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Biotecnologia Aplicada
Elfos Scientiae
ISSN: 0684-4551
Vol. 13, Num. 2, 1996, pp. 81-88
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Biotecnologia Aplicada 1996;13:81-88
La inmunizacion con ADN: Una nueva generacion de vacunas?
Orlando L Pardo
Division Vacunas, CIGB, Apdo. 6162, C.P. 10600, Ciudad de la
Habana, Cuba.
Code Number: BA96036
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Recibido en febrero de 1996. Aprobado en marzo de
1996.
Abstract
In the last five years, it has been found that direct nucleic
acid transfer into living organisms is a feasible approach to
obtain expression levels that although are still far from
being of any therapeutic value, are indeed enough to elicit in
the host a significative immune response against the protein
codified by the nucleic acid as such. This methodology of
immunization has many advantages over more conventional ones,
namely: the need of purifying proteins is obviated, as the
expression occurs in the host cells the appropriate protein
processing and conformation are guaranteed, and most pros of
live (e.g. elicitation of an efficient cellular response) and
subunit vaccines (e.g. high safety) are combined while most
cons of both are avoided (e.g. elicitation of an immune
response against the proteins of the specific live vector
used). Therefore, although many questions on the topic still
remain unanswered, the possibility of nucleic acid vaccines
becoming a new generation of human vaccines belongs now to the
near future.
Key words: DNA immunization, DNA vaccines, gene-transfer,
plasmid DNA
Resumen
En los ultimos cinco anos se ha logrado demostrar que la
transferencia directa de acidos nucleicos a organismos vivos
genera niveles de expresion que si bien son aun de escaso
valor terapeutico, son suficientes para despertar en el
hospedero una respuesta inmune significativa contra la
proteina codificada por el acido nucleico en cuestion. Esta
metodologia de inmunizacion posee multiples ventajas sobre las
ya convencionales: se obvia la necesidad de purificar
proteinas, la expresion en las propias celulas del hospedero
garantiza una maduracion y conformacion adecuadas para la
proteina de interes, y se combinan muchos aspectos positivos
de las vacunas vivas (p.e. obtencion de respuesta celular
eficiente) con los de las vacunas de subunidades (p.e. alta
seguridad), evitandose ademas muchos de los aspectos negativos
de ambas (p.e. desencadenamiento de respuesta contra los
antigenos propios del vector vivo empleado). Por consiguiente,
y aunque aun existen muchas interrogantes abiertas al
respecto, la posibilidad de que las vacunas de acidos
nucleicos se conviertan en una nueva generacion de vacunas
humanas pertenece ahora a un futuro no muy lejano.
Palabras claves: ADN plasmidico, transferencia genetica,
vacunas de ADN
Introduccion
En enero de 1989, un grupo de cientificos de la Universidad de
Wisconsin (EE.UU.) dirigido por Jon Wolff, trabajaba en la
verificacion de una hipotesis elaborada pocos meses antes por
el grupo de Philip Felgner en la compania biotecnologica Vical
Inc., de San Diego, California. La idea, en resumen, consistia
en emplear los complejos electrostaticos que surgen entre el
ADN y determinados lipidos cationicos, como vehiculo para
lograr una transfeccion in vivo eficiente, que rindiera
niveles de expresion de cierto valor terapeutico.
Para sorpresa de todos, en los animales usados como controles
negativos (en los que solo se administro ADN plasmidico en
solucion acuosa) los niveles de expresion del transgen en el
musculo murino eran significativos tambien. Una vez comprobada
la reproducibilidad de semejante hallazgo, la llamada
tecnologia de transferencia directa de ADN desnudo recien
habia nacido, lo cual desperto gran interes en toda la
comunidad cientifica internacional.
Si bien era la primera vez que se demostraba expresion in
vivo mediante la administracion directa de ADN desnudo,
existian varios precedentes de transferencia genetica directa
desde los anos ochenta, cuando la inyeccion intraperitoneal de
ADN plasmidico coprecipitado con fosfato calcico genero
expresion detectable en varios organos murinos (1). Poco
antes, un intento similar habia sugerido que solo las
moleculas replicativas serian capaces de persistir suficiente
tiempo en el organismo en cuestion (2), y de hecho, era
conocido que la inyeccion del ADN genomico de ciertos virus si
rendia transfecciones exitosas in vivo.
