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Revista Colombia Médica
Universidad del Valle - Facultad de Salud
ISSN: 0120-8322 EISSN: 1657-9534
Vol. 39, Num. 2s2, 2008, pp. 61-102
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Revista Colombia Médica, Vol. 39, No. 2, Supp. 2, Apr-Jun, 2008, pp. 66-102
RESÚMENES
V CONGRESO INTERNACIONAL -
VIII CONGRESO COLOMBIANO DE GENÉTICA
Code Number: rc08044
Análisis fenotípico y molecular de una familia colombiana con enfermedad de Fabry
P Páez, A López, S Ospina, N Gelvez, C Durán, JC Prieto
Instituto de Genética Humana, Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia
La enfermedad de Fabry (EF)
es una entidad recesiva ligada al cromosoma X que se debe al
déficit de la enzima lisosomal a galactosidasa A (GALA). El
déficit enzimático produce la acumulación de su
principal sustrato (globotriaosilcerebrosido) en el endotelio. El
diagnóstico en los hombres se confirma con la actividad
disminuida de GALA en plasma, leucocitos y/o células cultivadas.
En las mujeres heterocigotas la actividad de la enzima GALA normal no
excluye el estado portador de las mujeres; por tanto, la
identificación de la mutación en GALA en la única
forma de identificar su estado de heterocigocidad. Se estudió
una familia colombiana con EF a nivel fenotípico y molecular
para establecer signos y síntomas de portadoras y afectados y
niveles enzimáticos de GALA. Se determinó la
mutación por medio de secuenciación completa del gen y su
segregación en la familia, se estableció
correlación genotipo-fenotipo y estudio de concordancia entre
estado de heterocigocidad de portadoras con niveles enzimáticos
de GALA. Se determinó el haplotipo que segregaba con la
enfermedad en los individuos afectados y portadoras obligadas mediante
STRs que flanquean el gen GALA (DXS101 y DXS724). Se identificaron 5
afectados y dos portadoras obligadas. Las manifestaciones
clínicas de los afectados corresponden al fenotipo
clásico de EF: acroparestesias, hipohidrosis, angioqueratomas,
palpitaciones y compromiso renal de severidad variable como hallazgos
principales. Las mujeres portadoras tienen compromiso vascular de SNC y
opacidad corneana. Todos los hombres afectados se identificaron como
hemicigotos para la mutación: C’!T, Arg342’!stop en
el exon 7. Las dos mujeres portadoras fueron identificadas como
heterocigotas para la misma mutación. La mutación
descrita tiene efectos en el plegamiento de la proteína,
hallazgo que se correlaciona con el fenotipo severo de los pacientes.
Se confirmó la segregación de haplotipos con la
enfermedad por medio de los marcadores DXS101 y el DXS7424.
Análisis molecular y enzimático de la glucosa 6 fosfato deshidrogenasa en una muestra de Santafe de Bogotá
Magda Carolina Sánchez, Dora Fonseca, Victoria Villegas
Unidad de
Biología Celular y Molecular. Unidad de Genética,
Instituto de Ciencias Básicas, Facultad de Medicina, Universidad
del Rosario, Bogotá, Colombia
Objetivo: Determinar la
frecuencia de la deficiencia de glucosa-6-fosfato deshidrogenasa (G6PD)
y las variantes moleculares en una muestra de Bogotá.
Metodología: Se
determinó la actividad de G6PD en muestras de sangre de 348
individuos sanos. En los casos con actividad enzimática anormal
se realizó extracción de ADN, amplificación
mediante reacción en cadena de polimerasa y análisis de
polimorfismos de longitud de restricción polimórfica
(RLFP) para la identificación de las variantes A+, A- y
mediterránea, con las enzimas NlaIII, FokI y MboII.
Resultados: Hubo deficiencia
en 2%. No se evidenciaron las variantes A+, A- ni mediterránea.
Uno de los pacientes tiene un patrón electroforético de
un producto amplificado de menor tamaño. Se establecieron
valores de referencia en la población de estudio.
Discusión y
conclusiones : La frecuencia de la actividad enzimática anormal
de G6PD encontrada está dentro de los informes a nivel mundial,
que oscila entre 0.5% y 6.9%, se presentan diferencias con datos de
Buenaventura, que informa hasta 13.5%, lo que puede explicarse por el
origen étnico y su relación con ser o no zona
endémica para malaria. Los resultados, permiten inferir que esta
es una eritroenzimopatía frecuente en el país. El
análisis molecular no mostró la presencia de las
variantes moleculares más comunes, lo que permite sospechar la
presencia de nuevas variantes en la población colombiana,
este hecho se puede afirmar en el hallazgo de un paciente con
amplificación distinta.
El
transportador de hormona tiroidea Slco1c1 se expresa en la
cóclea durante el período de desarrollo altamente
sensible a hormona tiroidea
María Claudia Lattig, Lori L. Hampton, James F. Battey
National
Institute of Neurological Disorders and Stroke, National Institutes of
Health, Bethesda, USA. Laboratorio de Genética Humana,
Universidad de los Andes, Bogotá, Colombia
La deficiencia de la hormona
tiroidea durante el desarrollo pre y neonatal es crítica para el
desarrollo y normal funcionamiento del sistema nervioso central. En
ratones, se ha demostrado que la hormona tiroidea es necesaria para un
desarrollo adecuado del órgano de Corti del oído interno
queocurre durante los días 0-21 (P0-P21) del desarrollo
postnatal del ratón. El transportador de solutos
orgánicos 1c1 (Solute carrier organic anion transporter 1c1
– Slco1c1) se aisló de cDNA del oído interno y se
caracterizó como una proteína de 12 dominios
transmembranales que se expresa únicamente en cerebro,
testículos y oído interno (Lattig MC et al. 2005, tesis
de doctorado). Esta proteína transporta selectivamente tiroxina
(T4) con una gran afinidad (Pizzagalli F. et al. 2002). El
objetivo de este trabajo es identificar por medio de estudios
immuno-histoquímicos la localización celular del
transportador Slco1c1 en el órgano de Corti durante el
período sensible a la hormona tiroidea P0-P21. Los resultados
confirman la importancia de la hormona tiroidea en el desarrollo del
oído, al demostrar la presencia del transportador de hormona
tiroidea Slco1c1 en las células sensoriales del órgano de
Corti, en un patrón temporal y altamente específico
durante la fase de maduración de estas células
sensoriales. Igualmente se demuestra que las células que
expresan este transportador Slco1c1 también transportan T3, y
así se identifica un nuevo mecanismo comprometido en la
acción de la hormona tiroidea en el oído interno.
Genotipo APO E y asociación con el perfil lipídico en sujetos de 18 a 39 años
Mildrey Mosquera, Cecilia Aguilar, Alberto Pradilla
Departamento de Ciencias Fisiológicas, Sección Bioquímica, Universidad del Valle, Cali, Colombia
La apolipoproteína E
presenta tres alelos comunes del locus de la apo E que se relacionan
con los niveles de lípidos en la sangre y con el riesgo de
desarrollar enfermedades cardiovasculares (ECV). El objetivo de este
estudio fue determinar la asociación entre las variaciones
alélicas del gen de apo E y los niveles plasmáticos de
lípidos en adultos jóvenes de Cali. A 198 sujetos (media:
23±4.2 años) se les determinaron los niveles de
colesterol total, colesterol HDL y LDL y de triglicéridos en
ayunas y se les realizó genotipificación de apoE. Las
frecuencias relativas para el gen apoE fueron: e2 = 0.060, e3 = 0.753 y
e4 = 0.187. Se encontró una correlación negativa
(p<0.05) entre el genotipo apoE y los niveles de
triglicéridos. Se encontraron diferencias(p<0.05) entre los
promedio de colesterol total entre los sujetos 2/3 con respecto a los
sujetos 3/3 y 3/4 y entre los promedios de C-HDL entre los sujetos 2/3
frente a los sujetos 3/3; en ambos casos los sujetos 2/3 presentaron
menores niveles de esas variables, y al calcular el porcentaje de
dislipidemias se encontró que los sujetos con e2 tenían
el por-centaje más alto (25%) de aumento de los
triglicéridos; los sujetos con el alelo e4 mostraron el
porcentaje más alto (10.8% y 49%) de aumento de colesterol total
y la disminución de C-HDL. En contra de lo informado, se
demuestra que el aumento de C-LDL se presenta en un porcentaje mayor
(44%) en los sujetos con el alelo e3.
Identificación de las mutaciones H63D y C282Y del gen Hfe de la hemocromatosis hereditaria en Antioquia
IC Ávila, JC Restrepo, G Correa, G LaTorre-Sierra, M Jiménez, C Vélez-Pardo
Facultad de Medicina, Medicina Interna, Grupo de
Neurociencias de Antioquia, Servicio de Gastroenterología y Hepatología, Servicio de Endocrinología,
Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Objetivo general: Identificar las mutaciones H63D y C282Y en un grupo de 16 individuos
con diagnóstico clínico de hemocromatosis hereditaria
(HH) y sus familiares (28), de los cuales 26 pertenecen a dos familias
procedentes de 4 municipios del oriente antioqueño (La Ceja,
Rionegro, Marinilla, San Rafael) y el municipio de Angelópolis
ubicado al suroeste de Antioquia.
Metodología: Extracción de DNA de 16 pacientes con diagnóstico
clínico de hemocromatosis (evaluados en el Hospital San Vicente
de Paúl (HSVP) y 28 miembros de tres familias (A,B,C) con el kit
comercial promega (Gentra systems, cat N° D-50K). Los PCR-RFLPS se
hicieron de acuerdo con el protocolo de Feder et al. (1996). Las
genealogías se efectuaron con el programa Progeny.
Resultados: De los 16
pacientes con HH, se identificó 1 homocigótico (DD) y 2
heterocigotos (HD) para la mutación H63D. Además, se
identificaron 7 homocigotos (YY) y 1 heterocigoto (CY) para la
mutación C282Y. Los demás pacientes (5) no presentaron
ninguna de las dos mutaciones investigadas. De la
genotipificación que se llevó a cabo en los 28 familiares
provenientes de tres casos índices, se identificó que:
Familia A: caso índice clínico # 6329 (genotipo normal
HH/CC): se identificaron tres individuos (2 mujeres, 1 hombre)
heterocigotos (HD) para la H63D y normales (CC) para la C282Y. Familia
B: caso índice # 6392 (genotipo YY): se identificaron dos
individuos homocigotos (2 mujeres YY), 6 heterocigotos (3 hombres y 3
mujeres CY) y 6 sujetos normales (CC) para la C282Y. No se detecto la
mutación H63D. Familia C: caso índice # 6656 (genotipo
CY): se identificaron tres heterocigotos (dos mujeres, un hombre CY), y
8 individuos normales para la C282Y. Un individuo normal para la C282Y
presento heterocigocidad para la mutación H63D (1 mujer HD).
Conclusión: Se
observó que cerca de 50% (7/16) de los casos índices con
diagnóstico clínico de HH, y 7% de los familiares (2/28)
presentaron la mutación C282Y. Este hallazgo está de
acuerdo con los informes de la literatura donde se identifica 40% a 90%
de mutación C282Y del gen HFE responsable del desarrollo de la
HH en Europa, Australia y Estados Unidos. Las familias de los casos
índices con el genotipo C282Y proceden del oriente
antioqueño. Estos datos sugieren que la mutación C282Y
pudo provenir de un núcleo específico de pobladores
fundadores de Marinilla y su zona de influencia con alto grado de
aislamiento genético en la época colonial. En los tres
individuos con diagnóstico clínico para la hemocromatosis
que presentaron heterocigocidad con el genotipo H63D, o no presentaron
mutación alguna, se sugiere que son portadores de otra
mutación (aún por identificar) comprometida en el
metabolismo del hierro. Esta conclusión confirma las
comunicaciones en la literatura, donde la mutación H63D se
asocia con la mutación C282Y (es decir, heterocigotos
compuestos) o con mutaciones en otros genes. Esta interacción es
responsable de algunos casos de hemocromatosis en Europa. El paciente
heterocigoto para la mutación C282Y podría presentar otra
mutación en otro gen, pues este caso índice fue el
único que desarrolló la enfermedad, aunque su padre y 2
hermanos, heterocigotos, no la presentaron.
Discusión: Los
resultados concuerdan con lo que se sabe en otras poblaciones donde la
mutación C282Y en forma homocigoto es la más común
en la HH. Debido a que los individuos con HH y sus familias con
genotipo C282Y proceden de la misma región antioqueña,
hace suponer que esta región puede ser un sitio con alta
prevalencia en enfermedades metabólicas, en especial, y
hepáticas, en las que puede estar presente la mutación
C282Y. Este trabajo, el primero en Colombia sobre las mutaciones C282Y
y H63D en individuos diagnosticados clínicamente con HH, permite
establecer y confirmar el diagnóstico clínico molecular
de la HH. Como la HH es una enfermedad tratable, el diagnóstico
clínico molecular temprano en individuos con sobrecarga de
hierro, y en sus familiares, permitirá en un futuro inmediato el
descenso significativo de casos con cirrosis, carcinoma
hepático, hipogonadismo, arritmias, cefaleas, fatiga
crónica, impotencia, y esterilidad.
Identificación y seguimiento de casos de hipotiroidismo congénito en la Fundación Gillow
Alejandro Giraldo, Andrés Gutiérrez , Dora Fonseca, Clemencia Sabogal
Fundación
Arthur Stanley Gillow, Bogotá. Universidad Nacional de Colombia,
Bogotá. Universidad del Rosario,
Bogotá, Colombia
El hipotiroidismo
congénito (HC), causado por diferentes defectos de la
glándula tiroides, ocurre en cerca de 1:3,500 infantes, y
constituye la causa más frecuente de retardo mental prevenible.
El diagnóstico temprano, es fundamental para prevenir en estos
casos un retardo mental. En esta institución se desarrolla un
programa de tamización neonatal integral desde el primero de
noviembre de 2000, de acuerdo con las normas establecidas, de medir la
hormona estimulante de la tiroides (TSH) en sangre de cordón
umbilical. Se han evaluado en total 178,114 muestras de sangre de
cordón umbilical de recién nacidos de diferentes ciudades
del país y se han identificado 47 casos de HC (frecuencia de
1:3,790). El programa ofrece el tratamiento y el seguimiento del efecto
por el primer año de vida y el seguimiento indirecto por cinco
años, el primer caso detectado tiene en la actualidad 6
años de edad; hay 21 casos de Bogotá y 26 de otras
ciudades del país. Se diagnosticaron 39 casos durante el primer
mes de vida, los restantes en el segundo mes. Todos tuvieron
seguimiento de TSH y 45 de T4, durante el primer mes después de
iniciado el tratamiento. En 37 hubo un segundo seguimiento, en 26 se ha
realizado un tercer seguimiento y en 21 niños cuatro o
más seguimientos (13 de Bogotá). En 17 de estos pacientes
se logró realizar una gammagrafía antes de comenzar el
tratamiento y se les practicó una consulta con
endocrinólogo pediatra y médico genetista. Se presentan
en detalle los datos epidemiológicos mencionados, así
como los de las gammagrafías.
Proyecto metabograma humano
Juan Sebastián Vasquez, William Villamil
Departamento de Ciencias Fisiológicas, Grupo de Integración Metabólica, Facultad de Medicina,
Universidad Nacional de Colombia, Bogotá, Colombia
La bioquímica, el
metabolismo humano y su perspectiva clínica, constituyen en
muchas instancias académicas y de investigación, un
área de difícil comprensión, que origina altas
tasas de repetición en las Universidades. Los autores del
presente trabajo se propusieron elaborar una base de datos
metabólica integral con las reacciones bioquímicas
conocidas el ser humano, en un panorama global, fácil en su
acceso y comprensión. El «metabograma humano» es la
primera base de datos de la red metabólica de Homo sapiens
creada en América Latina. Es una herramienta de referencia para
la investigación básica y un potente recurso para la
enseñanza y el aprendizaje de la bioquímica. Contiene
aproximadamente 5,000 reacciones descritas en la literatura, cuya
organización es altamente compleja y que de otra manera, seria
difícil de apreciar de forma panorámica e integrada.
Metodología: Consulta
a las bases de datos: brenda.uni-koeln.de;
genome.jp/kegg/pathway.html;biocyc.org/
HUMAN/class-instances?object=Pathways;reactome.org/;expasy.ch/cgi-bin/show_thumbnails.pl;
pathway.yeastgenome.org:8555/YEAST/new-image?type=OVERVIEW;
chem.qmul.ac.uk/iubmb/enzyme/;biochem.ucl.ac.uk/bsm/enzymes/index.html;
dentistry.leeds.ac.uk/biochem/thcme/home.html; gwu.edu/~mpb/;
sites.huji.ac.il/malaria/; home.wxs.nl/~pvsanten/ mmp/mmp.html;
genome.ad.jp/brite/brite.html; tcd.ie/Biochemistry/IUBMB-Nicholson/.
Diseño de la estructura del diagrama de integración
metabólica. Uso de iconos y rastros de color convencionales.
Revisión y corrección. Reproducción y
divulgación en los centros de educación superior en
Colombia. Publicación como herramienta de estudio.
Resultados/impacto: El
metabograma humano integrado a través de las redes digitales de
alta velocidad, será el punto de partida para toda una serie de
opciones desde llamar la atención sobre la bioquímica
celular hasta la explicación profunda del fundamento de las
interacciones tisulares, orgánicas y sistémicas que
constituyen la explicación molecular de los fenómenos
vitales. Es una herramienta para describir los procesos
fisiológicos y fisiopatológicos a nivel celular, y
generar igualmente la posibilidad de reconocer sitios o formas de
intervención y de aproximación farmacológica.
Análisis
de mutaciones del gen del receptor androgénico en pacientes con
posible síndrome de resistencia androgénica
Ricardo Martínez, Andrés Gutiérrez, Liliana Franco, Alejandro Giraldo
Facultad
de Ciencias, Universidad Militar Nueva Granada, Bogotá.
Área de Biomédica, Fundación Arthur Stanley
Gillow, Bogotá. Facultad de Medicina e Instituto de
Genética, Universidad Nacional de Colombia, Bogotá,
Colombia
Introducción: El
síndrome de resistencia androgénica (SIA) es un
pseudohermafroditismo masculino de herencia recesiva ligada al
cromosoma X, causado por mutaciones en el gen del receptor
androgénico (RA). Se han descrito más de 500 mutaciones y
se asocia con una variedad de fenotipos que van desde la forma completa
(SIAC) con genitales externos femeninos normales a diversos grados de
ambigüedad genital en las formas parciales (SIAP). El gen que
codifica para el RA posee ocho exones (A – H), produce una
proteína de ~110 kDA, compuesta por ~919 aminoácidos, y
presenta tres regiones (dominios) modulares, dominio N-terminal (NTD),
de unión al ADN (DBD) y de unión al ligando (LBD).
Objetivo: Analizar 15 pacientes a quienes previamente se les diagnosticó con SIA (12 con SIAC y tres con SIAP).
Métodos: Se
amplificaron cada uno de los exones (B -H) del RA. Luego por
análisis de SSCP se detectaron cambios en el corrido
electroforético, que se secuenciaron para identificar la
presencia de mutaciones.
Resultados: A 12 de los
pacientes se les identificaron 10 mutaciones distintas -una localizada
en el DBD y nueve en el LBD-de ellas, tres no se han informado en la
literatura.
Conclusiones: La
confirmación del diagnóstico de SIA consiste en la
detección e identificación de mutaciones en el gen del RA.
Análisis de los alelos HLA clase I y II en pacientes afectados con vitiligo, Valledupar, Colombia
Anderson Ramírez
Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Objetivo: Establecer
asociación de antígenos del sistema HLA clase I y II con
el vitíligo, mediante tipificación molecular en 42
individuos con vitíligo de la ciudad de Valledupar comparados
con 41 controles de la misma procedencia.
Metodología: El ADN
se extrajo de 400ul de sangre, se amplificaron los genes HLA-A, B,
DRB1, DQB1, DPB1. El producto de la amplificación se
llevó a membranas de nylon para posterior hibridación con
sondas específicas para cada locus. Finalmente la
hibridación se evidenció a través de
autorradiografía en películas de rayos X.
Resultados: El alelo
HLA-B0700 se encontró en 8 pacientes y en ningún control,
originando un valor p de 0.0060. Para el locus DRB1 el aleo 0701
presentó la más alta frecuencia, encontrándose 22
alelos en los pacientes y 11 alelos en los controles, lo que
corresponde a 26.2% y 13.4%, respectivamente. El alelo DPB1 0402
presentó una frecuencia de 25.6 en los controles y 10.7 en el
grupo de pacientes, siendo esta diferencia significativa (p = 0.0154)
comportándose como alelo de protección.
Discusión: Algunos de
los alelos que se encontraron aumentados en este estudio,
también se conoce su asociación con el vitiligo en otras
poblaciones humanas, como se presenta para el alelo DR07.
Conclusión: Existen
algunos alelos del sistema HLA que se encuentran asociados con el
vitiligo en la población analizada. Los alelos que mostraron
diferencias significativas entre pacientes y controles fueron HLA-B
0701 y el alelo DP040.
Análisis indirecto y construcción de haplotipos para determinación de portadoras de distrofia muscular de Duchenne
Dora Fonseca, Claudia Silva, Carlos Restrepo, Heidi Mateus
Unidad de Genética, Instituto de Ciencias Básicas, Universidad del Rosario, Bogotá, Colombia
Objetivo: Mediante
construcción de haplotipos con STR, determinar el estado de
portadora de DMD/DMB, establecer pérdida de heterocigocidad,
sucesos de recombinación y mosaicismos germinales en la
población analizada.
Metodología: Se
realizó extracción de ADN mediante «salting
out» en 174 individuos de 37 familias. Se amplificaron dos STR
extragénicos y ocho intragénicos. Se asignaron alelos
mediante los programas Allelinks y AlfWin. Con los haplotipos, se
establecio el cromosoma X ligado a la enfermedad, y sew
determinó el estado de portadora, sucesos de
recombinación y mosaicismos germinales.
Resultados: Se
determinó el estado de portadora en 89.2% de las mujeres
evaluadas, se evidenciaron cromosomas recombinantes en 12 personas. La
heterocigocidad de los STR estuvo entre 35.1% y 81.1%. Se
determinó hemicigocidad en dos mujeres y se evidenciaron
mosaicismos germinales en 10.8% de las familias analizadas.
Discusión y
conclusiones: La construcción de haplotipos mediante STR pudo
determinar el estado de portadoras de DMD/DMB. Una recombinación
entre el marcador utilizado y el exón de interés puede
causar errores diagnósticos por lo que su detección se
hace indispensable en este tipo de análisis. La pérdida
de heterocigocidad permite determinar directamente el estado de
portadora. La detección de mosaicismos germinales en madres con
hijos afectados cambia el riesgo de recurrencia y permite determinar el
origen de la mutación. El análisis de haplotipos es
útil en el diagnóstico preimplantacion y prenatal en
mujeres portadoras con riesgo de tener hijos afectados de DMD/DMB lo
que constituye, ante la falta de terapéutica eficaz, un
mecanismo de prevención primaria.
