Biotecnologia Aplicada Elfos Scientiae ISSN: 0684-4551 Vol. 13, Num. 2, 1996

Resistencia a glifosato en callos de cana de azucar. I. caracterizacion isoenzimatica y estudio ultraestructural

Silvio Bravo^1 AY Zambrano^2 JR Demey^3 y Auristela de Mirt^4

1 Estudiante graduado. Departamento de Ambiente y Tecnologia Agricola-UNEFM. Coro, 4101 Falcon, Venezuela.

2 Departamento de Ambiente y Tecnologia Agricola, UNEFM. Coro 4101 Falcon. Venezuela, e-mail:azambra@conicit.ve.

3 Facultad de Agronomia, UCV. Apdo. 4579 Maracay, 2101 Aragua. Venezuela ,e-mail:jdemey@conicit.ve.

4 Unidad de Microscopia Electronica - UNEFM. Coro, 4101 Venezuela.

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Introduccion

Un serio problema enfrentado en los programas de mejoramiento, utilizando los metodos convencionales, es el tiempo que se invierte en la produccion de un nuevo cultivar. El establecimiento de tecnicas de manipulacion de tejidos vegetales in vitro permite a los programas tradicionales de mejoramiento genetico, la generacion de variabilidad y seleccion de caracteristicas deseables en menor tiempo (1,2). El presente trabajo evaluo el efecto del cultivo in vitro de tejido calloso sobre la generacion de variabilidad para resistencia a dosis crecientes del herbicida Glifosato en cultivares de cana de azucar (Saccharum spp) altamente productivos.

Materiales y Metodos

Se utilizaron los cultivares PR692176, PR980 y V64-10 de cana de azucar. Sobre callos generados en medio M&S (3) modificado por Liu 1984 (4) se procedio a la induccion de variabilidad a dosis creciente de Glifosato (0, 0,2, 0,4, 0,6 y 0,8 mM/I) en el medio. Se evaluo semanalmente peso seco durante 3 semanas y para la semana 3 se establecieron los patrones isoenzimaticos de Peroxidasa y se realizaron estudios ultraestructurales.

Resultados Y Discusion

1. El cultivar V64-10 fue el que tuvo un comportamiento de mayor susceptibilidad ante dosis crecientes de Glifosato, seguido por el cultivar PR692176 y con menor susceptibilidad el cultivar PR980, a traves de la evaluacion del peso seco.

2. La reduccion e inhibicion en la actividad isoenzimatica a medida que se incrementa el nivel de Glifosato en el medio de cultivo indica la generacion de lineas resistentes a 0,2 mM, 0,4 mM, 0,6 mM y 0,8 mM del herbicida por litro de medio (Figura 1).

3. La reduccion e inhibicion en la actividad isoenzimatica a medida que se incrementa la concentracion de Glifosato en el medio de crecimiento puede indicar cambios somaclonales o mutacionales que generan resistencia al herbicida.

4. Para los tres cultivares PR692176, PR980 y V64-10 el efecto fitotoxico del Glifosato a nivel celular fue sobre el contenido citoplasmatico con desintegracion del nucleo, organelos y pared celular.

Figura 1. Diagrama de Patrones electroforeticos de isoenzimas de peroxidasas: (a) Cultivar PR692176, (b) Cultivar PR980 y (c) Cultivar V64-10.

1. Gonzalez V. IV Congreso Venezolano de Genetica. 1990.

2. Zambrano AY, Gonzalez V y Demey JR. Agronomia Tropical. 1995; 45(3):352- 364.

3. Murashige T y Skoog F. Phisiologia Plantarum 1962; 15:473-497.

4. Liu MC. Handbook of plant cell culture. 1984; 572-605.

Copyright 1996 Elfos Scientiae

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