Asimismo, no solo los complejos ADN lipidos, sino tambien los
de ADN proteinas (entre otros sistemas mas o menos
sofisticados), se venian estudiando intensamente durante esos
anos con el objetivo comun de desarrollar un vehiculo efectivo
para la transfeccion del ADN in vivo. Pero es solo
despues del inusitado descubrimiento de los grupos de Wolff y
Felgner (3), que se presta suficiente atencion a la
posibilidad de lograr dicho objetivo sin necesidad de apelar a
formulaciones especiales.
La presente revision se concentra basicamente en los estudios
desencadenados a raiz del mencionado descubrimiento, y esta
enfocada, como lo indica su titulo, hacia el campo de las
vacunas, pero tambien se abordan otras aplicaciones no menos
importantes que van siendo ensayadas con esta novel tecnologia
de transferencia directa de ADN desnudo.
Estudios iniciales
Varios estudios fueron iniciados a partir de 1990 para
dilucidar los aspectos basicos de la transferencia directa de
ADN desnudo, asi como para establecer las condiciones optimas
en las que esta se verificaba (3-22, revisado en 23). Los
resultados mas relevantes de estos primeros estudios pueden
resumirse de la siguiente manera:
[1] Mediante la inyeccion directa de ADN plasmidico puro en
animales se obtiene expresion importante en el tejido muscular
estriado (esqueletico y cardiaco), pero apenas en otros
organos como son el cerebro, pulmon, estomago, bazo, utero y
rinon (5). Esporadicamente se ha reportado expresion tambien
en el higado (24) y la glandula tiroides (25).
[2] La solucion a inyectar requiere por lo general de cierta
fuerza ionica (16), por ejemplo: NaCl 0,9 % p:v, prefiriendose
un pH cercano a la neutralidad, si bien la implantacion
quirurgica de precipitados etanolicos del plasmido puro
tambien resulta efectiva (4).
[3] El numero de fibras transfectadas, salvo en casos
particulares, resulta inferior al 1 % del total que compone al
musculo en cuestion, pero la expresion es detectable durante
mas de un ano (15), especialmente cuando se emplean promotores
virales promiscuos como el inmediato-temprano del
citomegalovirus humano.
[4] La presencia fisica del plasmido en el tejido muscular, al
igual que su expresion, es detectable durante varios meses
(15), a pesar de que la mayor parte tiende a ser degradado
rapidamente, y de que no hay evidencias de su integracion ni
de su replicacion en el ambiente [posmitotico] de las fibras
musculares (15). La forma superenrollada del plasmido resulta
20-100 veces mas eficiente que la lineal (15), lo cual pudiera
estar relacionado con una mayor resistencia a la degradacion o
con el mecanismo, aun desconocido, de entrada a la celula.
[5] En muy pocos casos la inyeccion del plasmido provoca
infiltracion de celulas mononucleares al tejido muscular (17),
y tambien es limitado el numero de fibras danadas por esta
tecnica.
[6] En el modelo murino, se considera que la dosis saturante
de plasmido es inferior a 50 ug (16), y si bien es
recomendable inyectar durante las semanas de rapido
crecimiento (12), se ha verificado expresion en casi todas las
edades del animal. Entre las especies donde inicialmente
tambien se demostro expresion mediante la inyeccion de ADN
plasmidico se incluyen carpas, pollos, perros, gatos, puercos,
hamsters y conejos.
[7] Por ultimo, las moleculas de ARN transcritas y procesadas
apropiadamente in vitro tambien generan expresion
detectable por esta tecnica, pero mucho mas transiente que la
generada por el ADN plasmidico (3).
De todas las generalizaciones aportadas por los estudios
iniciales referidos arriba (3-23), quedaba claro que la
tecnologia de transferencia directa de ADN desnudo era una
realidad que podria revolucionar los protocolos convencionales
de terapia genica, especialmente los disenados para combatir
miopatias primarias como la distrofia muscular de Duchenne,
entre otras, y en este sentido se comenzo a investigar (8).
La inmunizacion con ADN
Al margen de las posibles aplicaciones terapeuticas de la
transferencia directa de ADN desnudo, quedaba otro campo aun
sin explorar: ¨seria posible generar una respuesta inmune en
el hospedero al transferirle genes heterologos? ¨Cuan efectiva
resultaria dicha respuesta para protegerlo contra un patogeno
especifico?
