuclease G; Molecular characterization; Recombinant proteins; Refolding; Phylogeny.

 
 es Leishmania (Viannia) panamensis expresa una nucleasa molecular y bioquímicamente similar a la Endonucleasa G de eucariotas superiores
Miguel A. Toro-Londoño; Edwin Bairon Patiño; Sara María Robledo; Antonio Jiménez-Ruiz & Juan Fernando Alzate

Resumen

Objetivo: Caracterizar molecular y bioquímicamente la Endonucleasa G (EndoG) de Leishmania (Viannia) panamensis.
Métodos: El gen de la putativa Endonucleasa G de L. (V.) panamensis fue amplificado, clonado y secuenciado. La proteína recombinante se produjo en un sistema de expresión heterólogo y la proteína activa se sometió a pruebas bioquímicas para determinar la preferencia de iones, temperatura y pH.
Resultados: La rEndoG de L. (V.) panamensis muestra características bioquímicas similares a aquellas descritas en otros trypanosomatidos y en eucariotas superiores. Además, los análisis filogenéticos muestran una posible relación evolutiva con la Endonucleasa G de metazoos.
Conclusiones: Leishmania (V.) panamensis posee un gen que codifica para una endonucleasa homóloga a la EndoG de otros organismos superiores, que se puede producir de forma recombinante en Escherichia coli y que es capaz de degradar ADN circular cerrado de doble cadena. Tiene una preferencia por los iones magnesio y manganeso para usarlos como cofactor y es inhibida por el potasio. Además, funciona en un amplio rango de pH y temperatura.

Palabras-clave
Leishmania panamensis; Endonucleasa G; Caracterización molecular; Proteínas recombinantes; Renaturalización; Filogenia.

 
© Copyright 2011 Colombia Médica.
Alternative site location: http://colombiamedica.univalle.edu.co

Home Faq Resources Email Bioline
© Bioline International, 1989 - 2017, Site last up-dated on 05-Dec-2017.
Site created and maintained by the Reference Center on Environmental Information, CRIA, Brazil
System hosted by the Internet Data Center of Rede Nacional de Ensino e Pesquisa, RNP, Brazil