Análisis molecular del intrón y el exón 3 del gen HGPRT en una familia colombiana afectada por el
síndrome de Lesch-Nyhan (SLN)
Adriana María Gil
Laboratorio de Genética, Universidad Industrial de Santander, Bucaramanga, Colombia
Objetivo general: Realizar
el estudio molecular del intrón y el exón 3 del gen HGPRT
en una familia con diagnóstico clínico y
bioquímico del SLN.
Metodología: Se
realizó la toma de muestra sanguínea a 15 miembros de la
familia afectada por SLN, a partir de allí se extrajo el ADN por
Salting Out, se amplificaron las muestras para el STR hprtb del
cromosoma X, con primers marcados FAM, luego se realizó la
electroforesis capilar en el ABI PRISM 310. Además los exones 3
y 6 del gen HGPRT se amplificaron y digirieron con las enzimas Pvu II y
BamH I, respectivamente, los fragmentos se visualizaron por
electroforesis de agarosa al 2%7.
Resultados: Se obtuvo la
genotipificación para cada individuo del STR del cromosoma X
hprtb y bandas de ADN de los digeridos con las enzimas PvuII y BamH I
de los exones 3 y 6 del gen HGPRT, respectivamente.
Discusión: Los
genotipos obtenidos de la tipificación del str hprtb,
permitieron establecer el estado de portadora o no de cada una de las
mujeres no afectadas en la familia del estudio. El análisis de
los digeridos de los exonnes 3 y 6 permitió establecer que en
los sitios de restricción de estas enzimas no estaba ubicada la
mutación de los individuos afectados con SLN.
Conclusiones: Al establecer
el estado de portadora o no de las mujeres no afectadas, miembros de la
familia con el SLN se les realizó consejería
genética. La ausencia de la detección de la
mutación en los afectados por el SLN mostró la necesidad
de realizar la secuenciación del gen HGPRT para detectar la
mutación. Proceso que se efectúa actualmente.
Anomalías congénitas en niños indígenas colombianos evaluados por la expedición humana
Jaime Bernal, Francisco Nuñez, Ignacio Zarante
Instituto de Genética Humana, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá.
Asociación Médica de Los Andes, Bogotá, Colombia
Introducción: Las
anomalías congénitas se han estudiado en múltiples
poblaciones con el fin de describir su prevalencia. Las poblaciones
indígenas de Sur América y especialmente las de Colombia
se consideran como aislados geográficos y culturales que tienen
dinámicas de poblamiento diferente a los nativos del
país. Presentan alta endogamia, características
culturales diversas y aislamiento geográfico. Por lo general
están expuestos a factores socioeconómicos como pobreza,
ausencia de atención en salud y desplazamiento forzado.
Metodología: Se
realizó un estudio en 4,498 niños entre 0 y 18
años que pertenecían a 29 comunidades indígenas
colombianos con un formato de historia clínica estandarizado.
Los diagnósticos se clasificaron mediante el CIE-9. Se evaluaron
variables como sexo, raza, edad, mortalidad, antecedentes
ginecobstétricos y consumo de sustancias adictivas.
Resultados: Los niños
con anomalías congénitas equivalen a 3.2% de la muestra.
La malformación más frecuente fue la cardiopatía
congénita (34 casos, 75.6 x 10,000) seguida de criptorquidia (24
casos, 53.4 x 10,000). Otras entiades encontradas en su orden fueron:
displasia de caderas, labio fisurado con o sin paladar hendido,
craniosinostosis, malformaciones de la mano y síndrome de Down
(2 casos, 4.4 x 10,000).
Discusión: La
malformación congénita no es un hallazgo raro en
poblaciones indígenas a pesar de la percepción y actitud
variable que tienen las comunidades hacia esta. Sin embargo, llama la
atención en este estudio que en más de 3% de los
niños se presente malformación congénita lo que
indica que la frecuencia al nacimiento debe ser mayor. Esto se puede
explicar porque estas comunidades están sometidas a factores de
riesgo como consanguinidad, desnutrición materna, controles
prenatales deficientes, infecciones no controladas y mal manejo de
desechos. En visitas previas realizadas a estas comunidades se ha
observado en niños y adultos albinismo oculocutáneo,
displasia metatrópica, síndrome de Morquio,
neurofibromatosis, enanismo, higroma quístico, sordera, bandas
amnióticas y labio fisurado con paladar hendido.
Caracterización
inmunológica, citogenética y molecular de cinco pacientes
con síndrome de Digeorge (SDG)
GA Gallego, C Garcés , CM Muñeton , PJ Patiño, JC Orrego, CM Trujillo, JL Franco
Grupo de
Inmunodeficiencias Primarias. Grupo de Genética Médica,
Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín;
Clínica Cardiovascular Santa María, Medellín.
Hospital San Vicente de Paúl, Medellín, Colombia
Objetivo: Caracterización clínica, inmunológica,
citogenética y molecular de 5 pacientes con diagnóstico
de síndrome de DiGeorge.
Metodología: Se
evaluaron características clínicas y de laboratorio
disponibles y microdeleciones en el cromosoma 22q11.2 mediante FISH.
Adicionalmente se realizó PCR-STR en ADN genómico en
pacientes y progenitores para los marcadores D22S944, D22S941 y D22S264
con PAGE y tinción con plata. Se investigaron subpoblaciones
linfocitarias en sangre periférica mediante citometría de
flujo.
Resultados: Como
anomalías congénitas se identificaron hipertelorismo,
telecanto, micrognatia, paladar ojival y paladar duro hendido y
úvula bifida, hipoparatiroidismo, cardiopatías
troncoconales y agenesia renal izquierda y tímica. Con FISH se
identificaron microdelecciones en 2/4 pacientes, de los cuales uno
presentó hemicigocidad para los 3 marcadores. En cuanto a
anormalidades inmunes, en 4 se detectaron infecciones recurrentes
anormales y un paciente tenía inmunoglobulina A baja en suero y
otro tuvo respuesta linfoproliferativa baja. De los 5 pacientes, dos
presentaron linfocitos T (LT) CD3+ bajos (CD4+ y CD8+), y uno persiste
con LT CD4+CD45RA+ vírgenes bajos. Los tres restantes
presentaron linfocitos totales normales aunque con anormalidades en las
subpoblaciones.
Conclusiones: El espectro de
características fenotípicas en los cinco pacientes con
SDG fue amplio, como se ha descrito antes. Sin embargo, sólo en
dos fue posible confirmar el diagnóstico mediante FISH. En todos
los pacientes se identificó algún tipo de anormalidad
inmune. Actualmente sólo dos pacientes presentan infecciones
respiratorias con respuesta adecuada a los medicamentos. Estos sugieren
que es necesario profundizar en la relación entre el defecto
inmunológico y la presencia o ausencia de infecciones.
Evaluación de la capacidad de reparación del ADN mediante la prueba de challenge en mujeres obesas post-menopáusicas
Leidy Didiana Jaramillo, Yaliana Tafurt, Carlos Hernán Sierra
Grupo de Investigación en Genética Humana Aplicada
(GIGHA), Laboratorio de Genética Humana, Departamento de
Ciencias Fisiológicas, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad del Cauca, Popayán, Colombia
Resumen: Según la Organización Mundial de Salud, 300 millones de
personas sufren de obesidad en el mundo. Los estudios
epidemiológicos indican que la obesidad se asocia en 25% a 30%
con varios tipos de cáncer, entre ellos cáncer de colon,
seno, endometrio, riñón y esófago.
Objetivo: Evaluar la
capacidad de reparación de ADN (prueba de challenge) entre
mujeres obesas post-menopáusicas y mujeres
post-menopáusicas de peso normal, mediante la comparación
de la frecuencia de alteraciones cromosómicas como biomarcador
de efecto.
Metodología: Se
reclutaron 20 mujeres obesas y 20 de peso normal, como casos y
controles, respectivamente. Todas las mujeres del estudio eran
post-menopáusicas. Los casos y controles se aparearon
según edad (±5 años) y procedencia. Los
procedimientos por seguir fueron: 1. Consentimiento voluntario y
encuesta estructurada; 2. Obtención de muestra de sangre
periférica para la prueba de challenge; 3. Análisis
citogenético de alteraciones cromosómicas; y 4.
Análisis estadístico con el software SPSS para Windows.
Resultados: En general, las
mujeres obesas presentaron una mayor frecuencia de alteraciones
cromosómicas en comparación a las mujeres de peso normal
(12.28±0.79 vs. 10.28±0.68, p = 0.058). Después de
someter los cultivos celulares a la prueba de challenge, las mujeres
obsesas presentaron un incremento en el número de alteraciones
cromosómicas en comparación con las mujeres de peso
normal (14.45±1.07 vs. 12.70±0.90, p = 0.216).
Conclusiones: La capacidad
de reparación de ADN en mujeres obesas post-menopáusicas
es menor que en mujeres de peso normal, lo que podría contribuir
a la alta incidencia de cáncer en este grupo de
población. Al finalizar el estudio, se espera brindar evidencia
que permita generar nuevas estrategias de promoción y
prevención para reducir el riesgo de cáncer asociado con
la obesidad.
Evaluación
de las pautas en el cuidado de la salud de niños con
síndrome de Down en cuatro hospitales de Bogotá,
Colombia. Desde julio, 2002 hasta julio 2005
G Contreras, F Suárez
Residente de II año de Genética Médica, y Médico Genetista, Instituto de Genética Humana,
Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia
Introducción: El
síndrome de Down es la alteración cromosómica
numérica más común, la incidencia es 1/700 nacidos
vivos. Sin embargo, existen pocos datos sobre la evaluación y
manejo integral preventivo en el país.
Objetivo: Evaluar el
seguimiento, manejo preventivo, complicaciones y factores de riesgo de
los individuos con síndrome de Down en cuatro hospitales de
Bogotá, Colombia.
Metodología: Se
realizó un estudio descriptivo, retrospectivo y longitudinal,
donde la población estudiada fueron los pacientes diagnosticados
en los hospitales San Ignacio, La Victoria, Kennedy y Simón
Bolívar desde julio de 2002 hasta julio de 2005. El criterio de
inclusión: niños menores o iguales a 3 años con
diagnóstico clínico y/o citogenético. Se
aplicó la guía de manejo preventivo.
Resultados: Se evaluaron 52
pacientes, el mayor grupo etario fue el de 13 a 24 meses (46.2%), con
predominio del sexo masculino (55.8%). Las complicaciones fueron:
gastrointestinales (71.1%), cardiovasculares (69.2%), oculares (65.4%),
hiperbilirrubinemia neonatal (38.5%), respiratorias (28.8%),
hipotiroidismo (26.9%), otitis (135%) y otras (17.3%). La
mayoría que presentaron problemas de hipotiroidismo y
gastrointestinales no los evaluó el especialista (50% y 75.7%
respectivamente). No se evaluaron en el área auditiva 38.5%,
área cardiovascular 13.5% y examen tiroideo 13.5%. La
evaluación genética y el cariotipo no se hicieron en 5
pacientes (9.6%). Casi todas las evaluaciones no se realizaron a la
edad requerida (>50%), excepto tiroides (88.5%).
Conclusión: Un alto
grupo de pacientes no tuvieron evaluaciones ni seguimientos preventivos
adecuados. Se debe mejorar el manejo interdisciplinario para disminuir
las complicaciones y mejorar la calidad de vida.
Hereditas, diversitas et variatio: Aproximación a la historia de la genética humana en Colombia
Alberto Gómez, Ignacio Briceño, Jaime E. Bernal
Instituto de Genética Humana, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia
El libro «Hereditas, diversitas et variatio: aproximación a la historia de la genética humana en Colombia», de los doctores Alberto
Gómez, Ignacio Briceño y Jaime Eduardo Bernal, publicado
por el Instituto de Genética Humana de la Facultad de Medicina
de la Pontificia Universidad Javeriana con el respaldo de la Academia
Nacional de Medicina de Colombia, primero prepara para comprender y
valorar un selecto material sobre los antecedentes y desarrollo de la
genética humana en el país, y a continuación
presenta y comenta material, que por su especialización, en casi
todos los casos, no es un material al que la mayoría pudiera
tener fácil acceso. Después de una estimulante
introducción viene un capítulo sobre Gregor Mendel donde
se muestra cómo la combinación del conocimiento de las
matemáticas con un espíritu observador de las
manifestaciones de la herencia en sus cultivos de alverjas, al medir la
relación de los rasgos dominante y recesivo de las sucesivas
generaciones, convirtieron a este singular personaje en el padre de la
genética. Termina el capítulo con un resumen de
cómo nacieron y se desarrollaron los estudios de la
genética y dentro de ellos la importancia cada vez mayor de la
genética humana. Se transcribe, en seguida, un capítulo
del antropólogo Ronald Duncan sobre la cerámica retrato
de la cultura Tumaco – La Tolita, donde se representaron muchas
deformaciones congénitas de origen genético que se dieron
entre la población amerindia en el período
prehispánico. Como ejemplo de la información sobre
enfermedades genéticas que pueden traer los cronistas de Indias,
se citan tres casos que comentaron Fray Pedro Simón,
Nicolás de Federmann y el padre Juan Rivero SJ. A
continuación viene la memoria titulada «Del influjo del
clima sobre los seres organizados» publicada por el sabio
Francisco José de Caldas en 1808 en el Semanario de la Nueva Granada, donde estudia las causas ambientales de la diversidad humana.
Una excelente ayuda para comprender la influencia en los organismos de
lo que precisamente no es genético. Los autores comentan el
trabajo de Caldas y lo relacionan con la polémica y los estudios
que se efectuaban en Europa sobre ese tema. Se hace luego
alusión a Manuel Ancízar, quien en su libro
Peregrinación de Alpha recoge las observaciones de sus viajes
como miembro de la Comisión Corográfica (1851), entre las
que se destacan la presencia de individuos enfermos que presentaron lo
que ahora se puede identificar como malformaciones de origen
genético.
En seguida se alude
a la revista de la Sociedad de Medicina y Ciencias Naturales de
Bogotá, fundada en 1873, estudia los índices y enfatiza
los pocos temas tratados que se pueden relacionar con la
genética médica. Se destaca la controversia que
surgió en el seno de la Sociedad por la ponencia del doctor Juan
de Dios Carrasquilla, publicada en el volumen 13 de la revista, en
1889, titulada «Disertación sobre el contagio de la
lepra» a la que respondió el doctor Juan David Herrera con
su artículo «Discusión sobre la herencia» que
se transcribe en su totalidad en el libro, pues como dicen sus autores
«…presenta con lujo de detalles la percepción del concepto de la herencia de buena parte de los profesionales de la salud en el siglo XIX.» Se transcriben también algunos apartes
del trabajo: «Las enfermedades microbianas no pueden ser
hereditarias» con que el doctor Gabriel J. Castañeda, en
ese momento presidente de la Sociedad, trató de mediar en la
polémica. Se discutía sobre la posibilidad de la herencia
patológica que el doctor Herrera explicaba por el influjo de
«…unidades fisiológicas atómicas»
veinte años antes que se empezara a hablar de los genes. Por
último, intervino en la polémica el doctor Manuel Plata
Azuero, en su Tratado de terapéutica aplicada general y especial (1888), que se inclina por las posiciones de Carrasquilla y
Castañeda.
Del tratado del
doctor Plata Azuero se transcriben en la presente obra, además
de la «Dedicatoria», apartes de los capítulos:
«¿La elefantiasis de los griegos es enfermedad
hereditaria?» y «Enfermedades hereditarias o, más
bien, predisposiciones heredadas». En el siguiente
capítulo «Nacimiento de la genética humana en la
medicina europea» aparece el tema en una forma muy clara y
sintética, pues conecta a los precursores con los
contemporáneos en Colombia. Luego viene el capítulo
titulado «La genética humana en la medicina colombiana del
siglo XX», al comienzo del cual se presenta un informe publicado
por el doctor Guillermo Gómez en 1916 sobre un paciente adulto
joven con columna bífida. Se habla también del
«Álbum de patología exótica» del
Hospital San Juan de Dios en los comienzos del siglo XX, donde se
recogieron cerca de dos mil fotografías que recopilaron los
profesores Carlos Sanmartín Barberi y Egon Lichtenberger del
padre del primero, el doctor Roberto Sanmartín Latorre y de sus
colegas en dicho hospital.
A
continuación se habla de los trabajos pioneros del Instituto de
Genética de la Universidad Nacional de Colombia fundado por el
doctor Emilio Yunis Turbay y del Instituto de Genética Humana de
la Pontificia Universidad Javeriana fundado por el doctor Jaime Eduardo
Bernal Villegas, y se recuerda lo que fueron la Expedición y la
Gran Expedición Humana como ejemplo del trabajo
interdisciplinario en el área de la genética en Colombia.
Terminan los autores de este libro con una selección de escuelas
y estudios genéticos colombianos de finales de siglo XX -la
totalidad de ellos, precisamente se presentaron en el IV Congreso
Nacional y II Congreso Internacional de Genética Humana- y al
soñar con el futuro de su Instituto que en unos años
sería de «Humanética» para servir de punto de
contacto a pensadores científicos y humanistas para buscar, en
sus propias palabras, «…cómo comprender al hombre como ser biológico en medio de su entorno particular y cómo comprenderlo en su entorno universal». Y
añaden: «La humanética será entonces, si queremos acuñarle una definición operativa: una dimensión específica de la cibernética, identificando componentes y relaciones en el sistema complejo que es la humanidad». Este libro se convierte así en una nueva
síntesis en la tradición humanista de este instituto
médico-científico que ha accedido ya a una
posición de referencia en la historia de la genética
humana en Colombia.
Identificación de mutaciones en el gen de la 21-hidroxilasa (CYP21A2) en pacientes afectados con
hiperplasia suprarrenal congénita
Laura Rodríguez, Matilde de Bernal, Rubén Bonilla, Guillermo Barreto
Laboratorio de Genética Molecular Humana, Sección
de Genética, Departamento de Biología. Laboratorio de
Endocrinología, Departamento de Medicina Interna, Facultad de Salud, Universidad del Valle, Cali, Colombia
La hiperplasia suprarrenal
congénita (HSC) es un desorden autosómico recesivo
ocasionado en 90% a 95% de los casos por deficiencia de la enzima
21-hidroxilasa. Cuando se evalúan los niveles hormonales de
17-hidroxiprogesterona se tiene la posibilidad de la presencia de
falsos negativos y falsos positivos en pacientes con esta entidad. En
consecuencia, el objetivo principal de este trabajo ha sido
estandarizar una metodología molecular que permita la
caracterización de las mutaciones en el gen CYP21A2 que codifica
para la enzima 21 hidroxilasa. Con este fin se extrajo el ADN de 21
pacientes diagnosticados con HSC y mediante las metodologías de
ACRS-PCR y RFLP-PCR se procedió a identificar las cuatro
mutaciones más frecuentes en informes de la literatura para esta
enfermedad. La mutación V281L se observó en 38% del total
de alelos, seguida por la mutación IVS2-12A/C-G (que compromete
el sitio de empalme en el intrón 2) con 16%, la mutación
G318X con 9.5%, y la mutación I172N con 4.7%. Al relacionar los
resultados moleculares con los niveles hormonales de
17-hidroxiprogesterona, determinados mediante quemiluminicencia
intensificada, se encuentra que en 40% de los casos existe una buena
correlación entre estas dos modalidades de diagnóstico, y
se refrenda el defecto enzimático. En conclusión, se
ejecutó una metodología diagnóstica cuya
importancia radica en que es rápida, simple, reproducible,
extremadamente sensible y específica para la detección de
mutaciones en pacientes con HSC. También, además, abre el
camino para una detección precoz y un tratamiento más
específico para este tipo de pacientes.
Ejecución de miRNAs para el silenciamiento in vitro de la b-secretasa1 (BACE1), comprometida en la enfermedad de Alzheimer
David Aristizábal, Israel Hernández, Patricia Cardona, Juan Carlos Gallego
Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Se ha postulado que la falla
en el metabolismo del péptido b-amiloide y su posterior
agregación y deposición en placas, es la principal causa
de la disfunción y muerte neuronal que conduce a la demencia que
se presenta en la enfermedad de Alzheimer. El péptido b-A se
sintetiza a partir de la proteína precursora amiloide (APP), a
través de la vía amiloidogénica, donde intervienen
sucesivamente: b-secretrasa 1 y b-secretasa. Por tanto, tales
proteínas son el blanco para la terapia de esta enfermedad. El
mecanismo de ARN de interferencia, por el cual se obtiene
silenciamiento génico específico post-traduccional, se
utiliza ampliamente para la terapia génica. De acuerdo con lo
anterior, el objeto de esta investigación fue ejecutar la
utilización de miARNs (microARNs de interferencia
endógenos), dirigidos contra el mARN de BACE1, para inducir el
silenciamiento de dicha proteína en un modelo celular neuronal.
Para ello, se diseñaron miARNs dirigidos contra BACE1 y como
modelo la estructura del miARN endógeno miR30, y se clonaron en
un plásmido lanzadera adenoviral. En seguida sé
transfectaron células SHSY-5Y con los plásmidos que
codifican los miARNs y se evaluó la expresión de BACE1 a
través de western blot e inmunofluorescencia. En los ensayos
realizados no se logró detectar el silenciamiento de la
proteína BACE1 en este modelo celular. En la actualidad se
clonan los miARNs en otro vector, para realizar ensayos en otra
línea celular, que permitan obtener el silenciamiento de BACE1
como base para la terapia génica contra la enfermedad de
Alzheimer.
Perfil
epidemiológico de la consulta externa en el Instituto de
Genética Humana, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad
Javeriana, en Bogota, Colombia
Paula Margarita Hurtado, Ignacio Zarante
Instituto de Genética Humana, Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia
Los informes del perfil
epidemiológico de servicios de genética médica en
Colombia y el mundo son escasos. Cada año aproximadamente 7.9
millones de niños (6% del total de nacimientos a nivel mundial)
nacen con un defecto serio de origen parcial o totalmente
genético. Recientemente, se hizo un estudio en el Servicio de
Consulta Externa de Genética, en el Instituto de Genética
Humana, de la Pontificia Universidad Javeriana, en Bogota, Colombia,
para caracterizar los pacientes que asisten al servicio. Se encontraron
1,706 pacientes incluidos en la base de datos, entre enero 1/1999 y
septiembre 30/2005, con 629 diferentes diagnósticos presuntivos.
La clasificación por géneros mostró 55% de
mujeres, 44.2% hombres y 0.7% indeterminados. Hubo 66.1% menores de 18
años. Los pacientes se clasificaron por su etiología
según la clasificación de Shawn et al. en 2004 en causas
genéticas (cromosómicas, multifactoriales o
heterogéneas), defectos al nacimiento, desórdenes
adquiridos o condiciones médicas no preexistentes. Los
diagnósticos más frecuentes fueron baja estatura (8.6%),
asesoría genética (6.2%) y síndrome de Down
(6.2%). Este informe facilita la toma de decisiones en el Servicio de
Genética Médica y provee información sobre las
enfermedades más frecuentes en la ciudad de Bogotá,
Colombia. Las diversas afecciones encontradas demuestran una amplia
gama de requerimientos médicos de estos pacientes para con sus
familias y sus servicios de salud. Se sugiere realizar un
análisis similar en otros servicios del país para
comparar los perfiles epidemiológicos y encontrar semejanzas y
diferencias.