En 1992, De-chu Tang y colaboradores en la Universidad de
Texas (EE.UU.), responden afirmativamente la primera de las
interrogantes anteriores al detectar anticuerpos en ratones
inoculados con los genes de la hormona del crecimiento y/o la
antitripsina alfa1 humanas, si bien la tecnica empleada
en este caso no fue la inyeccion intramuscular, sino la
proyeccion intradermica de microparticulas de oro recubiertas
superficialmente con los plasmidos en cuestion (26). Esta
variante de administracion in vivo del ADN plasmidico
sera abordada con algun detalle mas adelante. En el mismo
reporte (26), se noto una evidente respuesta secundaria al
inmunizar mas de una vez los animales, pudiendose detectar los
anticuerpos durante al menos cinco meses.
A partir de entonces, numerosos grupos cientificos interesados
en generar inmunidad protectora contra determinados patogenos
(especialmente intracelulares), decidieron ensayar la
inmunizacion con ADN para determinar si las respuestas inmunes
obtenidas mediante esta tecnica tenian algun significado
biologico (revisado en 27-32). De ser asi, podrian compararse
los resultados de esta incipiente tecnologia con los
alcanzados mediante las ya convencionales (inmunizacion con
proteinas puras, microorganismos inactivados o atenuados,
etc.).
Un patogeno en el que se comenzo a trabajar con gran
intensidad fue el virus de la influenza humana (33-43,
revisado en 44) empleando como modelos animales ratones,
pollos, y mas recientemente, hurones.
Los resultados positivos obtenidos han superado con toda
seguridad cualquier vaticinio preliminar. En el modelo murino,
en varios casos se generaron titulos discretos de anticuerpos
contra la hemaglutinina (HA) y la nucleocapsida (NP), los que
resultaron capaces de inhibir la hemaglutinacion viral e
incluso neutralizar el virus in vitro. Se genero,
ademas, respuesta citotoxica de amplio espectro contra NP, la
cual fue detectable aun al ano de la inmunizacion (38, 42).
Pero lo que resulta mas importante: en dependencia de la dosis
de ADN y la via de inmunizacion empleada, hasta un 95 % de los
ratones inmunizados quedaron protegidos contra un reto letal
del virus de la influenza (33-35, 40).
Los estudios realizados con este ortomixovirus no solo
demuestran que las vacunas de ADN resultan de hecho efectivas,
sino que han modificado en gran medida los conocimientos
iniciales ya mencionados sobre la transferencia directa de ADN
desnudo.
Por ejemplo, ademas de la via intramuscular de inmunizacion,
la intravenosa (35) y la intradermica (35, 42) tambien generan
respuestas inmunes importantes. Asimismo, en ratones la dosis
de ADN plasmidico puede ser tan poca como 1 microg
(40), y si se emplea la variante de los microproyectiles
intradermicos, mucho menor aun (35).
Otro importante patogeno abordado por la inmunizacion con ADN
es el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH-1) (45-53). En
este caso, se han obtenido anticuerpos contra epitopes
relevantes de las glicoproteinas gp120 y gp41 en ratones y
primates no humanos. Estos anticuerpos neutralizan in
vitro al virus, inhiben la formacion de sincisio por el
mismo, e interfieren parcialmente la union de gp120 con su
receptor celular (45, 46).
Ademas, tambien se genera respuesta citotoxica contra las
proteinas gp160 y gp120 de este retrovirus, la cual tiende a
anteceder la aparicion de los anticuerpos (47), y resulta
suficiente para proteger a mas del 90 % de los ratones
inmunizados de un reto letal con celulas tumorales
transfectadas con la gp160 del propio VIH-1 (48).
Un resumen de los principales patogenos donde se ha aplicado
(con mayor o menor exito) la inmunizacion con ADN, aparece en
la Tabla 1; tambien se han iniciado estudios con los genes de
las proteinas gB de citomegalovirus, porinas de Salmonella
typhi, y varios antigenos flavivirales, entre otros.
Tabla 1. Principales patogenos contra los que se ha aplicado
la inmunizacion con ADN.
PATOGENO COMENTARIOS REFERENCIAS
----------------------------------------------------------
Herpesvirus Anticuerpos murinos (92)
bovino 1 contra gI, gIII, y gIV,
estos ultimos neutralizantes.
La inmunizacion de terneros con
el gen de gIV confiere
proteccion parcial.
Virus de las Anticuerpos murinos contra (93-101,102)
hepatitis B y C proteinas quimericas NP
(del VHC) y preS2-S o S (del VHB).
Tambien en ratas y conejosse han
generado anticuerpos contra S,
y se ha detectado respuesta
citotoxicaen ratones contra
la NP del VHC.
