Biotecnologia Aplicada Elfos Scientiae ISSN: 0684-4551 Vol. 13, Num. 1, 1996

ASPECTOS DE LA BIOLOG A MOLECULAR DE LOS AISLAMIENTOS CUBANOS DE Anaplasma marginale.

Corona B., Martinez S., Finalet J., Rivas D. y Ortiz F.

Departamento de Biologia Molecular. Centro Nacional de Sanidad Agropecuaria. Apartado 10, San Jose de las Lajas, La Habana, Cuba.

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Introduccion

La anaplasmosis bovina causada por la rickettsia Anaplasma marginale es una enfermedad que provoca grandes perdidas en los paises tropicales y subtropicales (4). En Cuba es la primera causa de morbiletalidad del ganado adulto segun datos del IMV. Se han definido, al menos, seis proteinas de superficie de los cuerpos iniciales, descritas en el aislamiento Florida de este hemoparasito. El estudio y comparacion de los aislamientos con respecto a estas proteinas resulta de gran importancia para los estudios previos sobre programas de vacunacion dirigidos a lograr proteccion en el ganado. El objetivo de este trabajo fue mostrar de forma resumida los resultados obtenidos de estudios moleculares realizados a dos aislamientos cubanos de Anaplasma marginale.

Materiales y Metodos

Se estudiaron dos aislamientos cubanos: Habana y Camaguey. La amplificacion se realizo a partir de ADN extraido de sangre, segun la metodologia descrita por Ambrosio et al (3). Se realizo para ambos aislamientos la amplificacion mediante PCR de los genes que codifican para las proteinas de superficie de los cuerpos iniciales MSP 1 beta, MSP 1 alfa, MSP 4 y MSP 5, utilizando cebadores disenados a partir de las secuencias reportadas en la literatura (3, 1, 5, 7). Se realizo la diferenciacion de ambos aislamientos mediante la tecnica de PCR-AP utilizando un panel de 5 cebadores con tallas entre 20-25 bases.

Resultados y Discusion

Se logro amplificar los genes que codifican para las proteinas MSP 1 beta, MSP 4 y MSP 5, de ambos aislamientos, apareciendo en todos los casos la banda de la talla esperada, segun los cebadores utilizados. La presencia de estos genes en nuestros aislamientos resulta de gran importancia para los estudios de inmunogenicidad de las proteinas de superficie codificadas por estos, teniendo en cuenta lo reportado por Palmer et al (6) donde se plantea la presencia de epitopes altamente conservados entre diferentes aislamientos. El gen que codifica para la proteina MSP 1 alfa no amplifico en el aislamiento Camaguey, lo que puede deberse a diferencias en la secuencia nucleotidica del mismo con respecto al aislamiento Florida, coincidiendo con diferencias encontradas por otros autores al comparar la secuencia de este gen entre diferentes aislamientos (1).

Al realizar el estudio por PCR-AP se encontraron patrones polimorficos diferentes para ambos aislamientos, de ahi que este metodo pueda ser utilizado para analisis genomico en estudios de epidemiologia.

 1. Allred DR et al. Proc Natl Acad Sci 1990; 87:3320-
3324.
 2. Ambrosio RE et al. J Vet 1987;54: 63-65.
 3. Barbet AF et al. Infect Immun 1991; 59:971-976.
 4. Erick IS et al. J Clinical Microbiol Feb 1989;279-284.
 5. Oberle SM et al. Gene 1993;136: 291-294. 
 6. Palmer GH et al. Vet Parasit 1995; 57:233-253.
 7. Visser ES et al. Infect Immun 1992; 60:5139-
5144.

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