Polimorfismos de citoquinas en pacientes trasplantados renales con sobrevida del injerto a corto y largo plazo
Mabel C. Giraldo, Libia M. Rodríguez, Natalia García, Laura Velásquez, Mónica Vásquez, Sara C. París,
Cristian M. Alvarez, Luis F. García
Grupo de
Inmunología Celular e Inmunogenética, Facultad de
Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Introducción: Las
citoquinas cumplen un papel importante para regular la respuesta inmune
y en los trasplantes en el rechazo y la tolerancia del aloinjerto. Los
polimorfismos de genes de citoquinas se han asociado con su
producción. Sin embargo, aún es materia de controversia
la correlación entre los polimorfismos y la evolución
postrasplante.
Objetivo: Comparar los
polimorfismos de genes de citoquinas en pacientes de transplantes
renales con rechazo en el primer año, pacientes con
supervivencia a largo plazo (>10 años postrasplante sin
rechazo) y un grupo control (donantes fallecidos).
Materiales y métodos: Se incluyeron 92 pacientes con rechazo del injerto, 97 sobrevivientes a
largo plazo y 102 controles. Por PCR-SSP se determinaron los
polimorfismos de nucleótido único (SNP) de los genes de
IL-1a, IL-1b, IL-1R, IL-1RA, IL-2, IL-4, IL-4R?? IL-6, IL-10, IL-12,
TNFa, IFN-g y TGF-b.
Resultados: Se
observó una mayor frecuencia del genotipo CC IL-1b (-511),
asociado con baja producción de IL-1b, en sobrevivientes a largo
plazo comparado con quienes rechazaron (p = 0.0061) y los controles (p
= 0.0040). Estas diferencias permanecieron en los trasplantados con
donantes fallecidos (p = 0.0191). En IL-1b (+3962) se observó
una menor frecuencia de individuos CC y un aumento de individuos CT
comparado con el control (p = 0.0001); pero esta diferencia es menos
significativa, en el subgrupo de trasplantados con donantes fallecidos
(p = 0.0329). Las frecuencias haplotípicas de IL1b
también presentaron diferencias significativas (p<0.000001).
No se encontraron diferencias en los SNP de las otras citoquinas
estudiadas.
Conclusiones: Los SNPs en la región promotora del gen IL-1b influyen la sobrevida del injerto renal.
Análisis
de asociación de genes implicados en la activación
plaquetaria con la resistencia a la aspirina (RA) en pacientes con enfermedad cerebro vascular isquémica
Carlos Andrés Naranjo, Francisco García, Dionis Vallejo, Leonor
Álvarez, José Domingo Torres, Luis Ignacio Tobón,
Alejandro Román, María Victoria Parra, Caroline Puente, Walter Cardona, Ángela Cadavid, Gabriel Bedoya
Hospital
Universitario San Vicente de Paúl, Medellín. Grupo de
Genética Molecular, Grupo de Trombosis, Grupo de
Reproducción, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Objetivo: Evaluar la
asociación de polimorfismos en genes implicados en la
activación plaquetaria con RA en pacientes con enfermedad
cerebrovascular isquémica que consultan al Hospital
Universitario San Vicente de Paúl.
Metodología: Es un
estudio descriptivo prospectivo en 350 pacientes con diagnóstico
de ECV isquémica que consumían aspirina. A estos
pacientes se les evaluará la resistencia a la aspirina por una
prueba de tiempo de sangría y de agregación plaquetaria;
además se determinarán los polimorfismos en los genes
P2Y12, GPIb, GPIa, GPIIIa, COX1 y COX2. Al mismo tiempo, para
determinar la fre-cuencia en la población general de los
polimorfismos genéticos mencionados, se tipificará una
muestra de 100 individuos de la población general que asiste al
Hospital Universitario San Vicente de Paúl, a los cuales
también se les hará tiempo de sangría y
agregación plaquetaria.
Resultados y
discusión: Hasta el momento, se han tipificado 102 individuos
entre casos y controles (76 y 26, respectivamente), y se
encontró que los marcadores para GPIa, GPIIIa y COX1 son
monomórficos, mientras que GPIb, COX2 y P2Y12 presentan tanto el
alelo normal como su variante (frecuencias del alelo normal: 0.69-0.71
y 0.61, respectivamente).
Conclusiones: Los resultados
parciales indican que las variantes analizadas en GPIa, GPIIIa y COX1
en esta población de estudio no influyen en el fenotipo RA, por
lo cual hay que analizar otros polimorfismos en estos genes o en otros
que permitan dilucidar el aporte de uno o más genes en este
fenotipo.
Análisis
de la dinámica espacial de las frecuencias alélicas en
caracteres de herencia monosómica en humanos del departamento
del Quindío, Colombia
Diana María Méndez, Margarita María López, Víctor Hugo García
Programa de Biología, Universidad del Quindío, Armenia, Colombia
Se realizó un estudio
en 360 personas en seis municipios del departamento del Quindío,
para analizar el comportamiento espacial (estructura genética)
de las frecuencias alélicas de 10 marcadores fenotípicos
con herencia monosómica. Los caracteres considerados fueron:
tipo de lóbulo de la oreja, pico de viudo, capacidad de enrollar
la lengua, campodactilia, pulgar extensible, pelo en la
articulación media de los dedos, tipo de cerumen, hoyuelo en el
mentón, hoyuelo en la mejilla y enrollamiento del pelo en la
coronilla. Los datos se tomaron mediante observación directa y
se consignaron en cuadros. Los resultados se analizaron a la luz de
análisis de componentes principales, autocorrelación
espacial y cálculos de heterocigosidad por locus (hj) y
heterocigosidad promedio esperada (He) en cada municipio del estudio.
Los resultados mostraron un comportamiento homogéneo de las
frecuencias alélicas de la mayoría de los loci y los
valores de heterocigosidades fueron relativamente altos, e indican que
los individuos pertenecientes a los seis municipios conforman la misma
población (panmixia) a escala genética.
Análisis de la evolución del cultivo celular trofoblástico mediante tipificación con STRs
Clara Arteaga, Cristina Álava, Miguel Aragón
Universidad Nacional, Bogotá, Colombia
Objetivo: Establecer la
evolución celular en cultivo de muestras de legrado, y comparar
los perfiles STRs en cultivo celular con los obtenidos directamente del
tejido.
Metodología: Se
extrajo ADN para tipificar 9 polimorfismos STRs; inicialmente del
espécimen obtenido de modo directo de legrado en mujeres con
diagnóstico de mola hidatidiforme y luego de las células
en cultivo, obtenidas entre 5 y 150 días post-siembra.
Resultados y
discusión: Se obtuvieron perfiles genéticos para 25 de 27
muestras de cultivo. En 23, se detectó en cultivo celular,
únicamente el perfil genético de la madre. En un caso,
los resultados del cultivo a los 15 días, coincidieron con la
tipificación hecha en forma directa (mola completa
dispérmica) y en un caso, el cultivo a los 13 días
mostró un perfil que permitió clasificarla como mola
completa dispérmica, aunque en análisis directo
sólo se evidenció el perfil de la madre.
Conlusiones: Los STRs son
útiles para establecer la evolución celular de los
cultivos trofobásticos. El tejido trofoblástico
proveniente de legrado está usualmente contaminado con tejido
materno por su condición de contacto con la decidua materna.El
tiempo entre la siembra del cultivo y la obtención de las
células, permite sugerir que después un determinado
tiempo (15 días), el tejido trofoblástico tiende a
agotarse, como ocurre in vivo con la placenta y predomina el tejido
materno.
Análisis de portadores de la mutación f508 del en la población colombiana
Heidi Mateus, Dora Fonseca, Genoveva Keyeux, Carlos Restrepo, Miriam Silva
Unidad de
Genética, Instituto de Ciencias Básicas, Facultad de
Medicina, Universidad del Rosario, Bogotá. Instituto de
Genética, Universidad Nacional de Colombia, Bogotá.
Unidad de Bioquímica, Instituto de Ciencias Básicas,
Facultad de Medicina, Universidad del Rosario, Bogotá, Colombia
Objetivos: Determinar la
frecuencia de portadores de la mutación F508del delgen de la
conductancia transmembranal de la fibrosis quística en la
población colombiana.
Metodología: Se
analizaron 2608 colombianos normales de las regiones centro occidente,
centro oriente, costa norte, sur occidente y sur oriente. La
reacción en cadena de la polimerasa se efectuó con
primers específicos para la identificar la mutación
F508del. La deleción de los 3 pares de bases se evidenció
en geles de poliacrilamida al 12% y a las personas portadores de la
mutación, se les efectuó heteroduplex, con el fin de
descartar la presencia de la mutación I507del.
Resultados: Para la
población colombiana se encontró una frecuencia de
portadores de F508del de 1/84. En la región centro oriente fue
1/58; costa norte, 1/72; sur occidente, 1/104; y sur oriente, 0. Por
regiones, se encontró diferencia significativa únicamente
con la región sur oriente.
Discusión y
conclusiones: La tasa de portadores de mutaciones causantes de FQ
permite reconocer personas y parejas en riesgo de tener hijos
afectados, se encontró para la población colombiana una
tasa de 1/84, por lo que 1 de cada 7056 parejas tendrá un riesgo
de 25% de tener hijos con fibrosis quística. Con los datos
obtenidos y teniendo en cuenta la frecuencia de F508del en el
país (43%), se puede calcular que la frecuencia esperada de
fibrosis quística para la población es 2.7%, y se infiere
que en Colombia la enfermedad es subdiagnosticada, y que se
justificaría que se la incluyera en programas de
tamización genética neonatal.
Análisis de una población bumanguesa mediante el estudio de STR’s del cromosoma Y
Kareng Andrea Rueda, Adriana Castillo, Adriana Pico, Adriana Gil, Clara Inés Vargas
Laboratorio de Genética Humana, Facultad de Salud, Universidad Industrial de Santander, Bucaramanga, Colombia
Los STRs del cromosoma Y son
una herramienta muy útil en la genética forense, debido a
que sus regiones no recombinantes representan una línea directa
de herencia paterna (Jobling, 1997). Cómo sólo amplifican
en varones, se usan en casos de violaciones donde hay mezclas y no se
puede distinguir entre el perfil del perpetrador y el de la
víctima (Henke, 2001). En estos últimos años los
Y-STR’s se han utilizado en múltiples laboratorios
alrededor del mundo, para tipificar así numerosas poblaciones, y
crear una base mundial de datos del cromosoma Y. Esto ha conducido a
que otros países y sus ciudades deseen conocer el perfil
genético de sus poblaciones, con tal fin, se analizó la
población de Bucaramanga. Se tomaron muestras a 150 varones
nacidos en Bucaramanga, de ellos, 100 se obtuvieron al tomar muestras
por toda la ciudad de Bucaramanga, las 50 muestras restantes se
obtuvieron en el laboratorio de genética de la Universidad
Industrial de Santander. En estas muestras se amplificaron los sistemas
STR´s: DYS19, DYS385,DYS389I/II, DYS390, DYS391, DYS392 y DYS393
que según la ISFG (sociedad internacional de genética
forense) se les considera como el haplotipo mínimo de los
Y-STR’s. Para cada uno de los individuos tipificados se obtuvo un
haplotipo, y por ende los diversos haplotipos de la población.
Para el análisis poblacional se comparó la
población bumanguesa con poblaciones colombianas de Antioquia,
Chocó, Córdoba, Cartagena; con poblaciones americanas de
Venezuela, Perú, Argentina, Ecuador, Brasil, El Salvador; USA y
Canadá; poblaciones europeas como España, Portugal,
Alemania, Italia y algunas poblaciones africanas. Luego se
efectuó un análisis poblacional en el software
Arlequín donde obtuvimos las frecuencias genéticas de las
poblaciones, el calculo de diferenciación genética Rst,
un análisis de agrupamiento en UPGMA; y se hicieron los
cálculos de interés forense como el PD(poder de
discriminación) y PE(poder de exclusión).
Análisis poblacional del cromosoma X con marcadores STRS en una muestra de individuos del departamento de Santander
Adriana Lucía Pico
Universidad Industrial de Santander, Bucaramanga, Colombia
Objetivo: Realizar la
caracterización genética de una población
santandereana, mediante el análisis de 10 marcadores STR’s
del cromosoma X.
Metodología: Se
estudió una población de 218 individuos no relacionados,
nacidos en Santander y 94 tríos (padre-madre-hijo-a) con
filiación establecida por una probabilidad acumulada de
paternidad mayor de 99.9%. El ADN se extrajo por el método de
salting out y se hizo la amplificación de 10 marcadores STRs del
X: DXS8378, DXS9898, DXS8377, HPRTB, GATA172D05, DXS7423, DXS6809,
DXS7132, DXS101 y DXS6789 en una PCR multiplex; los productos se
separaron mediante electroforesis capilar en un ABI PRISM 310 y la
asignación alélica se realizó por
comparación con el ADN de referencia. Con los datos obtenidos de
los individuos no relacionados se calcularon las frecuencias
alélicas, genotípicas, distancia poblacional y los
parámetros estadísticos de importancia forense. Con el
análisis de los tríos se calculó la tasa de
mutación para cada sistema.
Resultados y
discusión: Se hallaron las frecuencias alélicas y
genotípicas de todos los marcadores, se encontraron alelos
nuevos en GATA172DO5, se establecieron distancias genéticas con
poblaciones de nuestro continente y de Europa y se pudieron establecer
los mejores marcadores, de acuerdo con su poder de
discriminación, para utilizar en la población de
Santander. En el análisis de segregación se encontraron 4
mutaciones, 3 de un paso en los sistemas DXS7132, DXS6809 y DXS8377 y
una de dos pasos en el DXS8377.
Conclusiones: Este trabajo
permitió crear bases de datos propias, establecer el componente
ancestral y la estructura poblacional para el cromosoma X en Santander,
y permitir así ejecutar las técnicas para el estudio de
STRs del cromosoma X como una herramienta para solucionar casos
complejos de filiación en el laboratorio de genética UIS.
Caracterización
de la estructura y diversidad genética de tres muestras
poblacionales del suroccidente colombiano con microsatélites
Ángela V. Peña-González, Fernando Rondón, Guillermo Barreto
Laboratorio
de Genética Molecular Humana, Sección Genética,
Departamento de Biología, Universidad del Valle, Cali, Colombia
Las poblaciones
latinoamericanas se han caracterizado por ser híbridas con
aportes genéticos de indígenas, europeos y africanos.
Debido al hecho que pocas poblaciones colombianas se han caracterizado
genéticamente, el presente estudio tuvo como objetivo
identificar la estructura y diversidad genética presente en tres
muestras poblacionales del suroccidente colombiano: dos mestizas
(Versalles, Valle del Cauca y Pasto, Nariño) y una
afrodescendiente (región Pacífico colombiano). Los
sistemas STR’s, (TH01, vWA, D21S11 y D13S317), se amplificaron
mediante la PCR y los productos se separaron en geles de
poliacrilamida. Los alelos se tipificaron mediante el sistema de
análisis y documentación UVISAVE y el análisis
estadístico se efectuó con el software Arlequín
3.11. El análisis molecular de varianza mostró una
variación entre grupos de 0.5% y de 1.4% entre poblaciones
dentro de grupos, e indicó la no existencia de un grado de
estructuración apreciable en las muestras poblacionales
estudiadas, y que en general se comportan como una sola. La muestra
poblacional del Pacífico colombiano exhibió la mayor
diversidad genética (0.81). Los valores de parejas de distancias
FST mostraron mayor distanciamiento entre Versalles y Pacífico
(0.238) y la menor distancia entre Pacífico y Pasto (0.132). La
prueba de desequilibrio de ligamiento para parejas de sistemas
STR’s no mostró ser significante para Versalles y Pasto,
mientras que para el Pacífico sí lo fue para la pareja de
STR’s D21S11-D13S317. El análisis de agrupamiento por
distancias separó las poblaciones del centro de las ubicadas en
el suroccidente colombiano. Los resultados permiten concluir que las
poblaciones bajo estudio han sufrido un proceso de miscegenación
sistemático.
Caracterización de las frecuencias alélicas de cinco sistemas de STR’s autosómicos en la comunidad afrodescendiente de Mulaló en el Valle del Cauca
Héctor A. Garcés, Yamid Braga, Guillermo Barreto
Laboratorio
de Genética Molecular Humana, Sección Genética,
Departamento de Biología, Universidad del Valle, Cali, Colombia
La población de
Mulaló (corregimiento del municipio de Yumbo, Valle) es un
aislado afrodescendiente que tuvo sus orígenes desde la
época de la colonia. Para estudiar la estructura genética
de esta comunidad se caracterizaron las frecuencias alélicas de
cinco sistemas de STR’s (TH01, D7S820, D13S317, vWA y FGA) para
esta población a partir del ADN extraído a 43 individuos
sin relación entre ellos. Los sistemas STR’s se
amplificaron mediante PCR y los productos se separaron en geles de
poliacrilamida. Los alelos se tipificaron mediante el sistema de
análisis y documentación UVISAVE y el análisis
estadístico se efectuó con el software Arlequín
3.11. En Mulaló se encontró que el sistema FGA tuvo el
mayor número de alelos (28) mientras que D13S317 presentó
el menor número (7), además la mayor heterocigosidad
observada la presentó el sistema TH01 (0.90698) y la menor el
sistema D13S317 (0.72000). La diversidad genética promedio en la
muestra de Mulaló fue 0.825. El análisis molecular de
varianza a partir de la separación de tres grupos étnicos
(mestizos, afrodescendientes e indígenas) mostró que el
porcentaje de variación entre los individuos fue 80.79%,
además de un índice FSC de 0.02892 y un índice de
endogamia para Mulaló negativo (-0.02002). Estos resultados
permiten concluir la existencia de poca diferenciación
subpoblacional, y sugieren que la mezcla en Mulaló se puede
deber a la cercanía geográfica de la muestra mestiza
establecida en Cali a finales del siglo XVI.
Diversidad y estructura genética presente en 22 aislados poblacionales de la región andina y el suroccidente
colombiano a partir de las frecuencias alélicas de 12 sistemas de STR’s autosómicos
Fernando Rondón, Delly B. Tosse, Julio C. Osorio, Ángela Peña, Héctor Garcés, Heiber Cárdenas,
Guillermo Barreto
Laboratorio
de Genética Molecular Humana, Sección Genética,
Departamento de Biología, Facultad de Ciencias Naturales y
Exactas, Universidad del Valle, Cali, Colombia
Para cuantificar el grado de
diversidad y estructuración genética presente en las
poblaciones humanas del suroccidente y la región andina de
Colombia, se analizaron 455 individuos pertenecientes a 22 aislados
poblacionales con las frecuencias alélicas de 12 sistemas
microsatélites autosómicos. Los STR´s se
amplificaron mediante la PCR y los productos se separaron en geles de
poliacrilamida. Los alelos se tipificaron mediante el sistema de
análisis y documentación UVISAVE. Los resultados
mostraron menores valores de diversidad genética para las
muestras poblacionales Coyaima (Tolima) (0.77), Tumaco (Nariño)
(0.68) y Palmira (Valle) (0.81) y mayores para el aislado poblacional
afrodescendiente del Departamento del Cauca (0.93). El análisis
molecular de varianza mostró para los aislados poblacionales
comparados que la estructuración genética no es
significativa según el valor FST de 0.032, además
evidenció una alta endogamia en la muestra mestiza de Caldas
(0.43) y en la muestra indígena Coyaima (0.34), asimismo
generó evidencia de apareamientos preferenciales entre
individuos heterocigotos en las muestras mestizas de Bolívar y
Restrepo (Valle). El análisis de relaciones filéticas a
partir de las frecuencias alélicas de los 12 sistemas
microsatélites evaluados mostró una clara
separación entre las muestras mestizas del norte del
departamento del Valle respecto a las del sur, adicionalmente las
muestras afrodescendientes estuvieron en el mismo cluster y las
muestras amerindias quedaron ubicadas en dos agrupaciones diferentes.
En general, estos resultados permiten concluir la existencia de un
importante grado de miscegenación y flujo genético de los
tres componentes étnicos que predominan en estas dos regiones de
Colombia.
Determinación
de la frecuencia de la mutación más común para la
fibrosis quística, DF508, en portadores del
sur-occidente colombiano
ZF Corredor, J Escobar, G Barreto
Laboratorio
de Genética Molecular Humana, Sección Genética,
Departamento de Biología, Universidad del Valle, Cali, Colombia
Introducción: La
fibrosis quística es la enfermedad autosómica recesiva
más frecuente en la población blanca europea con una
frecuencia de afectados de 1/2,500 nacidos vivos y de 1/25 portadores
sanos. Se caracteriza por abundante producción de secreciones
mucosas en los pulmones. La mutación ÄF508 consiste de la
pérdida de 3 nucleótidos que codifican para el
aminoácido fenilalanina del codon 508, es responsable por la
formación de los canales de cloro en la membrana celular. Como
hecho llamativo se encuentra presente en 70% de los pacientes con
fibrosis quística pero se desconoce su incidencia en portadores
sanos.
Objetivo: Establecer la
frecuencia de la mutación ÄF508 para la población
sana y una muestra infértil del sur-occidente colombiano
Metodología: Se
estudiaron 690 individuos sanos, distribuidos así: 500 mestizos,
100 afroamericanos y 90 indígenas (50 coyaimas y 40 awa kwaiker)
y 20 hombres infértiles (12 azoospérmicos y 8
oligozoospérmicos). El ADN extraído mediante
desalamiento, amplificado por la PCR con cebadores específicos
para el exon 10 del gen CFTR. La detección de la mutación
se hizo mediante la migración diferencial de los distintos
alelos en gel de poliacrilamida y confirmada por SSCP.
Resultados: En la
población mestiza sana la mutación ÄF508 se
presentó en heterocigosis con una frecuencia de 0.8%, mientras
que en las comunidades indígenas y afroamericanas no se
observó esta mutación. En los individuos
infértiles hubo una frecuencia de heterocigotos de 5%.
Conclusiones: Fue posible
observar que no hay diferencias significativas entre las frecuencias de
portadores e infértiles, que aquí se muestran con 2% y 6%
respectivamente, según informes en la literatura.
Evaluación de la diversidad genética en poblaciones humanas del centro y sur-occidente colombiano
Fernando Rondón, Julio C. Osario, Heiber Cárdenas, Guillermo Barreto
Laboratorio
de Genética Molecular Humana, Sección Genética,
Departamento de Biología, Universidad del Valle, Cali, Colombia
En general la
población colombiana actual es el resultado de la
contribución genética aportada, desde finales del siglo
XV, por la unión entre europeos, africanos y nativos americanos.
Para determinar \a estructura genética de los grupos
poblacionales del centro y sur-occidente colombiano, se analizó
la diversidad genética a partir de la caracterización del
tipo y frecuencia de RFLP’s de miDNA en tres grupos raciales:
cuatro comunidades amerindias [awa kuaikier, coyaima, pijao y
emberá-dumá); dos poblaciones mestizas (Versalles y Cali)
y la población afrodescendiente del Pacifico colombiano. Los
resultados se compararon con las frecuencias de haplotipos
mitocondriales que se informan en la literatura para 29 comunidades
amerindias, cinco aislados afrodescendientes y tres poblaciones
mezcladas de Colombia. En cuanto a las frecuencias de mtADN se
encontró que los afrodescendientes presentaron 15% de marcadores
típicos amerindios y 43% de africanos.