Virus de la Escasos anticuerpos murinos (103-105)
corio-meningitis contra la NP o GP pero
linfocitica, sensibilizacion de linfocitos
citotoxicosin vivo y 50 % de
proteccion (en ocasiones
inmunoamplificacion).
Virus de la rabia Obtencion de anticuerpos murinos (106, 107, 76)
neutralizantes y respuesta
citotoxica contra gG, asi como
inmunidad protectora, detectandose
adyuvacion o supresion mediante
la coinoculacion de plasmidos
codificantes para GM-CSF o IFN-ganma,
respectivamente.
Micobacterias La inmunizacion de ratones con (108)
el gen de HSP65 de M. leprae rinde
menores bacteremias hepaticas tras
un reto con M. tuberculosis.
Tambien se estudian los genes de
HSP65, 85A, 85B y 85C de M. tuberculosis.
Leishmania major La inmunizacion de ratones con (109, 110)
el gen de gp63 de L. major confiere
proteccion parcial.
Plasmodium yoelii Obtencion de anticuerpos murinos (111-114)
contra el antigeno CSP de P. yoelii
(los que in vitro inhiben
parcialmente la invasion microbiana a
hepatocitos), asi como respuesta
citotoxica y proteccion parcial.
Virus herpes Anticuerpos murinos contra gB de (115, 116, 117)
simplex HSV-1 poco neutralizantes, pero
80 % de proteccion. Tambien
anticuerpos neutralizantes contra
gD de HSV-2.
Schistosoma Anticuerpos murinos contra Sj97, (118)
japonicum no asi contra Sj26.
Mycoplasma Anticuerpos murinos y respuesta (119, 84)
pulmonis citotoxica contra determinados
antigenos.
Cryptosporidium La inmunizacion de ovejas con (120)
parvum el gen de CP15/60 genera
anticuerpos en suero y calostro.
Papilomavirus La inmunizacion con el gen de (121)
L1 en conejos genero anticuerpos
neutralizantes y protectores.
Vias Alternativas
Ademas de la inyeccion intramuscular en solucion salina
fisiologica, se han desarrollado varias vias alternativas de
inmunizacion, algunas de las cuales ya han demostrado ser
superiores a la primera. A continuacion se describen
brevemente estas vias alternativas. Tambien aparecen
relacionadas, en aras de brindar un cuadro mas completo,
algunas estrategias directas de inmunizacion con ADN que no lo
emplean desnudo exactamente, sino conjugado a otras moleculas.
Estas estrategias persiguen, en ultima instancia, lograr una
transfeccion mas eficiente in vivo, o dirigir
especificamente la expresion a determinado tejido de interes
que no sea el muscular estriado.
Canon de microparticulas
En la seccion anterior se menciono el empleo de los
microproyectiles intradermicos, primero como reporte original
de la obtencion de anticuerpos al inmunizar con ADN (26), y ya
luego aplicado al caso especifico del virus de la influenza
humana (35).
Esta variante de administracion hace uso de un canon capaz de
propulsar las microparticulas recubiertas con el ADN en
cuestion a traves de varias capas celulares del tejido a
transfectar, bien sea este un organo quirurgicamente expuesto,
o simplemente la piel (54-56).
La expresion de los genes transferidos mediante esta tecnica,
al igual que con la inyeccion directa, se ha demostrado en
multiples especies de animales (raton, rata, hamster, conejo y
mono rhesus), pero distintivamente, la misma no se limita solo
al musculo estriado, sino que es detectable tambien en
epidermis, dermis, higado, rinon, pancreas y, algo menos, en
corazon, bazo y musculos abdominales (22).
Con dosis tan bajas como 15 ng de ADN ya es posible obtener
una respuesta biologica eficiente (57), lo que es atribuible
no solo a la alta efectividad en la entrega intracelular del
ADN, sino tambien a la posibilidad de transfectar tejidos mas
inmuno-competentes que el musculo (58).
Propulsor de fluidos
El principio de funcionamiento es la proyeccion con alta
presion de la solucion donde se halla disuelto el ADN. Este
procedimiento ha sido empleado con anterioridad para la
vacunacion convencional en humanos.
Al parecer no resulta tan eficaz como el canon de
microparticulas, pero el mero hecho de no introducir tales
particulas metalicas en el organismo, lo hace muy atractivo
para una presunta inmunizacion con ADN en seres humanos.
Ademas, esta tecnica mantiene la ventaja de permitir expresion
no solo en el musculo estriado, sino tambien en piel, tejido
adiposo y glandulas mamarias (59, 60), lo cual genera
respuestas humorales y celulares significativas (61).
