Biotecnologia Aplicada Elfos Scientiae ISSN: 0684-4551 Vol. 13, Num. 2, 1996

Seleccion temprana de banano y pl tano resistentes a Mycosphaerella fijensis (Morelet) mediante fitotoxinas

JA Pino Algora^1 W Navarro^2 R Salazar^2 y Ana T Valerin^2

1 Instituto de Investigaciones de Viandas Tropicales (INIVIT). Apdo. 6, Santo Domingo CP 53000, Villa Clara, Cuba.

2 Universidad Nacional de Heredia, Apdo. 86-3000, Heredia, Costa Rica.

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Introduccion

La gran cantidad de materiales geneticos de Musa que se obtienen por las diferentes vias del mejoramiento y fundamentalmente a traves de metodos biotecnologicos requieren de varios anos para su evaluacion y seleccion frente a la enfermedad Sigatoka negra (M. fijiensis) mediante las metodologias tradicionales en condiciones de campo. Sin embargo, el reporte preliminar sobre la posibilidad de inducir sintomas de la enfermedad con la utilizacion de metabolitos del patogeno (1) sugirio su aplicacion para la diferenciacion de cultivares resistentes y susceptibles. En base a lo anterior, la seleccion temprana de materiales geneticos de Musa spp. mediante fitotoxinas fueron los objetivos de la presente investigacion.

Materiales y Metodos

Se multiplicaron in vitro hasta la fase de enraizamiento 6 mutantes del clon "Gran Enano" (AAA) obtenidos mediante el tratamiento con Ethil-metano-sulfanato (EMS); una seleccion de platano (AAB) Subgrupo Plantain; 6 cultivares y especies (AA) con niveles diferenciales de resistencia y susceptibilidad (Calcuta 4; Tuugia; Niyarma yik; SF-215/NBA-14; Pisang Mas y Pisang Berlin) y el clon progenitor "Gran Enano" no mutado. Las fitotoxinas de M. fijiensis se obtuvieron mediante el cultivo liquido y su posterior purificacion segun metodo reportado (1 y 2) modificado para que en el extracto metabolico contuvieran los 7 compuestos fitotoxicos del patogeno. Las vitroplantas se plantaron en potes con suelo esteril las que fueron ino-culadas a los 7 dias mediante puncion con una aguja monojet (clinica) que contenia una solucion del extracto metabolico diluido en 10 mL de agua desionizada destilada esteril; los potes se taparon para evitar la evaporacion en el punto de inoculacion. Como criterio de seleccion se adopto que todo mutante que presentara un retardo en tiempo de inicio del dano y la superficie de esta sean infe-riores a los cultivares susceptibles diferenciales y al clon "Gran Enano" no mutado, corresponderian niveles superiores de resistencia.

Las evaluaciones se realizaron cada 24 horas determinandose el area foliar afectada. Los datos se procesaron estadisticamente mediante un procedimiento ANOVA y se utilizo el Test de Rangos Multiples de Ducan a nivel de significacion 0,05.

Discusion

Se observo una diferenciacion de respuestas a la accion fitotoxica del metabolito del patogeno con relacion a los mutantes del clon "Gran Enano" y los cultivares diferenciales, que arrojo diferencias significativas (0,05), tanto el tiempo de inicio de la necrosis, como en sus dimensiones. Los cultivares (AA) altamente susceptibles (Niyarma yik; SF215/NBA-14) y Gran Enano manifestaron los sintomas a las 24 horas mientras que los seis mutantes de este a las 96 horas; el area foliar necrotica alcanzo dimensiones de 49,2 y 40,2 y 49,2 mm2 res-pectivamente las 120 horas. Mientras que en cinco mutantes las dimensiones fueron entre 1,07 y 2,26 mm^2 sin diferencias significativa entre ellos y si con respecto a los moderadamente susceptibles; las observaciones posteriores a las 120 horas no arrojaron aumento de necrosis en todo los cultivares en evaluacion. Las especies silvestres presentaron reacciones de hipersensibilidad a las 48 horas y la seleccion de platano presento necrosis a las 72 horas (6,07 mm^2) con relacion moderadamente susceptible.

El comportamiento de los mutantes en el campo sin aplicar control fitosanitario durante el ano 1993 en el campo de seleccion en La Rita, Costa Rica, confirmo la resistencia de estos materiales, lo que corroboro la efectividad del metodo empleado, que permite seleccionar en fase de vitroplantas materiales geneticos con niveles de resistencia de resistencia altos; lo que confirma la potencialidad de la utilizacion de las fitotoxinas en el proceso de seleccion enmarcado en un sistema de cultivo de tejidos (3).

1. Upadhuay et al. Experintia 1990; 46:983-984.

2. Pinkerton F and Strobel GA Proc. Nat. Acad. Sci. 1976;73:4007-4011.

3. Novak F et al. Biotech 7:154-159.

Copyright 1996 Elfos Scientiae