El análisis de la
diversidad genética mostró un índice de 0.75 en la
población mestiza del Valle del Cauca y 0.72 en la muestra
pijao, valores muy cercanos al índice de diversidad de la
población mestiza de Bogotá (0.76). El análisis
molecular de varianza mostró un alto grado de
estructuración poblacional sustentado en los valores Fst de
0.310 (grupos étnicos), de 0.237 (regiones geográficas) y
de 0.279 (grupos étnicos dentro de regiones geográficas
en Colombia). Estos resultados reflejan un alto grado de diversidad
genética mitocondrial, un elevado grado de estructuración
poblacional y confirman el origen extracontinental y la
miscegenación de varios grupos de poblaciones del centro y
sur-occidente colombiano.
Distribución de la mezcla genética dentro de la región de Nariño, Colombia
Yuri Caicedo, Winston Rojas, Gabriel Bedoya, Andrés Ruiz-Linares
Grupo Genética Molecular, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
La región de
Nariño en el extremo suroeste de Colombia permaneció en
relativo aislamiento del resto del país hasta el año de
1932; la provincia de Pasto fue notablemente abundante en
población indígena y más o menos aislada de los
gobiernos coloniales de Bogotá y Quito. De acuerdo con los
informes de autodenominación étnica y algunos estudios
demográficos y genéticos, esta región tiene un
componente amerindio alto comparado con otras del país. Con este
estudio sin embargo se pudo demostrar que la distribución de la
ancestría amerindia no es homogénea dentro de la
región, es mayor en las subregiones de Ipiales, Pasto y
Túquerres, comparada con Ancuya y La Unión. Esto sugiere
que los estudios genéticos de asociación con enfermedades
en la región deben controlar la estratificación
poblacional debida a la ancestría local. En una muestra de ADN
de 201 hombres de la región de Nariño se
estableció la frecuencia de linajes maternos y paternos con
marcadores genéticos en mitocondria y cromosoma Y; así
como la mezcla genética basada en el cromosoma X y autosomas
mediante marcadores específicos de población. La muestra
se estratificó según su origen y el análisis de
datos se realizó con los programas Arlequín 3.01,
Structure 2.0 y Admix.PAS.
Estimación
de la frecuencia de microdeleciones en la región AZF del
cromosoma y en una población de pacientes con infertilidad
masculina
Tatiana Erazo, Lina Marcela Gallego, Guillermo Barreto
Laboratorio
de Genética Molecular Humana, Sección Genética,
Departamento de Biología, Universidad del Valle, Cali, Colombia
Las microdeleciones en el
brazo largo del cromosoma Y son la causa genética más
común asociada con infertilidad masculina. Si se considera el
escaso número de trabajos, hechos en Colombia, con
métodos moleculares para la detección de las causas de
esta enfermedad, el objeto del presente trabajo fue calcular la
frecuencia de microdeleciones en la región AZF (factor de
azoospermia) en 35 pacientes con oligozoospermia, azospermia y
oligoastenozoospermia. También se analizaron 5 niños
concebidos mediante la técnica de reproducción asistida
de inyección intracitoplasmática de espermatozoides
(ICSI) para evaluar en ellos la frecuencia de transmisión de
estas deleciones. La amplificación de las subregiones AZF se
realizó con la técnica monoplex-PCR, que consiste en
utilizar 3 cebadores específicos por cada subregión
(AZFa, AZFb, AZFc). Los resultados se confirmaron con de triplex-PCR.
Se observó la deleción tipo b2/b4 que abarca la totalidad
de la región AZFc, con una frecuencia de 2.8% en los hombres con
infertilidad. Aunque esta frecuencia es inferior a la establecida en
otras regiones del mundo, este análisis permite establecer la
relación causal entre las microdeleciones en el cromosoma Y y
las alteraciones en el recuento espermático total. La baja
frecuencia de microdeleciones puede reflejar la dilución del
pool génico de origen europeo (caucasoides) como consecuencia
del grado de mezcla con afroamericanos y amerindios.
Estudio genético del síndrome de Tourette en la poblacion antioqueña
Ana Valencia, William Cornejo, Jharley García, Jaime Carrizosa, Isabel Rivas, Lucía Blazicevich,
Mauricio Cuartas, Hernando Díaz, Erika Hoyos, Nora Zuluaga, Gabriel Bedoya, Andrés Ruiz
Grupo
Genética Molecular, Universidad de Antioquia, Medellín.
Servicio de Neurología Infantil, Hospital San Vicente de
Paúl, Medellín. Servicio de Psicología,
Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Objetivos: Establecer la
posible asociación entre el ST y variantes alélicas en el
gen receptor de dopamina 2, y marcadores anónimos en las
regiones cromosómicas 2p11.2, 6p25.1, 11q24.2, 20q13.2 y
21q22.1, previamente asociadas con el síndrome, mediante
diferentes métodos de asociación genética basados
en familias.
Metodología: Genotipificación de polimorfismos Taq1B y Taq1D del gen DRD2 y
marcadores microsatélites D2S1790, D6S477, D11S933, D20S1085 y
D21S1252, en los miembros de 42 núcleos familiares originarios
de Antioquia. Se llevó a cabo análisis de ligamiento
paramétrico y análisis no paramétrico.
Resultados y
discusión: Se encontró asociación significativa
entre el ST y los haplotipos en el gen DRD2 (haplotipo 2-1 para Taq1B y
Taq1D respectivamente, (p = 0.013), y con los marcadores D6S477,
D11S933 y D21S1252 (alelos 220, p = 0.016, 266, p = 0.017, 250, p:
0.034), que, aunque no segregan en todas las familias
antioqueñas, se transmitieron con una frecuencia mayor que la
esperada entre los afectados. El gen DRD2 posiblemente no tenga un
efecto mayor sobre el trastorno dado que el haplotipo de riesgo
está presente también en personas no afectadas de las
familias, pero puede ser un factor modificador del fenotipo, pues se
encuentra sólo en los afectados con el ST y no entre los que
presentan apenas TOC o únicamente TC.
Conclusiones: Existe
heterogeneidad genética para el ST en la población
antioqueña. A pesar de este hecho, se detectó
asociación del síndrome con los marcadores D6S477,
D11S933 y D21S1252, que se pueden segregar con variantes en genes
comprometidos en el trastorno. Además se detectó
asociación con el haplotipo 2-1 para el gen DRD2, el cual puede
ser un factor modificador del fenotipo.
Evaluación
del efecto de la mezcla genética sobre la edad de comienzo y
otras características fenotípicas de la enfermedad de
Alzheimer, producida por la mutación E280A en PS1
Jharley García, Francisco Lopera, Sonia Moreno, Wiston Rojas, Mauricio Cuartas, Gloria García,
Gabriel Bedoya
Laboratorio
de Genética Molecular (GENMOL). Laboratorio de Neurociencias;
Sede de Investigación Universitaria, Universidad de Antioquia,
Medellín, Colombia
Objetivo: Evaluar el efecto
de la mezcla genética sobre la edad de comienzo y otras
características fenotípicas de la enfermedad de
Alzheimer(EA), debida a la mutación E280A en presenilina 1(PS1),
en pacientes de población antioqueña.
Metodología: A cada
uno de 97 pacientes portadores de la mutación E280A en PS1,
previamente caracterizados en relación con la EA, se les
calcularon tres índices de ancestría individual (Afr/Eur,
Ame/Eur y Afr/Ame), mediante 17 marcadores con alelos que discriminan
las tres poblaciones (europea, amerindia y africana) que componen la
población antioqueña. Se evaluó la
correlación de estos índices con características
fenotípicas y edad de comienzo de la EA.
Resultados: El índice
de ancestría ame/eur se correlacionó negativamente de
forma significante con las intrusiones de la memoria de una lista de
palabras (MLP); palabras que dice el paciente distintas a las mostradas
por el evaluador(R = -0.347; p = 0.001), el índice afr/eur
mostró correlación igualmente negativa y significante con
las praxias; figura del rombo (R = -0.21; p = 0.043) y el índice
afr/ame no mostró correlación alguna.
Discusión: Se puede
inferir que el grado de mezcla europeo con respecto al amerindio,
afecta positivamente las intrusiones de la MLP y con respecto al
africano, tiene un efecto moderado sobre las praxias, en portadores de
la mutación E280A.
Conclusiones: El
comportamiento de la mutación E280A en PS1, se modifica en lo
referente a las intrusiones de MLP y las praxias, por la
relación del grado de mezcla europea con amerindia y africana,
respectivamente, lo que puede significar la existencia de genes
modificadores en estas dos últimas poblaciones.
Evaluación del efecto genotóxico del antracol WP 70 en cultivos de linfocitos humanos
Carlos Hernán Barrera, Liz Carolina Pardo, Germán David Cortina
Facultad de Ciencias Básicas, Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia, Pereira, Colombia
Se evaluó el efecto
citotóxico y genotóxico del fungicida antracol WP 70 en
cultivos de linfocitos humanos. A nivel citotóxico, con base en
la prueba de índice mitótico, se evaluaron las
concentra-ciones 2.5, 1.25, 0.62, 0.31, 0.16, 0.08, 0.04, 0.02 y 0.01
mg de antracol/ml agua destilada, escogidas a partir de la dosis
recomendada por la casa comercial para la aplicación del
producto en cultivos agrícolas (250g/100 l agua). Se
encontró relación estadísticamente significativa
entre el aumento en la concentración y la disminución en
el porcentaje de células en mitosis, a un nivel de confianza de
99%, con una correlación de 94%. Las concentraciones 2.5 y 1.25
mg de antracol/ml de agua resultaron ser las más
citotóxicas. A nivel genotóxico, a partir de la prueba de
aberraciones cromosómicas, se evaluaron las concentraciones 2.5,
1.25 y 0.02 mg/ml. No se encontraron diferencias
estadísticamente significativas a un nivel de confianza de 95%
entre el porcentaje de células aberrantes y las aberraciones
cromosómicas de estas concentraciones, en relación con el
grupo control. Los porcentajes de aberraciones cromosómicas en
hombres y en mujeres fueron 64% y 36%, respectivamente. Los porcentajes
entre aberraciones de tipo cromatídico y cromosómico
fueron 77.3% y 22.7%. No se encontraron diferencias
estadísticamente significativas en relación con el sexo y
con el tipo de aberra-ción. Se recomienda continuar con estudios
de toxicología genética y citogenética para
evaluar el efecto genotóxico de compuestos físicos,
biológicos y químicos, especialmente plaguicidas, por su
amplio uso en el departamento de Boyacá.
Evaluación
preliminar de tres métodos de aislamiento de ADN a partir de
restos óseos muiscas hallados en predios de la Universidad
Pedagógica y Tecnológica de Colombia sede Tunja
Yecith Puerto, Germán Cortina, Mauricio Rey
Grupo de Investigaciones Arqueológicas e Históricas, Universidad
Pedagógica y Tecnológica de Colombia, Tunja. Unidad de
Paternidad, Instituto de Genética, Universidad Nacional de
Colombia, Bogotá, Colombia.
El recuperar y caracterizar
ADN de material antiguo permite retroceder en el tiempo para obtener
información de los organismos estudiados. Las posibilidades de
estudio abarcan todos los niveles de organización
biológica: poblacional, individual, de especie y molecular
(Pääbo, 1987; Rogan y Salvo, 1990; Brown y Brown, 1992b;
Pääbo, 1993; Brown y Brown, 1994b; DeSalle, 1994; Roy et al.
1994; Cano, 1996; Yang, 1997). Así se pueden estudiar numerosas
muestras de restos humanos dispersas en distintos museos del
país y establecer frecuencias génicas para ciertos
marcadores de ADN nuclear (STRs autosómicos y de cromosoma Y) y
mitocondrial, con el fin de establecer algunos patrones de origen
étnico, parentesco, relación y migración de
poblaciones (Bianchi, 1998). En el presente trabajo se informa la
estandarización de una técnica para aislamiento de ADN a
partir de restos óseos prehispánicos humanos hallados en
predios de la Universidad Pedagógica y Tecnológica de
Colombia, sede Tunja. Se utilizaron con modificaciones, protocolos para
aislamiento de ADN antiguo según Carney & Loy, 2001; Keyser,
Crubézy y Ludes, 2003 y François et al., 2005. Para
verificar la presencia de ADN se realizaron electroforesis en geles de
agarosa y poliacrilamida. A partir de muestras sanguíneas se
estandarizaron las condiciones de amplificación del marcador
molecular autosómico tipo STR llamado amelogenina (marcador de
sexo), y se ensayaron en el ADN extraído de restos óseos
muiscas. En una muestra de fémur de adulto, se evidencia un alto
grado de degradación del ADN, y por tanto no se pudo amplificar
el ADN nuclear.
Evaluación en una población amerindia y una afroamericana, de tres variantes en los genes Ucp2 y Ucp3, que han mostrado asociación a DM2 en poblaciónantioqueña
Patricia Caicedo, Liliana Franco, María Victoria Parra, Natalia Gallego, Constanza Duque, Andrés Ruiz,
Gabriel Bedoya
Laboratorio de Genética Molecular, Universidad de Antioquia, Medellín. Galton Laboratory, Department of Biology, University College London, UK
Objetivos: Comparar las
frecuencias genotípicas, diplotípicas,
haplotípicas y alélicas de los polimorfismos I 45 D y G
-866 A (Ucp2) y C –55 T (Ucp3), en poblaciones emberá,
afroamericana, antioqueña diabética y antioqueña
sana.
Metodología: Las tres
variantes se genotificaron por PCR y/o RFLPs en 68 muestras de
amerindios (emberá), 64 de afroamericanos, 189 de individuos con
DM2 y 128 de individuos sanos. Los análisis estadísticos
se hicieron mediante los programas Arlequín, Genepop y Epi-Info.
Resultados: Tanto los alelos
de riesgo para las variantes I 45 D (I) y C -55 T (C) como los
genotipos homocigóticos para éstos, se presentan en una
mayor frecuencia en la población emberá. De forma
similar, el alelo de riesgo para la variante G -866 A (A) y el genotipo
homocigoto para éste, se presentan en una mayor frecuencia en la
población afroamericana. El diplotipo I/I A/A C/C y el haplotipo
IAC se encuentran en una mayor frecuencia en la población
emberá y en la población de casos.
Conclusiones: Estos
resultados apoyan el genotipo económico pues la población
amerindia estudiada presenta una frecuencia mayor de los alelos de
riesgo a DM2 en los polimorfismos de los genes analizados, lo que
indica que dichos alelos se introdujeron a la población
antioqueña por los ancestros amerindios. Las poblaciones
latinoamericanas con alto grado de mezcla amerindia, pueden tener
aumentada la susceptibilidad a DM2, cuando adquieren estilo de vida
occidental.
Factores genéticos de la enfermedad cerebrovascular isquémica en Colombia
Juliana
Martínez, Alfonso Córdoba, Jorge Vega, Juan Guillermo
Zarruk, Luis Alfredo Villa, Patricio López, Gabriel Bedoya,
Federico Silva, Christian Rueda, Gustavo Pradilla
Grupo de Genética Molecular, Sede de Investigación
Universitaria,
Universidad de Antioquia, Medellín. Instituto de
Investigaciones, Fundación Cardiovascular de Colombia,
Bogotá. Facultad de Salud, Universidad Industrial de Santander, Bucaramanga.
Departamento de Fisiología y Bioquímica Facultad de
Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Objetivos: Determinar la
asociación de Hcy, ADMA, y genes implicados en la hemostasis
(FII-G20210A, FV-G1691A, FB-G-455A, PAI-1-4G/5G), metabolismo de
homocisteina (MTHFR-C677T, CBS-I/D, CBS-C572T) y control de la
presión sanguínea (ECA-I/D, AGT-T704C y C521T,
CYP11B2-T-344T, AT1R-A1166C) con el riesgo de ECV-I.
Metodología: Se
tomaron muestras de sangre periférica a 398 individuos de los
cuales 216 con ECV-I y 182 controles en Antioquia, Cundinamarca y
Santander. Los niveles de Hcy y ADMA se cuantificaron por ELISA. Los
genotipos se determinaron por PCR-RFLPs.
Resultados: No hubo
diferencias en los niveles de ADMA y Hcy. Los marcadores se encuentran
en EHW. Se observaron diferencias en la distribución de
genotipos para MTHFR-C677T (p=1x10-8) en Antioquia, para ECA-I/D en
Cundinamarca y Santander (p=0.0094 y 1x10-8 respectivamente) y
AGT-T704C en Cundinamarca (p=0.02). La razón de disparidad para
el genotipo TT de MTHFR OR=3.41 con un IC95% (1.36-8.72), los otros no
muestran diferencias.
Discusión: La ECV es
una importante causa de muerte e incapacidad, en la que se han
identificado componentes genéticos, en este estudio se observan
diferencias en factores genéticos asociados con la enfermedad de
acuerdo con la procedencia. ADMA y Hcy no son factores de riesgo en
Colombia; no existe una correlación entre Hcy y genotipos de
MTHFR como se informó antes, porque los niveles de Hcy
están influidos por condiciones ambientales.
Conclusión: MTHFR-C677T, ECA-I/D y AGT-T704C son factores de riesgo para ECV-I en
Colombia, y esto depende de la procedencia geográfica.
Resultados parciales.
Frecuencia mutacional y estudio de posibles casos de alelos nulos en 17 sistemas STR en población colombiana
Dayana Suárez, Andrés Gutiérrez, Alejandro Giraldo, Dora Fonseca, Manuela Jay
Fundación Gillow. Universidad Nacional de Colombia, Genética Molecular de Colombia, Bogotá, Colombia
Una de las
características que deben presentar los sistemas STR al ser
empleados como marcadores para pruebas de filiación es su
estabilidad, representada en una tasa mutacional relativamente baja.
Cuando se presentan casos en los que se evidencia una o dos exclusiones
(recordar que según los parámetros internacionales se
deben encontrar 3 ó más exclusiones para determinar un
resultado de paternidad excluida), esta situación se explica por
sucesos mutacionales, donde los alelos paternos o maternos pierden o
ganan repeticiones (generalmente una). En estos casos es necesario
considerar la frecuencia con la que se presenta este caso en la
población para incluirlo en el cálculo de la probabilidad
de paternidad o maternidad. Se realizó el estudio de 1859 casos
de filiación (tríos completos) de diferentes regiones del
país, de los cuales 1435, corresponden a resultados de
paternidad no excluida. Se determinó la frecuencia de
mutación en los sistemas D8S1179, D21S11, D7S820, CSF1PO,
D3S1358, THO1, D13S317, D16S539, D2S1338, D19S433, vWA31, TPOX, D18S51,
D5S818, FGA, PENTA E y PENTA D, incluidos en los kits comerciales
Identifiler de Applied Biosystems y Power Plex 16 de Promega. En 53
casos, (3.7%), se evidenciaron exclusiones aisladas. De éstas 11
(20.7%) corresponden a casos de alelos nulos y 42 (79.3%) casos a
mutaciones de un solo paso (56.1% ganancia y 26.8% pérdida de
una repetición). Se encontraron 5 casos de exclusiones aisladas
de origen materno, una de ellas correspondiente a alelos nulos. El
sistema que registró mayor número de posibles exclusiones
aisladas en general fue FGA (16.9%).
Frecuencias
alélicas, genotípicas y haplotípicas
HLA-A,-B,-DRB1 en donantes fallecidos. Medellín, Colombia
Libia M.
Rodríguez, Mabel C. Giraldo, Natalia García, Laura
Velásquez, Sara C. París, Cristian M. Álvarez,
Luis F. García
Grupo de Inmunología Celular e Inmunogenética, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia,
Medellín, Colombia
Introducción: La
caracterización genética del sistema HLA es de gran
utilidad en estudios antropogenéticos, en la comprensión
de mecanismos asociados con susceptibilidad o resistencia a diversas
enfermedades, en los fenómenos inmunológicos durante el
embarazo y en la selección de donantes/receptores en trasplantes
de órganos.
Objetivo: Determinar las
frecuencias alélicas, genotípicas y haplotípicas
HLA-A,-B,-DRB1 en donantes fallecidos en Medellin.
Materiales y métodos: Se incluyeron 926 donantes entre febrero de 1989 y septiembre del 2006
a los cuales se les realizó la tipificación HLA
–A,-B,-DRB1 por PCR-SSP de mediana resolución. Las
frecuencias alélicas, genotípicas y los
haplotípicas se calcularon con el algoritmo de máxima
verosimilitud. Se evaluó el ajuste al equilibrio de
Hardy-Weimberg por una prueba exacta análoga a Fisher usando la
cadena de Markov, así como el desequilibrio de ligamiento entre
loci con los paquetes estadísticos Arlequín
versión 3.0 y Genepop versión web.
Resultados: Se identificaron
22, 43 y 14 alelos para los loci HLA-A, -B, -DRB, respectivamente, de
los cuales los más frecuentes fueron: A*02, A*24, B*35 y
DRB1*04. En los loci HLA-A, y -B se observó una deficiencia en
la proporción de individuos heterocigóticos (p<0.01 y
p<0.00001, respectivamente). Los haplotipos más frecuentes
fueron HLA-A*24, B*35 (0,0773), HLA-B*35, DRB1*04 (0,0636) y HLA-A*24,
DRB1*04 (0,0889) para HLA-A,-DRB1. Los haplotipos más comunes
fueron HLA-A*24, B*35, DRB1*04 (0,0461) y HLA-A*24, B*61, DRB1*04
(0.0197).
Conclusiones: Los resultados
sirven de referencia para otros estudios y corroboran la mezcla racial
existente en esta población, típica de población
latinoamericana pero con un alto grado de influencia caucásica.
Identificación de variantes en genes candidatos de resistencia a insulina en la población antioqueña
MV Parra, L Franco, C Duque, N Gallego, O Campo, A Villegas, A Ruiz, G Bedoya
Grupo Genética Molecular. Grupo de Endocrinología y Metabolismo de la Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia. University Collage London, UK
Objetivo: Identificar un
marcador molecular de riesgo para diabetes mellitus tipo 2 en genes
implicados en la fisiopatología de la obesidad y resistencia a
insulina en una muestra de población antioqueña, para ser
utilizado en diagnóstico precoz de susceptibilidad a diabetes
tipo 2.
Metodología: En un
grupo de pacientes de DM2 y otro control, con la técnica
PCR-RFLP, se evaluaron variantes polimórficas en los genes LEP,
APM1, CPN10, UCPs (1, 2 y 3), PPAR? e IRS1, los cuales intervienen en
la diferenciación del adipocito, lipogenólisis,
lipogénesis, excreción y señalización de
insulina y regulación de la síntesis de ATP en la
mitocondria.
Resultados: Se tipificaron
22 variantes en los genes PPARã, IRS1, Lep; CPN10; UCP1, UCP2 y
UCP3 para un número variable de casos y controles. La
tipificación de los 22 marcadores, produjo los siguientes
resultados: 9 de las variantes presentaron comportamiento
monomórfico, tanto en casos como en controles. Se encontraron
diferencias significativas entre casos y controles en los marcadores
2548 en el gen de leptina (p=0.0425) y -55C/T (p=0.0179) en UCP3; en
los otros no hay diferencias entre los dos grupos.