Complejos ADN lipidos (30, 62)
Si bien la inyeccion intramuscular directa de complejos ADN
lipidos no rinde ventajas significativas sobre el ADN desnudo,
por via intravenosa si se obtiene con ellos una expresion
importante en musculo, asi como en muchos otros tejidos y
organos: pulmon, rinon, higado, bazo, timo, medula osea,
endotelio vascular, utero, pancreas e intestino. Sin embargo,
la expresion en estos tejidos resulta, por lo general, menos
duradera que en el musculo, aunque en ratones tambien se ha
reportado la transferencia y expresion de dichos complejos en
los fetos y progenie neonata de hembras inmunizadas (63).
Complejos ADN proteinas (64-66)
Se han empleado multiples variantes de complejos ADN
proteinas. La eleccion de la proteina (transferrina, insulina,
asialoglico-proteinas, etc.) se basa en la presencia de los
receptores celulares especificos en el tejido a transfectar
(66). Ademas, tambien se han desarrollado complejos mas
sofisticados que incluyen particulas adenovirales no
replicativas, con el objetivo de favorecer el escape endosomal
una vez endocitado el complejo (65).
Otras Aplicaciones
Las aplicaciones de la transferencia directa de genes no se
reducen a generar inmunidad contra agentes infecciosos, sino
que, mediante la transferencia de los genes codificantes para
las proteinas del sistema principal de histocompatibilidad
(67-72), multiples linfoquinas (73-76), regiones variables de
inmunoglobulinas (77), el receptor de las celulas T (78) asi
como las moleculas de diferenciacion CD4 y CD8 (79), ya se ha
comenzado a manipular in vivo el sistema inmune de una
forma mucho mas practica que las disponibles por las
metodologias convencionales.
Los resultados obtenidos en este campo son tambien muy
alentadores, como lo indican los ejemplos citados a
continuacion:
1. En ratones, la transferencia intramuscular de los genes de
IL2, IL4 y GM-CSF adyuva la respuesta humoral que estos
animales desarrollan contra un antigeno determinado, mientras
que la transferencia de los genes de TGF-beta1 y
IFN-ganma la suprimen (73, 76). Asimismo, la
administracion intravenosa de los genes del propio
TGF-beta1 y de PDGF B, provoca marcados efectos
biologicos en el tejido endotelial transfectado (75, 80).
2. Se han iniciado estudios con los genes codificantes para la
cadena de receptores de celulas T patogenicos (provenientes
de tejidos sinoviales de pacientes con artritis reumatoide), y
es posible generar respuesta humoral contra esa proteina en
ratones (78), lo cual pudiera tener importancia terapeutica de
verificarse en humanos.
3. Varios esquemas de inmunizacion con ADN plasmidico se han
realizado en animales para generar una respuesta inmune
protectora antitumoral. Los transgenes por excelencia han
resultado ser las moleculas del sistema principal de
histocompatibilidad tipo I (67, 68, 71, 72) (con el proposito
de provocar un rechazo hacia las celulas tumorales
transfectadas), si bien otros candidatos (como los antigenos T
del virus SV40 y el antigeno carcinoembrionario) tambien han
sido empleados (81). Por lo general, en estos estudios el ADN
se ha evaluado acomplejado con lipidos cationicos, buscando
amplificar los efectos biologicos de la terapia (respuesta
citotoxica antitumoral, regresion o progresion retardada del
tumor, etc.), pero en solucion salina fisiologica tambien se
desata una respuesta inmune en el animal vacunado (69, 70).
Es precisamente en patologias incurables por la medicina
actual, donde la transferencia directa de ADN ha sido
aplicada en seres humanos por primera vez. Varios estudios
clinicos de fase I y II, que involucran en total a decenas de
pacientes de cancer, han sido realizados o estan en desarrollo
en EE.UU. (82).
En estos estudios, los parametros seguidos mas rigurosamente
han sido la toxicidad de la formulacion, la aparicion de
sintomas de autoinmunidad y por supuesto, la cuantificacion y
localizacion tanto de la proteina foranea como del plasmido
que la codifica. Aun es muy temprano para emitir veredicto
alguno sobre los efectos biologicos de la terapia, si se toma
en cuenta que las vias de inoculacion, formulaciones y dosis
aun estan siendo optimizadas.
Por ultimo, no debe omitirse aqui la mencion de dos
aplicaciones muy recientes de la inmunizacion con ADN, y que
resultan no menos espectaculares:
1. El empleo de determinadas bacterias transformadas con el
plasmido de interes como vehiculo vivo para su entrega a nivel
de las mucosas (83).
