Biotecnologia Aplicada Elfos Scientiae ISSN: 0684-4551 Vol. 13, Num. 4, 1996

Evaluacion De La Tecnica De Crioconservacion Para Preservar A Largo Plazo Los Recursos Geneticos De La Cana De Azucar

MT Gonzalez-Arnao,^1 C Urra,^1 F Engelmann,^2 R Ortiz,^3

C de la Fe,^3 E Lukse^1 y A Rodriguez^3

^1 CNIC ave. 25 y 158, Apartado postal 6990, Cubanacan, Ciudad de La Habana, Cuba. ^2 IPGRI Via delle Sette Chiese 142, 00145, Roma, Italia. ^3 INCA San Jose Km. 3 1/2 CP 32700, La Habana, Cuba.

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Introduccion

Para que un metodo de conservacion in vitro sea eficiente, es necesario que cumpla con dos requisitos: mantener la estabilidad genetica del material y garantizar altos niveles de recuperacion despues del almacenamiento (1).

En el presente trabajo se evaluo mediante parametros agronomicos y bioquimicos la tecnica desarrollada para crioconservar los apices de la cana de azucar (almacenamiento en nitrogeno liquido, -196 C) y se comparo este metodo con la conservacion a temperaturas superiores por diferentes periodos de tiempo.

Materiales y Metodos

Se utilizaron apice de plantas in vitro de cuatro variedades: C. 87-51, C. 26670, B. 34104 y B. 4362.

El protocolo de conservacion, contemplo el uso de la tecnica de encapsulacion-deshidratacion (2, 3) y el tejido se almaceno a +12, -20, -70 y -196 C durante 0, 10, 120, 180 y 365 dias.

Para las muestras crioconservadas, se evaluaron seis caracteristicas agricolas y siete botanicas en condiciones de campo y se aplicaron dos sistemas isoenzimaticos (esterasas y peroxidasas) con materiales in vitro.

Discusion

La respuesta de los apices en funcion de la temperatura y el tiempo de conservacion, reflejo que solo las muestras crioconservadas mantuvieron la viabilidad del tejido a lo largo del almacenamiento y que los niveles de sobrevivencia dependieron del factor varietal y no de la permanencia en el nitrogeno liquido (C. 87-51: 70 %, C. 26670: 82 %, B. 34104: 67 % y B. 4362: 83 %). A temperaturas superiores por el contrario, la perdida de la viabilidad se hizo evidente transcurridos los 10 primeros dias de la conservacion.

No se detectaron diferencias significativas (P < 0,05) en los parametros agronomicos evaluados, entre las muestras controles y las crioconservadas. Los perfiles electroforeticos reflejaron las caracteristicas de las muestras patrones para los dos sistemas isoenzimaticos empleados.

Todo esto demuestra, que la crioconservacion no induce modificaciones geneticas en el material biologico almacenado y que constituye un metodo seguro para preservar a largo plazo el germoplasma de la cana de azcar.

References

Villalobos VM, Engelmann F. World Journal of Microbiology and Biotechnology (en impresi¢n).1995.

Gonzalez-Arnao MT, et al. Biotecnolog¡a Aplicada 1993;10(3):225-228.

Gonzalez-Arnao MT, et al. Cryo-Letters 1993;14:303- 308.

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