Conclusiones: Hasta ahora
hay un haplotipo conformado por dos loci, pero es necesario continuar
la búsqueda de variantes en otros genes que confieran
susceptibilidad a DM2 en la población antioqueña, como
los genes TCF7L2, IRS 2, ENPP1.
Ejecución
de un protocolo de extracción de ADN a partir de biopsias
humanas del sistema hospitalario costarricense y determinación
de su calidad para estudios moleculares
María José Villalobos, Ernesto Jiménez, Gerardo Jiménez
Centro de
Investigación en Hematología y Trastornos Afines, San
José, Costa Rica. Servicio de Anatomía Patológica,
Hospital San Juan de Dios, Bogotá, Colombia
El estudio evaluó
cuatro distintos protocolos de uso común en laboratorio y uno
comercial, para la extracción de ADN a partir de material fijado
en formalina y parafinado, correspondiente a cervix uterinos producto
de conizaciones y LEEPs, provenientes de los servicios de
patología de 10 hospitales de la Caja Costarricense del Seguro
Social (CCSS). Se encontró que el protocolo más efectivo
para PCR diagnóstica es el que se basa en extracción
fenólica y que la calidad del ADN se ve profundamente afectada
por el proceso de preservación al que se ven sometidos los
tejidos, en los diferentes servicios de esta institución. El
promedio general de amplificación estuvo por debajo de 50%. El
rango de amplificación por servicio va, desde 0%, hasta 70%,
según el protocolo. Las razones por las que la PCR a partir de
ADN aislado de parafinadas resulta inconsistente, se pueden resumir a
grosso modo en baja cantidad o ausencia de ADN blanco detectable,
presencia de inhibidores, degradación del ADN total blanco y
fragmentación de los ácidos nucleicos debido a la
fijación en formalina.
Seguimiento
y evaluación molecular de quimerismo en pacientes trasplantados
con precursores hematopoyéticos alogénicos, procedentes
del Hospital Universitario San Vicente de Paúl
ÁngelaRodríguez-Cárdenas,
Oscar Palacio, Luz Mariela Ochoa, José Luis Ramírez,
Francisco Cuéllar-Ambrosi,
Gonzalo Vásquez
Laboratorio
de Genética Médica, Facultad de Medicina. Laboratorio de
Identificación Genética, Instituto de Biología.
Unidad de Trasplante de Médula Ósea, Laboratorio de
Hematología, Departamento de Medicina Interna, Universidad de
Antioquia, Medellín, Colombia
Introducción: El
trasplante alogénico de células madre
hematopoyéticas se usa ampliamente para tratamiento de diversas
enfermedades hematológicas tanto benignas como malignas. Poder
distinguir entre la hematopoyesis del donante y la hematopoyesis del
receptor es una herramienta valiosa para el seguimiento de la toma del
injerto, la identificación temprana del riesgo inminente de
pérdida del mismo o la aparición de enfermedad injerto
contra huésped.
Objetivo: Determinar la
información que ofrecen 15 marcadores tipo-STR en pacientes
transplantados con precursores hematopoyéticos, y establecer un
seguimiento secuencial del injerto.
Metodología: Extracción de ADN salting-out/chelex, PCR-Multiplex, electroferesis capilar ABI prism-310.
Resultados y
discusión: Se incluyeron 16 pacientes con transplante
alogénico, donante relacionado, 6 mujeres y 10 hombres con
promedio de edad de 19.8+45.7 años, tiempo promedio de toma del
injerto de 15.7+13 días y promedio de células CD34+/kg de
17.12+34.96. En todas las parejas receptor/donante se pudo identificar
por lo menos un marcador informativo. Los microsatélites
más informativos fueron D3S1358 (75% de los casos), seguidos de
D8S1179, D3S1338 y D18S51 (cada uno con 73.3% de relevancia), y
presentaron las más altas heterocigocidades; en contraste con
D5S818 que sólo fue informativo en 38% de los casos.
Conclusiones: Este es el
primer protocolo en Colombia que genera un conjunto de marcadores
específicos de alta información para el seguimiento de
quimerismo en pacientes post-transplante con precursores
hematopoyéticos, que permite detectar pequeñas cantidades
de ADN procedente del receptor (2%-4%). También se evidenciaron
las ventajas que ofrece el seguimiento de quimerismo con PCR-STR, que
es rápido, sensible, automatizable, y de bajo costo.
Empleo de los polimorfismos genéticos de las enzimas metabólicas CYP2E1, GSTM1 y GSTT1 como biomarcadores de susceptibilidad en una población expuesta a disolventes orgánicos
Andrés Felipe Rodríguez, Helena Groot, Marcela Varona, Diana Narváez, Sandra Ortiz, Carlos Torres
Laboratorio
de Genética Humana, Universidad de los Andes. Instituto Nacional
de Salud. Universidad El Bosque, Bogotá, Colombia
Para determinar la utilidad
de los polimorfismos genéticos de las enzimas metabólicas
CYP2E1, GSTM1 y GSTT1 como biomarcadores de susceptibilidad en
individuos expuestos y no expuestos a solventes orgánicos en
Cundinamarca, se determinó la frecuencia de los genotipos de
tales enzimas y se hizo una correlación preliminar con los
resultados de daño de ADN obtenidos por la prueba del cometa. En
90 muestras (30 expuestos y 60 no expuestos) provenientes de
trabajadores de fábricas de pinturas, metales y fármacos
se encontraron las siguientes frecuencias: Para el gen GSTT1 (62.2%
presente y 37.8% nulo) y para GSTM1 (47.7% presente y 52.2% nulo). Para
el gen de la CYP2E1 con las enzimas de corte PstI/RsaI (83.3% tienen el
genotipo c1c1, 7.8% son c1c2 y el 8.9% son c2c2). Con la enzimas DraI
(62.2% tienen el genotipo DD, 33.3% DC y 4.4% CC). Igualmente se
determinó que los hombres con el genotipo c1c1 (Pst/Rsa) tienen
mayor daño en el ADN que las mujeres y que todos los individuos
con este genotipo que hayan estado expuestos entre 12 y 36 meses
presentan un mayor daño en el ADN. Se determinó que no
existe una diferencia significativa entre los dos grupos en cuanto a
daño en el ADN. Estos resultados demuestran la importancia de
los biomarcadores de susceptibilidad, pues contribuyen
significativamente en varios niveles de la evaluación del
riesgo. Son útiles para entender mejor los factores del riesgo
individual, pero también alcanzan cálculos más
pertinentes de aumento en el riesgo para subpoblaciones.
Asociación entre la inestabilidad microsatelital, los polimorfismos Asp1822Val y Gly2502Ser del gen APC, y el riesgo de aparición del cáncer colorrectal esporádico
Andrés Gutiérrez, Ana María Mora, Amparo Mora, Germán Junca, Antonio Ormaza, Jorge Padrón,
Alejandro Giraldo
Genética
Humana, Universidad Nacional, Bogotá. Fundación Gillow,
Bogotá. Universidad de los Andes, Bogotá. Facultad de
Medicina, Universidad Nacional de Colombia, Bogotá.
Clínica San Pedro Claver, Bogotá, Universidad del
Rosario, Bogotá, Colombia
El cáncer colorrectal
(CCR) es una de las causas más frecuentes de muerte por
cáncer. Se calcula que en Colombia ocupa la quinta
posición. Es una enfermedad heterogénea, pero 20% de los
casos son familiares y 5% son hereditarios. A lo largo de los
años se han desarrollado algunos criterios para identificarlo,
como la detección de inestabilidad microsatelital (IMS), que
permite identificar pacientes con características
clínicas y patológicas diferentes, detectar en ellos
mutaciones de varios genes reparadores del mal apareamiento del ADN y
silenciamiento epigenético. Además, el estudio de ciertas
mutaciones polimórficas, consideradas convencionalmente inocuas,
sugiere que en algunos casos serían mutaciones de baja
penetrancia, que pueden incrementar el riesgo de aparición de la
enfermedad. En este estudio se analizó la IMS en 35 muestras de
pacientes con CCR, y se comparó el ADN de sangre
periférica y del tumor, con los marcadores BAT25, BAT26, D2S123,
D5S346 Y D17S250. También se evaluaron las frecuencias de los
polimorfismos Asp1822Val y Gly2502Ser del gen APC (comprometido en la
aparición del CCR), en 100 muestras de sangre de ancianos, 100
muestras de niños y en 50 pacientes con CCR. La IMS se
identificó en 5.7% de los casos (en 2.8% fue alta y en 2.8% fue
baja) y en 2.8% se observó pérdida de heterocigocidad. No
se encontró ninguna diferencia significativa entre las
frecuencias de los alelos del polimorfismo Asp1822Val para las tres
poblaciones, mientras que para el polimorfismo Gly2502Ser se
observó una diferencia significativa entre la población
de ancianos al ser comparada con la población de niños y
de pacientes lo que puede indicar un posible efecto de
protección del alelo serina.
Análisis de la inestabilidad de microsatélites mediante el marcador BAT-26 en una muestra de pacientes con diagnóstico de cáncer gástrico o colorrectal en el Hospital Universitario de Santander
Wilmer Cárdenas, Adriana Castillo, Clara Vargas, Jesús Insuasty, Olga Moreno
Laboratorio de Genética Humana, Facultad de Salud, Universidad Industrial de Santander. Unidad de Oncología del Hospital Universitario de Santander, Bucaramanga, Colombia
Objetivos: Identificar la
presencia de inestabilidad de microsatélites (IMI+) en una
muestra de pacientes con cáncer gástrico o colorrectal.
Establecer la frecuencia de IMI+ en las muestras analizadas. Relacionar
los hallazgos del análisis de IMI+ con el grado de
diferenciación histopatológica del tejido tumoral
analizado.
Metodología: Se
tomaron muestras de biopsia tumoral (células tumorales) y sangre
(células normales), a 43 pacientes (12 con dx de ca
gástrico y 11 con dx de ca colorrectal). A las biopsias se les
realizó la extracción de ADN con fenol/cloroformo/alcohol
isoamílico, previa desparafinación y digestión con
proteinasa K. La extracción de ADN de la sangre se hizo con el
método de salting out. Posteriormente en todas las muestras se
amplificó por PCR el marcador microsatélite BAT-26 y los
amplificados obtenidos se corrieron en una electroforesis capilar y se
analizaron en un equipo ABI PRISM 310, para obtener la
genotipificación.
Resultados y
discusión: Se logró tipificar el microsatélite
BAT-26 en 23 pacientes, tanto en la sangre como en la biopsia del
tumor, 4 presentaron IMI+ (17%): 3 de ellos con cáncer
colorrectal y uno con cáncer gástrico. De acuerdo con el
grado de diferenciación histopatológica, los tres
pacientes con cáncer colorrectal e IMI+ se clasificaron como:
uno bien diferenciado, uno moderadamente diferenciado y uno mal
diferenciado. El único caso de cáncer gástrico con
IMI+ se clasificó con un grado de diferenciación
histopatológica mal diferenciado. Aunque algunas investigaciones
han encontrado asociaciones entre el fenotipo IMI+ y canceres
pobremente diferenciados, en este estudio no se encontró
asociación entre el fenotipo IMI+ y el grado de
diferenciación histopatológica del tumor, ni con la edad
o el sexo.
Conclusiones: El fenotipo
IMI+ se encontró en 17% de los casos analizados. Dos de los
pacientes con IMI+ correspondían a cáncer colorrectal
hereditario. No se encontró ninguna asociación entre IMI+
y el grado de diferenciación histopatológica de los
tumores.
Anomalías cromosómicas en sangre periférica de pacientes con melanoma
Sandra M. Rondón, Nelson E. Rangel, Patricia Cabrera, Sandra R. Ramírez
Laboratorio de Biología Celular y Molecular, Facultad de Medicina Universidad del Rosario, Bogotá, Colombia
Introducción: En
Colombia el melanoma es la principal causa de muerte por enfermedades
dermatológicas (40%) y representa 1% del total de muertes por
cáncer. La alta incidencia del melanoma hace necesaria la
búsqueda de nuevos marcadores que expliquen su desarrollo y
progresión.
Objetivo: Determinar
anomalías cromosómicas en sangre periférica de
pacientes con melanoma y relacionarlas con las características
histopatológicas de la enfermedad.
Metodología: Muestras
de sangre periférica de 30 pacientes con melanoma y 23
individuos control se analizaron con técnicas de
citogenética convencional (bandeo G).
Resultados: El
análisis de los cariotipos en los pacientes, mostró que
los cromosomas X, 9 y 17 fueron los afectados con más
frecuencia. Dentro de las anomalías numéricas las
monosomías de los cromosomas X y 17 fueron las más altas
tanto en estadíos tempranos como tardíos. Se presentaron
deleciones y translocaciones como anomalías únicas y se
observó una alta frecuencia de fragilidades y roturas en las
regiones 9q12, 3p12, 6p11, 1q11 y 9q11. En el grupo control no se
observó ningún tipo de anomalías y se
encontró un bajo porcentaje de fragilidades comparadas con el
grupo de pacientes.
Conclusiones: La alta
frecuencia de anomalías cromosómicas observada en
pacientes con melanoma puede ser un indicativo de heterogeneidad
genética y permite postular esas anomalías como posibles
marcadores de predisposición, desarrollo temprano y
progresión tumoral, lo que se deberá confirmar en
estudios posteriores. Asimismo, la alta frecuencia de fragilidades se
puede considerar como un indicador de inestabilidad genética que
facilite la progresión del melanoma maligno.
Caracterización molecular de los genes BRCA1 y BRCA2 en población colombiana con historia familiar de
cáncer de seno y/o de ovario
DianaTorres, Usman Rashid, Fabián Gil, Ángela Umaña, Giancarlo Ramelli, José Fernando Robledo,
Mauricio Tawil, Lilian Torregrosa, Ignacio Briceño, Ute Hamann
Pontificia
Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia. German Cancer Research
Center , Heidelberg, Alemania. Departamento de Cirugía,
Clínica del Country, Bogotá, Colombia
Objetivo: Determinar el
espectro de las mutaciones germinales en los genes BRCA1 y BRCA2 en
familias colombianas con cáncer de seno y/o de ovario
hereditario.
Metodología: Se
utilizaron tres técnicas de tamización inicial; SSCP
radioactivo, DHPLC y PTT, seguidas de secuenciación para
identificar las mutaciones en los genes BRCA1 y BRCA2. A las mutaciones
recurrentes se les realizó análisis de haplotipos.
Resultados: En 53 familias
analizadas se identificaron 8 mutaciones germinales deletéreas
en BRCA1, que fueron recurrentes en su totalidad. Con el
análisis de haplotipos de determinó un origen
común para las mutaciones 3450delCAAG y A1708E. Se identificaron
cinco mutaciones germinales deletéreas en BRCA2, de las cuales
dos fueron recurrentes. Mediante análisis de haplotipos se
determinó un origen común para la mutación
3034delACAA.
Discusión: En este
estudio se determinó la contribución de los genes BRCA1 y
BRCA2 al cáncer de seno y ovario de tipo here-ditario en
familias de Colombia. Se identificaron un total de 13 (24%) mutaciones
deletéreas, ocho en BRCA1 (15%) y cinco en BRCA2 (9%).
Conclusiones: La
proporción de mutaciones germinales positivas en la
población colombiana estudiada (24%) es superior a lo informado
en muchas otras poblaciones (5% - 10%). Estos hallazgos muestran que
los genes BRCA1 y BRCA2 están comprometidos en aproximadamente
la cuarta parte del cáncer de seno y/o de ovario familiar en la
población colombiana.
Descripción
clínico hematológica y seguimiento de 51 casos de
leucemia linfoide aguda Filadelfia positivos en el Instituto Nacional
de Cancerología
Vilma L. Medina, Gonzalo Guevara
Grupo de
Genética y Oncología Molecular, Bogotá.
Clínica de Hematología y Transplante de Médula
Ósea, Bogotá. Clínica de Pediatría,
Bogotá. Instituto Nacional de Cancerología, Bogotá, Colombia
Objetivo: Describir las
variables clínicas, hematológicas y supervivencia global
en una serie de casos nuevos de leucemia linfoide aguda Filadelfia
positivo (LLA Ph+) diagnosticados entre febrero 1992 y diciembre 2006.
Materiales y métodos: como parte del diagnóstico de las leucemias se envían
muestras de médula ósea al laboratorio de genética
para su evaluación cromosómica; se recibieron entre 2 y 4
ml de médula ósea anticoagulada con heparina que se
lavaron tres veces con solución salina normal. La muestra se
cultivó a 37°C en RPMI 1640 y se suplementó con 20%
de suero bovino fetal y antibiótico sin estímulo
mitogénico. Los cromosomas se obtuvieron de forma directa, a las
24, 48 y 72 horas, según métodos convencionales. Las
células obtenidas se extendieron sobre láminas y
tiñeron con una solución de quinacrina (0.5%) para
obtener bandas Q. Se evaluó un mínimo de 20 mitosis en un
microscopio Olympus Provis AX70 adaptado con una lámpara de
fluorescencia y se documentaron fotográficamente o digitalmente
con el programa BandView de Spectral Imagen. Los cariotipos se
registraron de acuerdo con el sistema internacional de nomenclatura
citogenética humana ISCN. Además, se construyó una
base de datos que incluyó las siguientes variables: edad, sexo,
fechas de diagnóstico, última consulta, muerte y
recaída, presencia de adenopatías, esplenomegalia,
hepatomegalia, compromiso del sistema nervioso central, tratamiento,
cuadro hemático y resultado citogenético. Los estudios de
supervivencia global se realizaron mediante Kaplan-Meier y para
comparar la supervivencia entre niños y adultos se
utilizó el estadístico de rango logarítmico.
Resultados: Entre febrero de
1992 y diciembre de 2006 se diagnosticaron 51 casos de LLA Ph+, 15
(29.4%) niños y 36 (70.6%) adultos. Las frecuencias de las
manifestaciones clínicas fueron: adenopatías 51%,
petequias 27.4%, hepatomegalia 31.3%, esplenomegalia 21.5%, compromiso
del SNC 15.6% y leucocitosis mayor de 50,000, 56.8%. Todos, excepto un
caso, mostraron la translocación clásica
t(9;22)(q34;q22), 36 como alteración única y 15 con
alteraciones adicionales entre las que hubo doble cromosoma Ph+ 5 casos
(9.8%), alteraciones del cromosoma 1, 2 casos (3.9%),
hiperdiploidía 3 casos (5.8%) y asociación con t(1;19) 2
casos (3.9%). Del total, 41 han fallecido (79%) mientras 2 (4%)
permanecen vivos y 9 (17%) perdidos. La supervivencia global se
describe en 39 casos que muestran un tiempo medio de morir de 118.5
días (3.95 meses) y sin diferencias significativas entre
niños y adultos.
Discusión. Los
hallazgos clinicopatológicos en este grupo de pacientes fueron
muy similares en frecuencia a los observados globalmente en las LLA;
sin embargo, la leucocitosis fue más frecuente en el grupo LLA
Ph+ y confirma su mal pronóstico, hubo predominio de los adultos
sobre los niños aunque no hay explicaciones para esta
diferencia. Como en otras series la supervivencia global
demostró el mal pronóstico sobre todo por recaídas
o resistencia al tratamiento, por esta razón internacionalmente
se sugiere trasplante de médula ósea como elección
aunque ninguno de estos pacientes la recibió. Doce
pacientes recibieron inhibidores de tirosina quinasa aunque su impacto
clínico no se ha demostrado.
Conclusión: En el
medio colombiano es poco conocida la epidemiología
genética de las leucemias. Este es el primer informe de
seguimiento y supervivencia en Colombia.
Detección de mutaciones en pacientes con riesgo hereditario de cáncer de mama y/u ovario del sur-occidente colombiano
Laura Cifuentes, Ana Lucía Rivera, Guillermo Barreto
Laboratorio de Genética Molecular Humana, Sección de Genética, Departamento de Biología, Universidad del Valle, Cali, Colombia
El cáncer de mama se
considera como una de las neoplasias con más alta incidencia a
nivel mundial. En Colombia, es la segunda neoplasia femenina más
frecuente después del cáncer de cuello uterino y para
Cali es la primera causa de muerte en mujeres entre los 15 y 54
años. Para casi todos los casos la aparición del
cáncer es de origen esporádico, pero cerca de 10% de las
mujeres afectadas presentan una historia familiar positiva que se
asocia con neoplasia en mamas y/o ovarios. En cuanto a esta
predisposición genética., el principal factor de riesgo
es la presencia de una mutación heredada en genes de
susceptibilidad como el gen BRCA1, que se asocia con casi todos los
casos de cáncer de mama y ovario familiar. En este gen se han
encontrado mutaciones específicas para cada población,
que sugieren la existencia de mutaciones fundadoras. Con
el objeto de identificar cuáles son las mutaciones más
frecuentes y cuáles son especificas para la población del
sur-occidente colombiano se tomaron muestras de sangre a 40 familias
con historia de cáncer mamario, se extrajo el ADN y se hizo el
barrido mutacional de todo el gen BRCA1. La detección de las
alteraciones de secuencia se realizó mediante PCR monoplex y
SSCP (polimorfismos conformacionales de cadena sencilla), y se
encontraron alteraciones de secuencia en el exon 3, exon 11, exon 16 y
exon 19, datos que permiten hacer un aporte al establecimiento de una
metodología rápida, sensible y eficiente para la
detección de variaciones de secuencia en el gen BRCA1.
Determinación de los polimorfismos I1307K y E1317Q del gen APC en tres grupos de población colombiana
Ana María Mora, Andrés Gutiérrez, Marina Ordóñez, Amparo Mora, Germán Junca, Antonio Ormaza,
Jorge Padrón, Alejandro Giraldo
Universidad
de los Andes, Bogotá. Fundación Gillow, Bogotá.
Instituto de Genética, Universidad de los Andes, Bogotá.
Universidad Nacional de Colombia, Bogotá. Clínica San
Pedro Claver, Bogotá.
Universidad del Rosario, Bogotá, Colombia
El cáncer colorrectal
es una causa importante de mortalidad en países occidentales, en
Colombia ocupa el quinto lugar. Aproximadamente 75% de todos los
cánceres colorrectales son esporádicos; la mayoría
de ellos se inician con una secuencia de mutaciones que comienzan en el
gen APC. Se ha observado que los polimorfismos I1307K y E1317Q se
pueden asociar con mayor riesgo de padecer cáncer colorrectal.
En Colombia no se dispone de estudios que informen sobre la presencia
de estas variantes poblacionales, que en el caso de existir,
condicionarían la implantación de medidas de control para
prevención y disminución de la morbimortalidad que se
asocia con el cáncer colorrectal. En el presente estudio se
determinó la proporción de las variantes I1307K y E1317Q
del gen APC y el riesgo de padecer cáncer colorrectal en tres
grupos de población colombiana: pacientes con cáncer
colorrectal (grupo afectado), adultos mayores de 75 años sin
antecedentes de cáncer colorrectal (grupo control) y en
individuos menores de 5 años (grupo de riesgo). En todos los
grupos se extrajo ADN a partir de sangre periférica. En los
grupos experimental y control se utilizó el método
salting out y en el grupo de riesgo el método FTA. Luego se
amplificó todo el ADN por medio de: ARMS-PCR. Las proporciones
para los polimorfismos I1307K y E1317Q, en todos los grupos, fueron
bajas (entre 0% y 1.7%) y no se halló correspondencia entre las
variantes y el riesgo de presentar cáncer colorrectal. Estos
resultados concuerdan con los informes en algunos estudios.
