Biotecnologia Aplicada Elfos Scientiae ISSN: 0684-4551 Vol. 13, Num. 3, 1996, pp. 211

INMOVILIZACION DE ENZIMAS DE POSIBLE USO INDUSTRIAL, SELECCION DE SOPORTES A PARTIR DE MATERIAS PRIMAS DE BAJO COSTO

Niury Acosta^1 y ngeles Heras^2

^1 Division de Biotecnologia Industrial. Centro de Ingenieria Genetica y Biotecnologia. Apartado Postal 6162, Ciudad de La Habana. Cuba.

^2 Departamento de Quimica-Fisica. Facultad de Farmacia. Instituto Pluridisciplinario. Universidad Complutense. 28040 Madrid, Espana.

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La alfa-quimotripsina, segun la bibliografia, tanto en estado libre como inmovilizada, presenta actividad catalitica en medios parcial o totalmente organicos (2), lo que incrementa su actividad sintetasica, que a su vez implica la posibilidad de obtencion de peptidos via enzimatica.

La quitina obtenida de diferentes fuentes naturales (langosta, langostinos, cigalas, galeras, cangrejos espanol y cangrejo americano) de acuerdo al protocolo puesto a punto en este trabajo; se caracterizo por espectroscopia de IR, microscopia electronica de barrido, grado de desacetilacion y medidas de acuofilia. La caracterizacion fisico-quimica de las muestra obtenidas, diferencia a cada una de ellas, encontrandose posteriormente una relacion entre la actividad enzimatica de los derivados inmovilizados y sus propiedades.

En todas las quitinas obtenidas se inmovilizo alfa-quimotripsina via glutaraldehido, realizandose el estudio de sus actividades hidroliticas y sintetasicas en medios acuosos y acuoso-organicos respectivamente.

Los resultados obtenidos muestran un rendimiento de obtencion similar para las diversas fuentes utilizadas (15-23 %), asi como el rendimiento de inmovilizacion (90 %). El derivado de alfa- quimotripsina inmovilizado en quitina obtenida de langostinos es el mas activo, tanto hidroliticamente, nueve veces mas que la enzima libre y sintetasicamente, 90 % de rendimiento del peptido Bz-Tyr-Leu-NH2 (medio organico, 70 % butanodiol en tampon carbonato pH 9); interpretandose este hecho como consecuencia de la mayor acuofilia, estructura superficial del soporte y grado de desacetilacion de esta muestra concreta. El estudio calorimetrico llevado a cabo con este derivado indica que las interacciones medio parcialmente organico-enzima inmovilizada son irreversibles. Ademas, existe una relacion entre sus constantes cineticas hidroliticas y las diferentes estructuras, siendo el derivado inmovilizado en quitina de langostinos el mejor respecto a su mecanismo cinetico.

Se puede concluir por tanto que una aplicacion de las quitinas es su utilizacion como soporte en la inmovilizacion de alfa- quimotripsina, siendo de gran relevancia la sintesis peptidica en medios parcialmente organicos.

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