2. La inmunizacion directa con bibliotecas genomicas de
determinados patogenos, como metodologia de identificacion de
los antigenos protectores contra ellos (84).
Bioseguridad y Regulaciones
Tres consecuencias negativas que en principio podrian
derivarse de la inmunizacion con ADN son:
1. La aparicion de anticuerpos contra el ADN inyectado pudiera
generar estados autoinmunes reminiscentes de los que se
presentan, por ejemplo, en el lupus eritematoso sistemico.
2. La integracion genomica al azar del ADN inyectado pudiera
activar un oncogen, inactivar genes supresores de oncogenes,
etc.
3. La expresion continua de bajos niveles del antigeno, y su
presentacion al sistema inmune por largos periodos, pudiera
generar estados de tolerancia, hiperinmunidad, etc.
El primero de estos puntos es tal vez el menos preocupante de
los tres, ya que durante anos se conoce la escasa
inmunogenicidad de la conformacion B (mas usual) del ADN,
especialmente libre en solucion. La obtencion de anticuerpos
contra el ADN B se logra mediante su conjugacion a proteinas
inmunogenicas. Ademas, de los anticuerpos contra el ADN
doblecatenario, solamente aquellos de alta afinidad que posean
aminoacidos basicos en sus paratopos resultan realmente
patogenicos, al depositarse fundamentalmente en la membrana
basal de los glomerulos (85). Por ultimo, en todos los
esquemas de inmunizacion con ADN donde se han buscado
anticuerpos anti-ADN, estos nunca se han detectado (14).
Los otros dos aspectos son de mayor significacion, y a su vez,
mucho mas dificiles de monitorear in vivo.
Los plasmidos que se emplean para la inmunizacion no poseen
regiones reportadas como origenes de replicacion en celulas
eucarioticas, ni tampoco secuencias homologas promotoras de
eventos recombinativos-integrativos (exceptuando los casos
donde el gen a transferir es homologo). Ademas, nunca se ha
logrado detectar esos eventos experimentalmente (15), si bien
es imposible aun excluir su ocurrencia al azar con muy baja
frecuencia.
Tampoco se han detectado sintomas de tolerancia o
hiperinmunidad en los animales inmunizados con ADN, ni ningun
tipo de trastorno autoinmune degenerativo. Pero, obviamente,
muchos experimentos controlados han de ser disenados aun antes
de que la ultima palabra sobre tan delicado aspecto sea
dicha.
Tal vez una alternativa que aun no haya sido apreciada a
cabalidad sea el empleo del ARN en lugar del ADN. De hecho, ya
se han comenzado a desarrollar sistemas replicativos de ARN
capaces de rendir expresiones suficientemente estables como
para generar respuestas inmunes significativas (86, 87).
Conclusiones
¨Cuanto habra que esperar para la aplicacion en seres humanos
de una vacuna de ADN? La respuesta depende de los
conocimientos que suministren los estudios mencionados arriba.
Tambien depende del patogeno especifico contra el que se
pretenda proteger. Por ejemplo, en el caso del HIV-1
(incurable por la ciencia actual) algunas companias
norteamericanas ya han obtenido la autorizacion oficial para
realizar experimentos de inmunizacion con ADN en seres
humanos.
Los controles que habran de realizarse preliminarmente, asi
como las regulaciones que regiran la presunta aplicacion en
humanos de la primera vacuna de ADN, recien comienzan a ser
discutidos (88, 89, 90, 91), y ya se han celebrado varios
eventos internacionales de gran prestigio para abordar el tema
de las vacunas de ADN, como los sostenidos en Ginebra (Suiza)
en mayo '94, en Arlington (EE.UU.) en abril '95, y en Bethesda
(EE.UU.) en febrero '95 y '96.
Son muchos los argumentos emitidos por la comunidad
cientifica internacional fuera y dentro de estos eventos,
tanto a favor como en contra de una posible vacunacion con ADN
en seres humanos. Muchas son las interrogantes que se han
abierto, y muchas seran las que surjan en la medida que las
primeras encuentren respuesta en los resultados experimentales
que vayan obteniendose.
Por hoy, nos basta con saber que la inmunizacion con acidos
nucleicos desnudos es ya una alternativa real que va
abriendose camino paulatinamente como forma practica de
manipulacion del sistema inmune. Para manana nos queda la gran
incertidumbre de si esta tecnica llegara a convertirse o no en
una nueva generacion de vacunas humanas.
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