Diagnóstico y seguimiento de pacientes con leucemia mieloide crónica (LMC) y linfoide aguda (LLA) porcitogenética convencional (CC), D-FISH y RT-PCR
GC Ramírez-Gaviria, CA Aya-Bonilla, MA Diosa, JL Ramírez-Castro, G Vásquez-Palacio
Unidad de Genética Médica, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Objetivo: Describir los
hallazgos obtenidos por CC, D-FISH y RT-PCR, en el diagnóstico y
seguimiento de pacientes con LMC y LLA.
Metodología: Sangre
periférica o médula ósea de 23 pacientes con LMC y
LLA de novo, post-tratamiento con glivec y trasplantados, procedentes
de Medellín y otras ciudades.
Técnicas: CC, D-FISH y RT-PCR según protocolos estandarizados.
Resultados: Pacientes con
LMC (16.7%): cromosoma Ph(+): 62% con las 3 técnicas. 38%
sólo por RT-PCR. 1 paciente Ph(-) por CC y RT-PCR. En 44% de
todos los pacientes la CC reveló otras alteraciones
numéricas y/o estructurales. Pacientes post-tratamiento con
glivec: 25% Ph(+) con las 3 técnicas. 75% Ph(+) por FISH y
RT-PCR (b2a2). Dos pacientes tuvieron deleción 9q34 y Ph extra
con CC y FISH, respectivamente. Seguimiento postrasplante: 67%
transcriptos b2a2 y b3a2 por RT-PCR y negativos por FISH. 33% Ph(-) por
ambas técnicas. En LLA (7, 30%): 86% Ph(+) por RT-PCR más
no por FISH y CC. Aunque CC reveló aneuploidías. 14%
Ph(-) por FISH y RT-PCR o RT-PCR y CC. 1 paciente para segui-miento
reveló cariotipo complejo sin Ph (50, X, del (Xp), del (4p),
+21, +21, +22, + mar [28]) y RT-PCR mostró transcripto e1a2.
Discusión: Buen
porcentaje de relación entre los resultados de las tres
técnicas (62%). Las técnicas de CC y D-FISH son menos
sensibles que RT-PCR, sin embargo cobran importancia porque revelan
alteraciones cromosómicas adicionales que apoyan el
pronóstico de la leucemia.
Conclusión: El empleo
de técnicas de CC, D-FISH y RT-PCR, son un excelente complemento
para definir diagnóstico, pronóstico y seguimiento de los
pacientes con LMC y LLA.
Expansión clonal Ph(+) en relación al tratamiento con Glivecâ y al farmacogenotipo CYP3A4 en leucemia mieloide crónica
María Isabel Soto, Olga Lucía Zea, Juan Domingo Saavedra, Mauricio Camargo
Genética de Poblaciones y Mutacarcinogénesis, Sede de Investigación Universitaria,
Universidad de Antioquia, Medellín. Clínica Vida, Medellín, Colombia
Introducción: Glivec® es un inhibidor de la tirosina kinasa BCR-ABL, que ha
revolucionado el tratamiento de pacientes con leucemia mieloide
crónica positivos para cromosoma Philadelphia. A esta droga la
metaboliza principalmente la enzima CYP3A4, cuyo gen presenta
variaciones interindividuales tipo SNPs que pueden interferir con la
efectividad del tratamiento. De hecho, los polimorfismos CYP3A4*1B y
CYP3A4*2 han mostrado importante influencia en la actividad
metabólica de la proteína.
Objetivos: (a) Evaluar la
frecuencia de polimorfismos de importancia farmacogenética en el
gen CYP3A4 en una población de pacientes con leucemia mieloide
crónica (LMC) tratados con Glivec® y en una población
control de 170 personas. (b) Correlacionar el genotipo con la
evolución de la expansión clonal Ph(+).
Metodología: (a)
Genotipificación tipo PCR-RFLP para los SNPs CYP3A4*1B y
CYP3A4*2. (b) Bandeo replicativo tipo RBHG para la evaluación
citogenética de blastos espontáneos con o sin presencia
del marcador Ph(+).
Resultados: Los
análisis citogenéticos revelaron una correlación
directa entre el tiempo de tratamiento con Glivec® y el porcentaje
de reducción de blastos Ph(+). Las genotipificaciones
evidenciaron que la presencia del polimorfismo CYP3A4*1B no influye en
la respuesta citogenética de los pacientes Ph+ tratados con
Glivec®. Y que el polimorfismo CYP3A4*2 está ausente en esta
población colombiana de controles y pacientes.
Conclusiones: El
farmacogenotipo CYP3A4*2 no interfiere con la respuesta positiva al
Glivec que redujo la frecuencia de células Ph(+) en
relación directa con la duración del tratamiento.
Frecuencia
de las transcriptos BCR-ABL en pacientes con leucemia mieloide
crónica (LMC) y linfoide aguda (LLA-Ph+) procedentes de centros
hospitalarios de Medellín
Carlos Alberto Aya, Carlos Enrique Muskus, Francisco Cuéllar-Ambrossi, José Domingo Torres, Gonzalo Vásquez-Palacio
Universidad
de Antioquia, Medellín. Hospital Universitario San Vicente de
Paúl, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Introducción: La
translocación recíproca t(9;22)(q34;q11) comprende el
proto-oncogen ABL y el gen BCR, que origina un gen de fusión
BCR-ABL. Como resultado de esta translocación se pueden generar
tres proteínas de fusión: p190BCR-ABL, p210BCR-ABL y
p230BCR-ABL, codificadas por las fusiones génicas e1a2, b2a2 o
b3a2 y e19a2, respectivamente y se asocian con la LLA, LMC y LMC
neutrófila.
Objetivo: Determinar la
frecuencia de los transcriptos p190BCR-ABL y p210BCR-ABL en pacientes
con LMC y LLA, en diferentes fases de la enfermedad y tratamiento,
procedentes del HUSVP y de la Clínica León Xlll-ISS de
Medellín.
Metodología: El cADN
se sintetizó con el sistema Superscript First Strand Synthesis
kit con hexámeros aleatorios y Oligo dT, a partir de ARN total
purificado con trizol. Se realizó una PCR anidada con
oligonucleótidos específicos para detectar las fusiones
génicas p190BCR-ABL y p210BCR-ABL (Van Dongen et al., 1999).
Resultados: Se analizaron 38
muestras de sangre periférica; de ellas 63.16% (24/38) de los
pacientes presentaron LMC (15-78 años) y 36.84% (14/38) LLA-B
(5-77 años). Los transcriptos p210BCR-ABL, se detectaron en
91.7% (22/24) de pacientes con LMC y en 21.45% (3/14) con LLA. El
transcripto p190BCR-ABL se detectó en 14.3% (2/14) de los
pacientes con LLA. Además, se detectó la
coexpresión de p210BCR-ABL y p190BCR-ABL en un paciente con LMC
resistente a imatinib.
Conclusión: Los
transcriptos p210BCR-ABL, en la población con LMC, muestran una
incidencia similar a la ya descrita. En los pacien-tes con LLA, se
observó una mayor frecuencia de este transcripto, en lugar del
p190BCR-ABL. Además, se detectó co-expresión de
los transcriptos p190BCR-ABL y p210BCR-ABL en un caso con LMC, lo que
es de importancia en el seguimiento de la respuesta a la terapia.
Mapa genético del brazo corto del cromosoma 3 humano en muestras de cáncer esporádico de pulmón
Lina Marcela Barrera
Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Determinar la pérdida
de heterocigocidad (LOH) en el cromosoma 3p, en 13 muestras de
cáncer esporádico de pulmón (CP) mediante 17
microsatélites. De cada paciente se obtuvieron biopsias de CP y
4 ml de sangre periférica. El ADN genómico se
utilizó para una PCR con cada microsatélite. Los
productos amplificados se corrieron en geles de poliacrilamida y se
revelaron con nitrato de plata. La LOH se asignó por
comparación visual de las razones alélicas entre tejido
normal y tumoral del mismo paciente. El análisis
estadístico se hizo por comparación de proporciones y
prueba de Fisher. Todos los tumores fueron informativos para por lo
menos uno de los marcadores. LOH se encontró en uno o más
loci en 11 casos (84.6%). El marcador con mayor LOH fue UBE1L (23.1%),
seguido por D3S1317, D3S1300, D3S1284, D3S1274, D3S3049 y D3S1577 con
frecuencias de 15.4%. En tres casos hubo inestabilidad microsatelital.
En la región 3p24-25, se encontraron 3/16 LOH (18.8 %). Los
marcadores de la región 3p21-22 presentaron 5/43 pérdidas
alélicas (11.7%). En la región 3p13-14 se observaron 4/20
(20%) casos de LOH. Los cinco marcadores que comprenden la
región 3p12 mostraron el mayor número de LOH, 7/38
(18.5%). El presente estudio demuestra que hay regiones
cromosómicas con mayor frecuencia de LOH que posiblemente
contengan GST. Para localizarlos se pretende aumentar el número
de muestras y de marcadores y delimitar una región mínima
que permita identificar algún gen aun no descrito en CP.
Mutágenos en agua de consumo humano del departamento de Antioquia
Luz Yaneth Orozco, Margarita Zuleta
Instituto de Biología, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Casi todos los
mutágenos a los que se expone la población humana, son
componentes de mezclas complejas como agroquímicos, residuos
industriales, humo, alimentos proteicos fritos y asados y agua
contaminada, pueden contener, entre otros, hidrocarburos
policíclicos aromáticos, aminas heterocíclicas y
nitrosaminas, cuya mayoría ha mostrado potente actividad
mutacarcinogénica. La mayoría de los cánceres
humanos se asocian con la exposición constante a esos
mutágenos. Muchas de las aguas superficiales contaminadas con
mutágenos además de perjudicar los ecosistemas
acuáticos, abastecen plantas potabilizadoras de agua y por este
conducto, los mutágenos llegan a los domicilios en dosis
extremadamente bajas, pero en forma crónica. El agua
potabilizada también puede contener mutágenos directos
formados por la reacción del cloro con el material
orgánico contenido en ella. En investigaciones hechas en dos
plantas de tratamiento del departamento de Antioquia, se
encontró que los afluentes que surten esas plantas, por
atravesar zonas urbanas, rurales y agrícolas, reciben
mutágenos sobre todo de acción indirecta contenidos en
residuos domiciliarios, residuos de industria de carpintería y
pesticidas mutagénicos. Estos mutágenos llegan a las
plantas de potabilización y la mayoría no son eliminados
en el tratamiento de coagulación, por el contrario, el
tratamiento aumenta su potencial mutagénico. Debido a lo
anterior, los mutágenos que entran a la planta llegan hasta los
domicilios. Los embalses que surten las plantas de tratamiento
además de recibir mutágenos provenientes de los afluentes
que la surten, también reciben mutágenos provenientes de
escorrentías de zonas agrícolas, casas y gasolineras
cercanas
OGG1 Ser326Cys fectan la reparación del ADN en respuesta al daño genético inducido por ROS endógenos
Daniel Arango, Jessica Zapata, Pablo Patiño, Mauricio Camargo
Genética de Poblaciones y Mutacarcinogénesis.Inmunodeficiencias Primarias. Sede de Investigación Universitaria, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Los neutrófilos
activados liberan ROS que inducen daño genético en las
células vecinas. El objetivo de esta investigación fue
evaluar in vitro los efectos de polimorfismos en genes de la vía
de reparación BER, XRCC1 (Arg194Trp y Arg399Gln) y OGG1
(Ser326Cys), sobre el daño genético inducido por ROS
endógenos en linfocitos humanos. Para esto se co-cultivaron
neutrófilos activados y linfocitos homocigóticos para
cada polimorfismo, y se evaluó la reparación del ADN,
mediante el ensayo cometa. Los resultados muestran que el daño
genético fue significativamente menor en linfocitos OGG1
(Ser326Cys), respecto al genotipo silvestre. Sin embargo, la
introducción de la enzima formamidopirimidina glicosilasa (FPG)
al ensayo cometa, la cual reconoce daño oxidativo en el ADN,
mostró un aumento significante en los sitios sensibles a FPG en
linfocitos OGG1 (Ser326Cys); esto no ocurrió en las
células del genotipo «wild-type». Los mismos
experimentos se hicieron en linfocitos heterocigóticos para el
polimorfismo en OGG1 y no se encontraron diferencias significativas
respecto al genotipo silvestre. Por último, se evaluó la
muerte celular en linfocitos co-cultivados con neutrófilos
activados y no se encontró muerte celular en los genotipos
analizados. Los resultados obtenidos en este estudio permiten inferir
que el polimorfismo Ser326Cys en OGG1 altera la reparación del
ADN en respuesta a ROS producidos por los neutrófilos activados.
Además, la ausencia de muerte celular contribuye a que el
daño genético no reparado o reparado ineficientemente
pueda fijarse y persistir durante varias divisiones celulares, lo que
contribuiría a la exacerbación de procesos
patológicos como la carcinogénesis.
Polimorfismos
en el gen de reparación XRCC1 y su asociación con
cáncer de pulmón en una población del Cauca
Nohelia Cajas, Luis Alfonso Ruiz, Hernán Sierra
Universidad del Cauca, Popayán, Colombia
Objetivos: Determinar si los
polimorfismos en el gen de reparación XRCC1 (codones 194 y 399),
están comprometidos en la susceptibilidad para desarrollar
cáncer pulmonar en una población caucana. Establecer si
los polimorfismos en XRCC1 modulan la frecuencia de alteraciones
cromosómicas (AC).
Metodología: Se
realizó un estudio piloto caso-control con 43 pacientes
diagnosticados con carcinoma pulmonar primario y 49 controles. Los
polimorfismos se evaluaron con PCR y RFLP. Para evaluar el daño
genotóxico se empleó el biomarcador de AC.
Resultados: El porcentaje de
hombres y mujeres fue 72% y 28% en los pacientes y 61% y 39% en los
controles. La frecuencia de homocigotos mutantes para XRCC1 en los
codones 194 y 399, fue 6% y 12% en el grupo control y 0% y 7% en los
casos. Los pacientes con cáncer presentaron una diferencia
significativa de AC (12.00±1.14) comparado con el grupo control
(5.65±0.71).
Discusión: Además, del consumo de cigarrillo, la exposición
crónica al humo de leña es otro factor de riesgo para el
cáncer de pulmón en el Cauca. Según
análisis estadísticos en la población de estudio,
no se encontró asociación entre polimorfismos de XRCC1 y
el riesgo para cáncer pulmonar, ni los diferentes genotipos
parecen modular la frecuencia de AC.
Conclusión: El gen
XRCC1 no parece ser un factor de riesgo de cáncer de
pulmón en la población estudiada. El humo de leña
aunque no fue significativo con el desarrollo de cáncer de
pulmón, puede ser importante en el desarrollo de cáncer a
nivel rural en personas no fumadoras.
Polimorfismos genéticos de las enzimas metabólicas GSTT1, GSTM1, CYP2E1 y MTHFR en un grupo de niños con leucemia linfoide aguda y su relación con la enfermedad
María Paula Sánchez, Gloria Inés Uribe, Helena Groot
Laboratorio
de Genética Humana, Universidad de los Andes, Bogotá.
Hospital de la Misericordia Bogotá, Colombia
Con el fin de determinar la
frecuencia de los polimorfismos genéticos C677T y A1298C de la
enzima MTHFR en una población de niños con leucemia
linfoblástica aguda (LLA) y un grupo de niños sin
enfermedad hematológica maligna, diagnosticados en el Hospital
de la Misericordia en la ciudad de Bogotá, se estableció
por medio de análisis estadísticos si existía una
asociación entre los polimorfismos de la enzima MTHFR y los de
las enzimas metabólicas GSTT1, GSTM1 y CYP2E1, así como
con diferentes factores ambientales -edad, género, procedencia
del menor, exposición a sustancias químicas,
cercanía a fábricas, exposición al humo del
cigarrillo, consumo de alcohol, problemas emocionales y antecedentes de
cáncer, entre otros -con la presencia de la LLA en niños.
Para ello, se genotipificaron y analizaron muestras de la
población de estudio de pacientes (n = 147) y controles (n =
160), en la que se determinó la frecuencia de los polimorfismos
genéticos C677T y A1298C de la enzima MTHFR. Se encontró
que no existe una asociación significativa entre los
polimorfismos de las enzimas GSTT1 [OR = 0.91; (0.50-1.66)], CYP2E1 [OR
= 1.43; 0.88-2.32)] y MTHFR C677T [OR = 0.69; (0.44-1.10)] –
A1298C [OR = 1.13, (0.60-2.13)] con la LLA. Se determinó que
existe asociación significativa entre el polimorfismo de la
enzima GSTM1 [OR = 2.39; (1.44-3.96)]*, la interacción de esta
enzima con algunos factores ambientales como la exposición al
humo del cigarrillo y la cercanía a fábricas que emiten
contaminantes de diferentes tipos y la presencia de la LLA en
niños.
Potencial
mutagénico y genotóxico e identificación de
mutágenos en afluentes de dos plantas de tratamiento
Ary Paruma, José Oñate, Héctor Cárdenas, Iván Meléndez, Margarita Zuleta
Laboratorio de Mutagénesis, Instituto de Biología, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Se investigó la
mutagenicidad y genotoxicidad de los dos afluentes más
importantes para dos plantas de potabilización. Estos afluentes
reciben aguas negras de domicilios, restaurantes de carnes fritas y
asadas, carpinterías y agroquímicos. La mutagenicidad se
evaluó usando el test de Ames con cepas TA98 y TA100 en
presencia y ausencia de la mezcla S9 para activación
metabólica. El análisis genotóxico se hizo con
linfocitos humanos en el ensayo cometa. Se analizaron cuatro sitios de
muestreo: afluente A y afluente B 500 m antes de desembocar en la
represa la Fe que abastece las dos plantas de tratamiento, Agua cruda
al entrar a la planta Y y agua cruda al entrar a la planta R. Los
resultados de mutagenicidad y genotoxicidad mostraron dosis respuesta
para los cuatro sitios. La mayoría de la mutagenicidad de los
cuatro sitios fue de acción indirecta y por pérdida o
ganancia de bases, esto indica que todas las muestras pueden estar
cargadas de mutágenos con estas características como:
aminas heterocíclicas e hidrocarburos policíclicos
aromáticos, compuestos abundantes en las aguas negras y ftalatos
presentes en los residuos de carpintería. La mayor mutagenicidad
y genotoxicidad se encontró en el afluente A, esto puede deberse
a que estas aguas no tienen ningún tratamiento en cambio en el
afluente B sus aguas son tratadas en una planta biológica antes
de usarlas para abastecer las plantas Y y R, aunque este tratamiento no
es por completo eficiente para extraer todos los mutágenos. Con
GC/MS se han identificado varios mutágenos como: benzo(a) pireno
y dy-butil ftalato
Prevalencia
de los genes CAG-A, ICE-A y VAC-A en pacientes con Helicobacter pylori
asociados con cáncer gástrico en el Cauca
Claudia Patricia Acosta, Sulma Muñoz, Carlos Hernán Sierra
Grupo de Investigación en Genética Humana Aplicada, Laboratorio de Genética Humana, Departamento de Ciencias Fisiológicas, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad del Cauca, Popayán, Colombia
Introducción: Se
reconoce el Helicobacter pylori como un agente etiológico de
distintas enfermedades gástricas y varios genotipos bacterianos
se han relacionado con el desarrollo de cáncer gástrico
CG.
Objetivos: Determinar la
prevalencia de los genotipos Cag-A, Vac-A, e Ice-A1 en una
población caucana, y establecer las características
sociodemográficas relacionadas con el CG.
Metodología: Se
tipificaron un total de 109 casos con diagnóstico confirmado de
CG. Los procedimientos a seguir fueron: 1. Consentimiento voluntario,
2. Aplicación de un cuestionario estructurado para obtener
información sociodemográfica, 3. Extracción de ADN
bacteriano a partir de biopsias, 4. Amplificación por PCR de los
genes marcadores de virulencia, y 5. Análisis estadístico
con el software SPSS para Windows.
Resultados: La edad promedio
de los casos fue 64.48±12.07, en su mayoría del sexo
masculino (64%), procedentes de zonas rurales (53%) y con un nivel
educativo £ a primaria (96%). Los genotipos Cag-A+, Vac-A s1-m1,
e Ice-A1+ fueron los más frecuentes en la población
analizada. Los subtipos Vac-A s1 y m1 se encontraron en 94 (86%) y 88
(82%) casos, respectivamente. En 62% fueron Cag-A+ y 78% eran Ice-A1+.
Conclusión: Se
logró identificar el tipo y la virulencia de las cepas de H.
pylori relacionadas con CG en una población del Cauca. Los
resultados sugieren que en esta población los genes vacA, cagA,
iceA se podrían usar como biomarcadores de mayor riesgo para CG.
XRCC1, APE1 y su asociación con cáncer gástrico en una población del Cauca, Colombia
Nadia Maca, Lorena Urbano, Hernán Sierra
Grupo de Investigación en Genética Humana Aplicada, Laboratorio de Genética Humana, Departamento de Ciencias Fisiológicas, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad del Cauca, Popayán, Colombia
Introducción: El
cáncer gástrico (CG) es un problema de salud a nivel
mundial. En el departamento del Cauca el CG es la tercera causa de
muerte por cáncer. Existen factores ambientales y
genéticos asociados con esta enfermedad. La capacidad de
reparación se ha sugerido como un factor de riesgo para muchos
tipos de cáncer.
Objetivo: Establecer la
asociación entre los polimorfismos genéticos XRCC1 y APE1
con CG en una población caucana.
Metodología: Se
incluyeron 97 casos con CG confirmado y 98 controles sin antecedentes
de enfermedad gastrointestinal, pareados por sexo y edad Los
procedimientos fueron: 1. Consentimiento voluntario, 2.
Colección de muestras para extracción de ADN, 3.
Caracterización de polimorfismos genéticos mediante PCR.
4. Análisis estadístico para determinar
interacción y riesgo con el software SPSS para Windows.
Resultados: La edad promedio
de los casos fue 63 (± 5 años) años, con mayor
frecuencia en hombres. El análisis de los polimorfismos
genéticos APE1 Asp148Glu, XRCC1 Arg194Trp y XRCC1 Arg399Gln, no
ofrece diferencia significativa en la población. Sin embargo, el
análisis de riesgo asociado con CG para el genotipo homocigoto
Gln/Gln de XRCC1 Arg399Gln muestra un OR = 2.8 (IC 95% = 1.11-7.00).
Conclusión: La
presencia de la variante homocigota (Gln/Gln) del polimorfismo XRCC1
Arg399Gln aumenta significativamente el riesgo de desarrollar CG en la
población caucana. Los resultados sugieren que esta variante se
podría establecer como un marcador molecular de riesgo
importante en la población del Cauca.
Detección de aneuploidias del cromosoma 17 y deleción del gen TP53 en tumores gastrointestinales por FISH-bicolor
Gloria Cecilia Ramírez, Juan Carlos Herrera, Luis Fernando Isaza, Gonzalo Vásquez, Carlos Mario Muñetón
Unidad de
Genética Médica, y Departamento de Cirugía,
Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín.
