Biotecnologia Aplicada Elfos Scientiae ISSN: 0684-4551 Vol. 12, Num. 2, 1995, pp. 100-101

REPORTE CORTO/SHORT REPORT

Presented in the Congress Biotecnologia Habana'94. La Habana, Cuba, Nov. 28 - Dec. 3, 1994

UMELISA PARA LA CUANTIFICACION DE ANTI-HBsAg

Jannette Trujillo, Leticia Martiez, Rolando Ochoa, Julio Ventura, Irina Valdivia, Marleby Garcia, Esther Lazo, Aurora Delahanty.

Centro de Inmunoensayo, Calle 134 y Ave. 25, Apdo Postal 6945, La Habana, Cuba.

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La presencia de Anti-HBsAg en suero o plasma humano, indica el restablecimiento de una infeccion aguda o cronica por el virus de la Hepatitis B y el desarrollo de la inmunidad, asi como la seroconversion obtenida despues de una inmunizacion de forma activa.

Para la deteccion de Anti-HBsAg es conveniente el desarrollo de un metodo cuantitativo y de determinacion que sea capaz de evaluar la respuesta inmunitaria y la duracion de la proteccion inmune (1-4).

MATERIALES Y METODOS

Con el objetivo de determinar niveles de anti-HBsAg en suero humano, se desarrollo un inmunoensayo enzimatico tipo sandwich, utilizando antigeno recombinante para el recubrimiento de la fase solida y para la conjugacion con fosfatasa alcalina. La concentracion optima de antigeno recombinante utilizado para el recubrimiento fue calculada a partir de la determinacion de su meseta, para lo cual se recubre entre 0,1 y 4 uL. La conjugacion se llevo a cabo por el metodo del glutaraldehido en un paso. La sensibilidad y especificidad fueron evaluadas con 700 muestras de donantes de sangre y utilizando un metodo comercial de referencia (Hepanostika).

RESULTADOS Y DISCUSION

La fijacion mas eficiente a la fase solida del antigeno recombinante se logro a una concentracion de 0.25 ug/mL. La conjugacion con fosfatasa alcalina fue efectiva y mantuvo buena estabilidad.

Fue posible la cuantificacion de anti-HBsAg entre 10 y 200 UI/L con una especificidad del 98,9% y una sensibilidad del 100%.

REFERENCIAS

1. AMBROSH, F. et al. (1987). Postg. Med. J. 63(2):129-135.

2. AMDRE, F. et al. (1987). Postg. Med. J. 63(2):169-178.

3. EDDLESTONN, A. (1990). Lancet 335:1142-1144

4. NOMMENSEN, F. et al (1989). Lancet: 847-849

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