Hospital Universitario San Vicente de Paúl, Medellín,
Colombia
Objetivo: Evaluar las
aneuploidias del cromosoma 17 y deleciones del gen TP53 en 14 muestras
de tumores gastrointestinales primarios, mediante la técnica de
FISH bi-color.
Muestras y métodos: Se analizaron 14 muestras de tumores gastrointestinales (6 de
estómago, 6 de colon, 1 de recto y 1 de duodeno), que se
disociaron mecánica y enzimáticamente con colagenasa para
obtener núcleos interfásicos. El FISH bi-color se
realizó con sondas marcadas con fluorocromos
simultáneamente para el centrómero del cromosoma 17 y
para el locus del gen TP53. Se analizó un promedio de 100
núcleos por cada muestra.
Resultados: Se encontraron
aneuploidias para el cromosoma 17 en 43 % (6/14) de las muestras; la
monosomía se detectó en 100% (6/6) de los casos con
desequilibrio cromosómico. En todas las muestras se observaron
subpoblaciones de núcleos con clones heterogéneos
(mosómicos, disómicos, trisómicos y
tetrasómicos). En 93% (13/14) de los tumores había
deleción del gen TP53. El estudio histopatológico
mostró que todas las muestras presentaban un estado avanzado de
cáncer.
Conclusiones: Se
identificó un desquilibrio entre las señales del
centrómero del cromosoma 17 y del gen TP53 por núcleo,
por medio de la técnica FISH bi-color. La deleción del
gen TP53 fue la alteración más notoria en los tumores
gastrointestinales. Se confirma que la pérdida de este gen es
clave para la génesis del cáncer. Asimismo, las
aneuploidias del cromosoma 17 fueron muy frecuentes. Con el
método FISH bi-color es posible detectar la heterogeneidad
genética intratumoral que ocurre durante el desarrollo de los
tumores.
Detección molecular del gen BCR/ABL por RT-PCR en niños costarricenses con leucemia
Juan Carrillo, Mario Chaves, Rafael Jiménez, Mario Vargas, Liliana Campos, Ana de la Guardia,
Gerardo Jiménez-Arce
Centro de
Investigación en Hematología y Trastornos Afines,
Universidad de Costa Rica, San José. Servicio de
Hematología, Laboratorio de Investigación, Hospital
Nacional de Niños, San José, Costa Rica
Muchas leucemias
pueden presentar translocaciones cromosómicas, que, de acuerdo
con los transcriptos formados por los genes comprometidos,
originará un fenotipo leucémico variable. En este trabajo
se muestran los primeros resultados de pacientes pediátricos con
leucemia, a quienes se les hizo el estudio molecular por RT-PCR y el
genotipaje para el gen BCR/ABL producto de la t(9;22)(q34;q11). De las
55 muestras estudiadas, 6 (10.9%) fueron positivas para el transcripto
mencionado. De las 6 positivas, 2 (3.63%) de esos pacientes
tenían LLA y 4 (7.27%) eran LMC. La introducción de esta
metodología en el manejo rutinario de los niños con
leucemia, servirá para establecer un diagnóstico
más preciso, un pronóstico más certero y un
seguimiento adecuado de la enfermedad mínima residual.
Técnica del cometa para identificar daño en el ADN de linfocitos humanos inducido in vitro por
Roundup® (glifosato)
Luz Stella Hoyos, Silvio Marino Carvajal, Diana Muñoz
Grupo de
Investigación en Toxicología Genética y
Citogenética, Departamento de Biología, Facultad de
Ciencias Naturales, Exactas y de la Educación, Universidad del
Cauca, Popayán, Colombia
Objetivo: Evaluar la
citotoxicidad e identificar el daño en el ADN de linfocitos
humanos inducido in vitro por Roundup®.
Metodología: La
citotoxicidad aguda se identificó mediante viabilidad celular
con azul de tripano al 0.4% y la genotoxicidad con la prueba del cometa
en condiciones alcalinas. Las muestras de sangre obtenidas de una
persona saludable, no fumadora. Linfocitos aislados cultivados por 24
horas. Se establecieron dos cultivos/tratamiento y cinco
repeticiones/prueba. El tratamiento con Roundup® se realizó
con diez diferentes concentraciones, por cuatro horas, para la prueba
de citotoxicidad aguda. Para la prueba del cometa, el tratamiento se
realizó por una hora con tres diferentes concentraciones
experimentales de Roundup®, el cultivo control-positivo fue tratado
con H2O2 40 µM y el control-negativo con H2O miliQ. No se
empleó activación metabólica. Luego de establecer
un efecto dosis-dependiente por el porcentaje de viabilidad celular
(citotoxicidad) se seleccionaron tres dosis experimentales 0.00091,
0.00127, 0.00178 µg/ml. de Roundup® para la técnica
del cometa, que permitieron una viabilidad celular 75%. Para esta
prueba, luego del tratamiento, se evaluó la viabilidad celular
(75%) antes de someter las preparaciones a lisis celular,
desnaturalización, electroforesis, neutralización y
coloración con bromuro de etidio. 50
células/tratamiento/repetición se seleccionaron al azar
con microscopio de fluorescencia para el registro fotográfico.
Los cometas se midieron con un analizador de imágenes (software
CASP). Para la prueba cometa, se identificó la mediana del
registro de 50 células por cada repetición, y asumiendo
destribución normal/teorema del límite central), se
compararon los promedios de las diferentes concentraciones mediante
análisis de varianza.
Resultados: Mediante
análisis de correlación de Pearson, se identificó
asociación lineal negativa (R = -0,986; p = 0.000) entre las
concentraciones de Roundup® y la viabilidad celular
(relación negativa dosis-efecto). A medida que la
concentración del Roundup® se incrementa en el rango 0.000 a
0.005 µg/ml, la viabilidad celular decrece de un promedio de
97.15±0.95% a un promedio de 3.08±0.97%. Mediante
análisis de varianza del promedio de las medianas y prueba de
comparaciones múltiples de Duncan, se identificó que las
longitudes de cola 96.60±23.93 y 62.10±9.39,
correspondientes a las concentraciones 0.00178 y 0.00127 µg/ml
respectivamente, fueron las más altas y distintas
significativamente (p<0.05) de los valores registrados para las
concentraciones 0.00091 y 0.00000 µg/ml con valores de
33.00±4.77 y 11.60±1.99, respectivamente. El promedio
26.50±15.32 de momento de cola, correspondiente a la
concentración 0.00178 µg/ml es el mas alto y difiere
significativamente (p<0.05), de los promedios registrados para las
concentraciones más bajas.
Conclusión: El
Roundup® en las condiciones experimentales del estudio induce
citotoxicidad y daño genético en linfocitos humanos
aislados.
Daño
genético o apoptótico inducido in vitro por el
tíner (mezcla de solventes orgánicos) en linfocitos
humanos de sangre periférica, evaluado a través del
método cometa alcalino
Víctor Fernando Hidalgo, Elizabeth Londoño, Luz Stella Hoyos, Silvio Marino Carvajal
Grupo de
Investigación en Toxicología Genética y
Citogenética, Departamento de Biología, Facultad de
Ciencias Naturales Exactas y de la Educación, Universidad del
Cauca, Popayán, Colombia
Objetivo: Evaluar el
daño genético o apoptótico inducido in vitro por
el tíner (tolueno, xileno, etilbenceno, hexano, entre otros) en
linfocitos humanos.
Metodología: Se
determinó la citotoxicidad aguda (85%) mediante análisis
de viabilidad con azul de tripano, después de 4 h de tratamiento
con tíner a concentraciones de 0.025 a 1.200 µl/ml. Se
establecieron cultivos de linfocitos, que se trataron (1 h) con
tíner a concentraciones de 0.05, 0.10 y 0.20 µl/ml.
Después se realizó la prueba cometa (pH>13), antes y
después de un período de recuperación
líquida (4 h), para identificar si el daño
genético observado en la prueba cometa es reparable o se debe a
una fragmentación nuclear apoptótica.
Resultados: La prueba de
citotoxicidad, mostró una reducción dosis-dependiente
significativa (p<0.001) en la viabilidad celular. La prueba cometa,
antes del período de recuperación, evidenció un
incremento significativo (p<0.001) del daño genético
observado en cultivos tratados con tíner y H2O2 (control
positivo), con respecto al DMSO (control negativo). Después del
período de recuperación, se evidenció una
reducción significativa (p<0.05) del daño, por efecto
de la reparación de lesiones primarias.
Discusión: El
daño genético inducido por el tíner es reparable,
por consiguiente, la migración del ADN de los núcleos
después de la electroforesis, es el resultado de un daño
genotóxico, expresado como quiebres de cadena en el ADN.
Conclusión: Los
componentes del tíner inducen citotoxicidad y daño
genético en linfocitos humanos bajo las condiciones dadas en
este estudio. Lo que alerta sobre el riesgo de desarrollar problemas de
salud como el cáncer, en poblaciones humanas expuestas por sus
ocupaciones al tíner.
Aberraciones cromosómicas en individuos expuestos por el trabajo a la gasolina en estaciones de servicio
del área urbana de Tunja, Boyacá
Mabel Adriana Grismaldo, Flor Marina Cruz, Germán Cortina
Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia, Tunja
Se realizó un
monitoreo en la población con el objetivo de evaluar el efecto
genotóxico de la gasolina en 18 individuos expuestos por el
trabajo, mediante la prueba de aberraciones cromosómicas. Se
determinó la frecuencia de células aberrantes,
aberraciones cromosómicas, quiebres cromatídicos y
quiebres cromosómicos en 1800 células de individuos
expuestos con respecto a 1800 células del grupo control. No se
encontraron diferencias estadísticamente significativas (nivel
de confianza de 95%) entre los dos grupos para el porcentaje de
células aberrantes y aberraciones cromosómicas.
Igualmente, se evaluó la relación entre las variables
edad y tiempo de exposición laboral y los mismos
parámetros, no se encontró relación
estadísticamente significativa. Estos resultados pueden indicar
que la población estudiada quizá está expuesta a
bajas concentraciones de sustancias clastogénicas como el
benceno, de acuerdo con esto se recomienda realizar monitoreos de tipo
ambiental y biológico que desmientan o afirmen esta
suposición. Los resultados también pueden indicar que los
mecanismos de reparación de ADN en el grupo expuesto funcionan
correctamente; sin embargo, se sugiere hacer un seguimiento a los
participantes del estudio para observar si hay variación en las
frecuencias de aberraciones cromosómicas.
Caracterización de células stem mesenquimales de médula ósea humana
Lida Osmarla Quintero, Orlando Chaparro
Facultad de Medicina, Universidad Nacional de Colombia, Bogotá, Colombia
En los últimos
años las células stem han generado grandes expectativas
como alternativa terapéutica en el tratamiento de
múlti-ples enfermedades. Se ha presentado la posibilidad de
obtener célu-las stem de tejidos adultos. Aunque estos tipos de
células son deriva-dos del mesodermo se informó que las
células stem mesenquimales, pueden llegar a diferenciarse en
tejidos no mesodérmicos como el neuronal y el hepático.
Además, uno de los mecanismos por los cuales las MSCs
podrían ejercer su acción terapéutica es el efecto
paracrino que presentan a través de secreción de
citoquinas y facto-res de crecimiento celular. El objetivo principal
del presente trabajo es caracterizar las células stem
mesenquimales obtenidas de médula ósea humana. Las
muestras de médula ósea se obtuvieron de donan-tes sanos
voluntarios previo consentimiento informado. La caracterización
de la población celular obtenida se hizo al analizar la
morfología celular y la presencia de marcadores de membrana
espe-cíficos por citometría de flujo para diferenciar las
MSCs (CD45, CD34, CD105, CD90, HLA I y HLA DR). Se evaluó el
potencial de diferenciación para diferenciación
osteogénica y adipogénica. También se
analizó la expresión de genes de citoquinas y factores de
crecimiento. El análisis por citometría de flujo y por
RT-PCR mostró una población celular con
características de MSCs, CD34-, CD105+. Los ensayos de
diferenciación confirmaron la naturaleza de células stem,
capaces de diferenciarse de los linajes osteogénico y
adipogénico. Las MSCs expresaron FGF- y HIF1, Ang-1 y TGF-1
importantes para madurar los vasos sanguíneos y genes que
inducen la expresión de actores proangiogénicos como IL
6. Este trabajo proporciona una herramienta para otros estudios de
diferen-ciación, crecimiento, metabolismo y fisiología de
las MSCs importantes en el desarrollo de ensayos clínicos, pues
las expectativas del beneficio terapéutico que brindan las MSCs
son muy amplias.
Análisis de ADN arcaico en restos del período Herrera en el occidente de Bogotá
Alejandro Silva, Victoria Villegas, Diana Torres, Ignacio Briceño, Alberto Gómez, Jaime E. Bernal,
Javier Burgos
Instituto
de Genética Humana, Pontificia Universidad Javeriana,
Bogotá. Facultad de Medicina, Universidad de La Sabana,
Chía. Universidad Nacional, Bogotá, Colombia
Objetivos: Caracterizar desde
el punto de vista molecular una muestra de restos óseos del
período Herrera con base en la secuencia del segmento
hipervariable I (HSVI) de la región control del ADN mitocondrial.
Metodología: Se
emplearon fragmentos óseos de 11 individuos provenientes del
yacimiento arqueológico denominado «Madrid 2-41»,
que corresponde al período arqueológico Herrera. Se
tuvieron en cuenta las precauciones referidas en trabajos previos con
ADN arcaico.
Resultados: Se
amplificó el ADN obtenido y se obtuvieron las secuencias HSVI.
En todos los individuos se encontró la misma secuencia
perteneciente al haplogrupo B Con base en estas secuencias se
establecieron árboles filogenéticos y redes de parentesco
entre éssta y otras poblaciones amerindias.
Discusión: Aunque el
haplogrupo A es el haplotipo más común en las poblaciones
chibchas, también se encontró en éstas el
haplogrupo B. Es posible que en los casos informados en el presente
estudio se trate de un grupo familiar homogéneo.
Conclusiones: Es necesario
continuar con el análisis de otros individuos del altiplano
cundiboyacense, e incluir otros períodos, para esclarecer la
filiación de los diferentes grupos de inmigrantes amerindios.
Comparación citogenética de seis muestras de tejido molar y linfocitos paternos utilizando bandas C
C Crane, A Bermúdez
Instituto Nacional de Salud, Bogotá, Colombia
Objetivo: Determinar la
correlación existente con bandeo C de 6 muestras de tejido molar
remitidas al laboratorio con las muestras de sangre de los progenitores
del caso correspondiente de mola.
Metodología: Se
realizaron los cultivos primarios del tejido molar en botellas falcon
de 25 ml. Se hicieron los subcultivos necesarios para reobtener el
cariotipo. A las muestras de sangre de los padres, se les hizo cultivo
de linfocitos de alta resolución. A las láminas obtenidas
de los tejidos y a las muestras de sangre se les efectuaron bandas C.
Resultados: Se estudiaron de cada una de las muestras 22 metafases.
Tejidos: Cultivos 1 y 3: No
se encontró ningún hallazgo. En el 2 se encontraron una
poliploidia y una endorreduplicación, en el 4 una célula
9h+ y otra con1h+, en la muestra 5, 2 células 9h+, 1
célula 1h+ y 1 poliploidia. El cultivo 6 presentó una
célula 9h+.
Linfocitos: En las muestras
masculinas de los casos 1, 2 y 6 hubo 3, 5 y 2 células con 9h+,
la muestra 2 mostró además una célula con 9h+,
9h+, otra con 9h+ y fra 18qter, y otra con 9h+ y fra 4pter. La muestra
5 dio 1 célula con rup 16qter. Las muestras 2, 3, 5 y 6 de las
mujeres, presentaron 2, 1, 2 y 2 células con 9h+
respectivamente, y la muestra 2 además una célula con fra
en 6pter y otra con rup 1q31.
Discusión: La
endorreduplicación y la poliploidia, son anomalías
usuales en mola, pero la frecuencia hallada es baja. Una posible
explicación es que no se hizo selección clonal,
produciéndose un efecto de dilución de las líneas
celulares de la mola. Las demás anomalías encontradas
tanto en tejido como en linfocitos, pueden ocurrir en la
población general, como marcadores polimórficos. No hubo
marcadores citogenéticos que permitieran correlacionar la mola
con el origen parental. Para el asesoramiento genético, conocer
el origen parental de la mola es definitivo, por eso, se plantea la
importancia de hacer estudios con marcadores STR.
Conclusiones: La
utilización de las técnicas citogenéticas en casos
de mola, no es definitiva para identificar el origen parental, por
tanto se deben complementar con técnicas que permitan definir
polimorfismos más informativos, por ejemplo: marcadores de ADN.
Condiciones
óptimas de cultivo de linfocitos y análisis parcial del
cariotipo de la tortuga cabezona, Caretta caretta (Testudines:
Cheloniidae) en Santa Marta, Caribe colombiano
Elli Ann López, Javier Hernández-Fernández, Jaime Bernal-Villegas
Universidad
Jorge Tadeo Lozano, Bogotá. Universidad Jorge Tadeo Lozano,
Bogotá. Director, Instituto de Genética,
Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia
En los últimos
años se ha registrado una disminución importante en el
número de individuos de la tortuga marina Caretta caretta
especie que anida en el Caribe colombiano. Tal hecho pone en evidencia
la posibilidad de su extinción a mediano plazo. Por esto, es
necesario ejecutar planes para su manejo y conservación. En este
estudio se determinaron los requisitos del cultivo de linfocitos de C.
caretta para obtener cariotipos que permitan la identificación
citogenética, el estudio inmunológico y
toxicológico de los individuos sin necesidad de sacrificarlos.
De 47 ejemplares de C. caretta de Santa Marta, Colombia, se obtuvo
sangre periférica para ensayar diversas variables hasta obtener
las condiciones óptimas para el cultivo convencional de
linfocitos. El cariotipo obtenido presentó 56 cromosomas: 32
macrocromosomas y 24 microcromosomas. El ideograma mostró que C.
caretta tiene cuatro grupos de cromosomas: el grupo A, compuesto por
doce (12) pares de cromosomas de mayor tamaño. El Grupo B, con
cuatro (4) pares de cromosomas medianos y pequeños y el Grupo C
conformado por 12 pares de microcromosomas. No se observaron cromosomas
sexuales. Estos resultados no coinciden con el cariotipo descrito por
Kamesaki (1989), debido quizá a que las muestras que
analizó ese autor se colectaron en el Océano Pacifico
(Japón). El presente estudio es el primero realizado con
tortugas del Océano Atlántico que cuenta con la
descripción completa de la morfología cromosómica.
Es posible, que una de las estrategias adaptativas de esta especie sea
el intercambio genético con otras especies de la familia, que
produce individuos híbridos viables. En este aspecto se ha
descrito la hibridación de tortugas C. caretta con Eretmochelys
imbricata, Chelonia mydas y Lepidochelys kempii; esto sugiere la
posibilidad que los individuos caracterizados en este estudio sean
híbridos viables de C. caretta, por tanto, son necesarios
estudios a nivel molecular.
Detección de aneuploidias del cromosoma 17 y deleción del gen TP53 en tumores gastrointestinales por fish-bicolor
Gloria Cecilia Ramírez, Juan Carlos Herrera, Luis Fernando Isaza, Gonzalo Vásquez, Carlos Mario Muñetón
Unidad de
Genética Médica, Facultad de Medicina, Universidad de
Antioquia, Medellín. Departamento de Cirugía, Facultad de
Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Objetivo: Evaluar las
aneuploidas del cromosoma 17 y deleciones del gen TP53 en 14 muestras
de tumores gastrointestinales primarios, mediante la técnica del
FISH bi-color.
Muestras y métodos: Se analizaron 14 muestras de tumores gastrointestinales (6 de estomago,
1 de duodeno, 6 de colon, y 1 de recto), que se disociaron
mecánica y enzimáticamente con colagenasa para obtener
núcleos interfásicos. El FISH bi-color se realizó
con sondas marcadas con fluorocromos simultáneamente para el
centrómero del cromosoma 17 y para el locus del gen TP53. Se
analizaron en promedio 100 núcleos por cada muestra.
Resultados: Se
encontró aneuploidias para el cromosoma 17 en 43% (6/14) de las
muestras; la monosomia se detectó en 100% (6/6) de los casos con
desequilibrio cromosómico. En todas las muestras se observaron
subpoblaciones de núcleos con clones heterogéneos
(monosómicos, disómicos, trisómicos y
tetrasómicos). Además, 93% (13/14) de los tumores
tenían deleción del gen TP53. El estudio
histopatológico mostró que todas las muestras presentaban
un cáncer avanzado.
Conclusiones: Se
identificó un desequilibrio entre las señales del
centrómero del cromosoma 17 y del gen TP53 por núcleo,
mediante el FISH bi-color. La deleción del gen TP53 fue la
alteración predominante en los tumores gastrointestinales. Se
confirma que la pérdida de este gen es clave para la
génesis del cáncer. Asimismo, las aneuploidias del
cromosoma 17 fueron muy frecuentes. Con el FISH bi-color es posible
detectar la heterogeneidad genética intratumoral que ocurre
durante el desarrollo de las neoplasias.
Detección molecular del gen BCR/ABL por RT-PCR en niños costarricenses con leucemia
Juan Carrillo, Mario Cháves, Rafael Jiménez, Mario Vargas, Liliana Campos, Ana de la Guardia,
Gerardo Jiménez-Arce
Centro de
Investigación en Hematología y Trastornos Afines
(CIHATA), Universidad de Costa Rica,San José. Servicio de
Hematología, Hospital Nacional de Niños, San José.
Laboratorio de Investigación, Hospital Nacional de Niños,
San José. Laboratorio de Hematología, Hospital Nacional
de Niños, San José. Costa Rica
Muchas leucemias pueden
presentar translocaciones cromosómicas, que, de acuerdo con los
transcriptos formados por los genes comprometidos, originará un
fenotipo leucémico variable. En este trabajo se muestran los
primeros resultados de pacientes pediátricos con leucemia, a
quienes se les hizo el estudio molecular por RT-PCR y el genotipaje
para el gen BCR/ABL producto de la t(9;22)(q34;q11). De las 55 muestras
estudiadas, 6 (10.9%) fueron positivas para el transcripto mencionado.
De las 6 positivas, 2 (3.6%) de esos pacientes tenían LLA y 4
(7.3%) eran LMC. La introducción de esta metodología en
el manejo rutinario de los niños con leucemia, servirá
para establecer un diagnóstico más preciso, un
pronóstico más certero y un seguimiento adecuado de la
enfermedad mínima residual.
Determinación
de la estructura genética en un grupo poblacional muisca
mediante el análisis de polimorfismos en el ADN mitocondrial
(ADNmt)
Patricia Jara, Victoria Villegas, Diana Torres, Enrique Bautista, Jaime E. Bernal, Alberto Gómez,
Ignacio Briceño
Instituto
de Genética Humana, Pontificia Universidad Javeriana,
Bogotá. Facultad de Medicina, Universidad de La Sabana,
Chía. Departamento de Proyectos Especiales, Universidad Central,
Bogotá, Colombia
Objetivos: Estudiar la
estructura genética de un grupo poblacional prehispánico
muisca ubicado en el sector de Candelaria La Nueva, mediante el
análisis de polimorfismos del ADNmt extraído a partir de
muestras óseas antiguas.
Metodología: Se
seleccionaron restos óseos de 16 individuos diferentes y en
ellos se determinó la presencia de los 4 haplogrupos fundadores
amerindios presentes en el ADNmt por medio de análisis de
restricción, validados por diversos criterios de autenticidad y
especificidad.
Resultados: Se estableció la presencia del haplogrupo mitocondrial A en 14 de las 16 muestras estudiadas.
Discusión: La alta
frecuencia de este haplogrupo amerindio en la población muisca
estudiada, la relaciona genéticamente con las poblaciones de la
familia lingüística chibcha que los autores y otros grupos
investigaron antes.
Conclusiones: Este es el
primer trabajo molecular que soporta la filiación muisca al
grupo lingüístico chibcha, y apoya las conclusiones
arqueológicas obtenidas previamente. Los métodos
controlados que se utilizaron en este estudio se podrán aplicar
a otras poblaciones de restos arcaicos en análisis.
Determinación del origen parental de molas hidatidiformes con polimorfismos STRs
Cristina Álava, Clara Arteaga, Miguel Aragón
Universidad Nacional, Bogotá, Colombia
Objetivo: Establecer el
origen parental de molas hidatidiformes al comparar 9 polimorfismos
STRs del tejido molar con los de los padres, para clasificarlos como
completa parcial, no molar o indeterminada.
Metodología: Se
recolectaron especímenes de tejido, obtenidos por legrado y
analizados junto con sus muestras de referencia. En casos donde no fue
posible la muestra del compañero, los alelos de origen paterno
se indicaron como aquellos que no estaban presentes en la madre.
Resultados: Se procesaron 87
casos completos. Se obtuvieron perfiles genéticos para 100% de
ellos y 62 se clasificaron en 7 categorías: mola completa
monospérmica, mola completa dispérmica, origen
biparental, mola parcial monospérmica, mola parcial
dispérmica, triploidía digínica,
tetraploidía verdadera
Discusión: Al
analizar las muestras se diferenciaron dos grupos: el primero que
corresponde a las muestras de identificación evidente, 43 casos
y el segundo, muestras de identificación compleja, 19 casos; en
éstos no fue posible identificar su origen de manera inmediata,
debido a que las dosis maternas no eran de fácil
explicación o sólo se detectó el perfil
correspondiente a la madre; para lograr su identificación se
realizaron re-extracciones a partir de una fracción diferente
del tejido.
Conclusiones: De los 62
casos identificados, 50 correspondieron a molas hidatidiformes: 39
completas monospérmicas, 8 completas dispérmicas, 3
parciales dispérmicas, 8 de origen biparental y 4
triploidías digínicas (abortos no molares).
Enfermedad de Birt Hogg Dube: presentación de un caso
P Páez, G Rubio, I Zarante
Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá. Instituto Dermatológico «Federico Lleras Acosta», Bogotá, Colombia
Se presenta una familia
afectada por síndrome de Birt Hogg Dube (MIM 135160)
autosómica dominante. El probando es un paciente de 51
años, natural de Bogotá, con historia de dos
neumotórax espontáneos hace 20 años sin causa
conocida, uno de los cuales requirió toracotomía. Refiere
del mismo tiempo de evolución aparición de lesiones tipo
acocordomas en la cara anterior del tórax y lesiones en el dorso
de la nariz de tipo fibrofoliculomas que no han aumentado en
número ni en tamaño desde entonces. En la familia la
madre, la hermana y una sobrina tienen antecedentes de
neumotórax espontáneo sin evidencia de lesiones en la
piel. Al examen físico se observan lesiones en el dorso de la
nariz, no hiperqueratosicas, blanquecinas, confluentes, tipo
fibrofoliculomas, lesiones papulares con las mismas
características en el rostro, el cuello y la cara anterior del
tórax, en éste, los acrocordones son escasos; hay
obesidad central. El resto del examen físico es normal. La
patología realizada a partir de las lesiones en la piel confirma
el diagnóstico de fibro-foliculomas en el dorso nasal. La
impresión diagnóstica es enfermedad de Birt Hogg Dube.
Esta entidad tiene un patrón de herencia autosómico
dominante caracterizada clínicamente por lesiones
cutáneas (fibrofoliculomas, acrocordones y tricodiscomas),
alteraciones pulmonares (quistes pulmonares en 89% de los casos, de los
cuales 24% presentan neumotórax espontáneo), y
alteraciones renales (tumores tipo oncocitoma, carcinoma de
células cromófobas e híbridos).
Ensayo del cometa para identificar en el ADN de linfocitos humanos daño inducido in vitro por Roundup® (glifosato)
Luz Stella Hoyos, Silvio Marino Carvajal, Diana Muñoz
Grupo de
Investigación en Toxicología Genética y
Citogenética, Departamento de Biología, Facultad de
Ciencias Naturales, Exactas y de la Educación, Universidad del
Cauca, Popayán, Colombia
Objetivo: Evaluar la
citotoxicidad e identificar el daño en el ADN de linfocitos
humanos inducido in vitro por Roundup®.
Metodología: La
citotoxicidad aguda se identificó mediante viabilidad celular
con azul de tripano al 0.4% y la genotoxicidad con el Ensayo del Cometa
en condiciones alcalinas. Las muestras de sangre se obtuvieron de una
persona saludable, no fumadora. Los linfocitos aislados se cultivaron
por 24 horas. Se establecieron dos cultivos/tratamiento y cinco
repeticiones/prueba. El tratamiento con Roundup® se hizo con diez
diferentes concentraciones, por cuatro horas, para la prueba de
citotoxicidad aguda. Para el Ensayo del Cometa el tratamiento se
efectuó por una hora con tres diferentes concentraciones
experimentales de Roundup®, el cultivo control-positivo se
trató con H2O2 40 µM y el control-negativo con H2O miliQ.
No se empleó activación metabólica. Luego de
establecer un efecto dosis-dependiente por el porcentaje de viabilidad
celular (citotoxicidad) se seleccionaron tres dosis experimentales
0.00091, 0.00127, 0.00178 µg/ml de Roundup® para el Ensayo
del Cometa, las cuales permitían una viabilidad celular
e»75%. Para el Ensayo del Cometa luego del tratamiento se
evaluó la viabilidad celular (e»75%) antes de someter las
preparaciones a lisis celular, desnaturalización,
electroforesis, neutralización y coloración con bromuro
de etidio. 50 células/tratamiento/repetición se
seleccionaron al azar con microscopio de fluorescencia para el registro
fotográfico. Los cometas fueron medidos por un analizador de
imágenes (software CASP). Para el Ensayo Cometa, se
identificó la mediana del registro de 50 células por cada
repetición, y asumiendo distribución normal (teorema del
límite central), se compararon los promedios de las diversas
concentraciones mediante análisis de varianza.
Resultados: Con el
análisis de correlación de Pearson, se identificó
la asociación lineal negativa (R = -0.986; p = 0.000) entre las
concentraciones de Roundup® y la viabilidad celular
(relación negativa dosis-efecto). A medida que la
concentración del Roundup® sube en el rango 0.000 a 0.005
µg/ml, la viabilidad celular decrece de un promedio de
97.15±0.95% a un promedio de 3.08±0.97%. Mediante
análisis de varianza del promedio de las medianas y prueba de
comparaciones múltiples de Duncan, se identificó que las
longitudes de cola 96.60±23.93 y 62.10±9.39,
correspondientes a las concentraciones 0.00178 y 0.00127 µg/ml,
respectivamente, fueron las más altas y diferentes
significativamente (p<0.05) de los valores registrados para las
concentraciones 0.00091 y 0.00000 µg/ml con valores de
33.0±4.7 y 11.6±1.9, respectivamente. El promedio
26.5±15.3 de momento de cola, correspondiente a la
concentración 0.00178 µg/ml es el más alto y
difiere significativamente (p<0.05), de los promedios registrados
para las concentraciones más bajas.
Conclusión: El
Roundup® en las condiciones experimentales del estudio induce
citotoxicidad y daño genético en linfocitos humanos
aislados.
Estandarización
de PCR-multiplex para el gen XRCC1 codón 399 y 194 e
identificación de polimorfismos por RFLPS
María Belén Trujillo, Luz Stella Hoyos
Facultad
de Ciencias Naturales, Exactas y de la Educación, Departamento
de Biología, Grupo de Toxicología Genética y
Citogenética, Universidad del Cauca, Popayán, Colombia
Objetivo: Estandarizar la
amplificación por PCR-multiplex con Platinum®
taq-DNA-polimerasa e identificación de los polimorfismos (RFLPs)
del gen de reparación XRCC1 codón 194(Arg’!Trp) y
399 (Arg’!Gln).
Metodología: La PCR
se realizó con una reacción total de 50 ul que
contenía 3 ml de ADN, 3 mM MgCl2, 200 uM dNTPs, 0.25 U de
Taq-polimerasa recombinante y 0.25 U de Platinum®
taq-DNA-polimerasa (Invitrogen), 0.6 mM (codon194), 0.8 (codon399) de
cada primer y buffer 1X y un programa de 94°C por 30 seg, 62°C
por 1 min y 72°C por 45 seg por 30 ciclos. El amplificado se
digirió con la enzima Msp I, por 4 horas a 37°C, seguido de
electroforesis en agarosa Metaphor al 3%.
Resultados: Patrón de
bandas de amplificado de 419pb (codon194) y 615pb (codon399) y del
digerido, codón 194 de 21, 174 y 292pb para el gen silvestre
(Arg) y de 174 y 313 para el gen mutante (Trp); y para el codón
399 de 221 y 374pb para el gen silvestre (Arg) y una de 615pb para el
gen mutante (Gln).
Discusión: Los
polimorfismos del gen XRCC1 se han asociado con la reparación de
lesiones en el ADN en BER (reparación por escisión de
bases); que pueden alterar la capacidad individual de reparar lesiones
causadas por xenobióticos (genotóxicos y
carci-nógenos). Algunos estudios en poblaciones identificaron su
asociación con la susceptibilidad a cáncer de
pulmón, gástrico, de cuello y cabeza, etc.
Conclusiones: Con la
estandarización se logró disponer en el laboratorio de
una herramienta perfeccionada lo que implica un ahorro de tiempo y
reactivos que permitirá identificar variaciones genéticas
en poblaciones ocupacionalmente expuestas e individuos más
susceptibles.
Estudio con 17 marcadores STR de los haplotipos del cromosoma-y en la población de la costa Caribe colombiana
Rosa Elena Romero, Rocío del Pilar Lizarazo, Ignacio Briceño, Alberto Gómez
Instituto de Medicina Legal y Ciencias Forenses, Bogotá. Instituto de Genética Humana, Facultad de Medicina,
Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia
Objetivos: Determinar las
frecuencias alélicas y la composición haplotípica
de 305 individuos masculinos no emparentados originarios de los
departamentos de Atlántico, Bolívar, Magdalena, Sucre,
Cesar, Córdoba y Guajira, por medio de 17 marcadores tipo STR
del cromosoma-Y.
Metodología: Para los
análisis de PCR multiplex se utilizó el estuche comercial
AmpFISTR® Y-Filer™ que incluye los STR: DYS19, DYS389I,
DYS389II, DYS390, DYS391, DYS392, DYS393, DYS385a, DYS385b, DYS437,
DYS438, DYS439, DYS448, DYS456, DYS458, DYS635 y Y-GATA-H4.
Resultados: Se identificaron
293 haplotipos de los cuales 283 son haplotipos únicos y los 10
restantes se encuentran repetidos sólo 2 ó 3 veces en la
población estudiada.
Discusión: La
diversidad haplotípica encontrada superó los valores que
se informan en otros trabajos y estuvo entre 99.6% para la
población de Sucre y 99.9% para Córdoba. También
se calculó la diversidad haplotípica en la
población total, que fue 99.9% con un poder discriminatorio de
96.1%.
Conclusiones: Con los 17
marcadores STR del cromosoma-Y se obtuvo una amplia heterogeneidad
genética en las poblaciones de la costa caribe, lo que hace que
los datos informados se conviertan en una herramienta poblacional de
referencia para los análisis forenses y de filiación con
marcadores de este cromosoma en los departamentos caribeños de
Colombia.
Estudio prospectivo clínico observacional de la esquizofrenia en Boyacá
Leopoldo Arrieta, Carolina Cortés, Clara Esteban, Zayda Lorena Corredor, Mayely Sánchez,
Maribel Forero, Ingrid Granados
Universidad
Pedagógica y Tecnológica de Colombia, Escuela de Ciencias
Biológicas, Tunja. Centro de Rehabilitación Integrado de
Boyacá, Tunja. Centro Colombiano de Fertilidad y Esterilidad,
División de Biogenética Molecular Reproductiva,
Área Biología Molecular, Bogotá. Estudiante de
Biología, Universidad Pedagógica y Tecnológica de
Colombia, Tunja, Colombia
La esquizofrenia a
nivel mundial presenta una frecuencia de 1% en la población
mundial. Debido a que en el departamento de Boyacá, Colombia, no
existen estudios de estos pacientes, la línea de
investigación en trastornos mentales del grupo GEBIMOL de la
Universidad Pedagógica y Tecnológica de Colombia, en
alianza con el Centro de Rehabilitación Integrado de Tunja,
tiene en marcha un estudio prospectivo clínico observacional de
la esquizofrenia en Boyacá. Esta presentación tiene como
objetivo describir la frecuencia de factores clínicos,
genéticos y ambientales encontrados en familias boyacenses con
esquizofrenia, como primer acercamiento hacia los estudios
genéticos moleculares que permitan tipificar regionalmente la
enfermedad. La población de estudio, comprendió,
individuos con diagnóstico clínico de esquizofrenia, con
una muestra de 14 familias afectadas que cumplieron los criterios de
inclusión y exclusión establecidos para el estudio. El
procedimiento metodológico comprendió fases de
recolección de datos sobre los factores de riesgo
clínicos, genéticos y ambientales, previa firma del
consentimiento informado, ejecución de pruebas
paraclínicas a los pacientes y familiares informativos en el
estudio y extracción de ADN de sangre periférica para
desarrollar el análisis genético molecular como segunda
etapa del proyecto. Los
datos se tabularon y analizaron estadísticamente. Como
resultados, se informa que en las 14 familias hubo 22 pacientes, de los
cuales 12 eran mujeres (54.5%) y 10 hombres (45.4%). En los
antecedentes familiares se observó que 7.1% (1) de las familias
afectadas no presentaron otros familiares enfermos y que en 92.8% (13)
hubo otros casos a nivel familiar (1 familia con 5 casos),
además 28.6% de ellos ofrecía consanguinidad en los
padres. Se observó también que el comienzo de la
enfermedad es más temprano en hombres que en mujeres (22.3
años vs. 17.6). En los pacientes se observaron en porcentajes de
frecuencia, altos, medios y bajos factores genéticos,
clínicos y ambientales asociados con esquizofrenia en la
literatura mundial: Con alta frecuencia se observó 100% de
familias numerosas, caracterizadas por tener más de 4 hijos,
donde los pacientes tenían un promedio de 6.3 hermanos; 92.8% de
antecedentes familiares de esquizofrenia y 86.4% de pacientes eran
hijos intermedios con respecto al nacimiento. Los factores de media-na
frecuencia fueron; 33.3% de convulsiones en algún período
de la vida, 30% de estrés por prestar el servicio militar como
suceso desencadenante de la enfermedad en hombres, 28.6% de
consanguinidad, 28.6% de antecedentes familiares de cáncer,
23.8% de consumo de drogas psicoactivas y 22.7% de retraso en el
lenguaje. Los factores que evidenciaron baja frecuencia fueron: falla
cardíaca (13.6%), disminución de la función
tiroidea (4.5%), presencia de dislexia (13.6%), alteraciones pulmonares
(9.1%) y manipulación zurda (4.5%). No se observó en los
pacientes ni en su familia labio paladar hendido, factor que se ha
asociado con esquizofrenia en otras poblaciones mundiales. Se concluye
que tanto la presencia como la ausencia de ciertos factores
clínicos, genéticos y ambientales dentro de las 14
familias estudiadas, permitieron establecer la primera
aproximación hacia la caracterización poblacional de la
esquizofrenia en Boyacá. La investigación pretende
ampliar el número de familias afectadas para establecer
asociaciones clínico-patológicas y moleculares, que
orienten la fase molecular del proyecto que se desarrollará a
partir de las muestras de ADN que se obtuvieron y preservaron en el
laboratorio del grupo de investigación.
Evaluación clínica y molecular de un paciente con síndrome de deleción 18p
Juan Javier López
Laboratorio Citogenética, Organización Sanitas Internacional, Bogotá, Colombia
El síndrome 18p, es
la segunda anomalía autosómica más frecuente,
ocurrida por la deleción parcial o completa del brazo corto del
cromosoma 18, que lleva a una amplia variabilidad en el fenotipo. A
pesar de la frecuencia del síndrome18p, el mapa
fenotípico no se ha podido detallar, debido a que la
mayoría de las deleciones puras comprometen por completo el
brazo corto y las deleciones parciales son secundarias a
translocacioneds no equilibradas, por lo que el fenotipo es influido
por la trisomía concomitante. Además, la
clasificación clínica heterogénea y la penetrancia
incompleta de los rasgos hacen muy difícil definir el fenotipo;
la ubicación exacta del punto de ruptura en el cromosoma 18
permite una mejor correlación fenotipo genotipo. Se informa el
caso de una joven de 17 años con déficit cognitivo leve,
retardo del desarrollo del lenguaje, cardiopatía estructural,
hipotiroidismo, así como características faciales
típicas del síndrome 18p, a quien se caracterizó
por citogenética convencional y molecular, para definir el punto
exacta de la deleción. El estudio citogenético del
propósito y de los padres reveló una monosomía
parcial 18p, sin compromiso intersticial y no familiar. Para definir la
extensión de la deleción se hizo un análisis
molecular por FISH con diferentes sondas que abarcaban desde el
centrómero hasta la región más distal, y
permitieron ubicar el punto de ruptura en 18p11.32.
Evidencia del ancestro europeo en el cromosoma-Y de individuos pertenecientes a poblaciones amerindias
Alberto Gómez, Ignacio Briceño, Ángela Umaña, Jaime E. Bernal
Instituto de Genética Humana, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia
Objetivos: Determinar el
ancestro patrilineal amerindio o europeo en poblaciones aisladas
colombianas consideradas amerindias, y contrastar su parentesco
cultural y genético.
Metodología: Cinco
microsatélites del cromosoma-Y (DYS19, DYS390, DYS391, DYS392 y
DYS393) y un polimorfismo único (DYS-199), se evaluaron en
muestras de ADN de indígenas arsario, kogui, ijka y wayuu en
Colombia.
Resultados: De 77 individuos
hombres, 68 cromosomas-Y presentaron la mutación amerindia C-T
en el locus M3 (DYS199) que define el haplogrupo Q. Los 8 individuos
restantes portaban apellidos sugestivos de un antepasado patrilineal
europeo. Sin embargo, solamente 28/68 individuos del haplogrupo Q
informaron apellidos amerindios. Individuos no emparentados de los
grupos arsario, kogui e ijka compartieron haplotipos-Y, pero no los
wayuu.
Discusión: En la
población estudiada, solamente 68/77 individuos (88.3%) portaban
la mutación C-T (DYS199) amerindia. Aunque la totalidad de los
individuos en estudio se consideraban de linaje paterno amerindio,
solamente 41.2% de ellos informaron apellidos amerindios. Entre los 9
amerindios que no portaban la mutación C-T, solamente uno
comunicó apellido amerindio (Pushaina), pero puede corresponder
a un ascendiente europeo por vía paterna.
Conclusiones: Se
encontró evidencia de antepasados no amerindios en 11.7% de los
individuos amerindios estudiados. Adicionalmente, estos hallazgos
indican que la transmisión del apellido no sigue las mismas
reglas en los amerindios y en los mestizos, y en consecuencia la
isonimia se debe interpretar con cautela en estas poblaciones.
Evidencia en el ADN mitocondrial de la relación biológica entre poblaciones chibchas de Centro y Suramérica
Phillip E. Melton, Ignacio Briceño, Alberto Gómez, Eric J. Devor, Jaime E. Bernal, Michael H. Crawford
Department
of Anthropology, University of Kansas, Lawrence, EEUU. Instituto de
Genética Humana, Pontificia Universidad Javeriana,
Bogotá, Colombia. Molecular Genetics and Bioinformatics, Integrated DNA Technologies, Coralville, EEUU
Objetivos: Determinar la
relación molecular entre grupos chibchas de Centro
América y Suramérica con base en la tipificación
del ADN mitocondrial
Metodología: Se
analizaron los haplogrupos y la diversidad haplotípica del ADN
mitocondrial de 188 individuos pertenecientes a 3 poblaciones chibchas
(kogi, ijka y arsario) y una población arawak (wayuú). Se
determinó la secuencia del segmento hipervariable (HSVI) en 110
de los 188 individuos, y las secuencias resultantes se compararon con
16 poblaciones amerindias previamente informadas.
Resultados: Los haplogrupos
A y C fueron los únicos haplogrupos encontrados en los kogi (65%
y 35%) y en los arsario (68% y 32%). El haplogrupo A fue el más
frecuente en los ijka (90%) con bajas frecuencias de los haplogrupos B
(2.5%) y C (7.5%). Los wayuú mostraron frecuencias similares de
los haplogrupos A (34%), B (24%) y C (32%). El haplogrupo D estaba
ausente en las 4 poblaciones estudiadas. Al comparar éstas con
otras poblaciones amerindias, se encontraron agrupados los chibchas de
la Sierra Nevada de Santa Marta más cerca de los chibchas
centroamericanos que de otros grupos amerindios.
Discusión: Con base
en estos análisis se demuestra una estructura genética
materna compartida entre los grupos de la Sierra Nevada y los grupos
chibchas y mayas centroamericanos.
Conclusiones: Estos
resultados sugieren una expansión de comunidades chibchas hacia
América del Sur, probablemente asociadas con estrategias de
subsistencia por cambios ecológicos sucedidos en la
región hace 10,000 a 14,000 años.
Informe de una familia colombiana con síndrome de Seckel
Harry Pachajoa, Wilmar Saldarriaga, Carolina Isaza
Grupo de Malformaciones Congénitas Perinatales y Dismorfología, Universidad del Valle, Cali, Colombia
El síndrome de Seckel
(MIM 210600) se caracteriza por la asociación de estatura corta,
retardo metal y facies dismórficas que incluyen microcefalia
severa, frente prominente, ojos grandes, protrusión de la nariz,
facies estrechas y micrognatia; la herencia es autosómica
recesiva y se han informado cerca de 100 casos con diagnóstico
clínico. Se presentan 2 casos de síndrome de Seckel en
una misma familia, hijos de una madre con antecedentes de labio y
paladar hendido bilateral, talla baja (1.50 m), sin antecedentes de
consaguinidad.
Paciente 1: Producto de
tercer embarazo, cuando nació, la mdre tenía 39
años, el parto se atendió parto en el hospital a las 37
semanas de gestación sin complicaciones, al nacimiento peso, 801
g (p<5; talla, 33 cm (p<5; PC, 22 cm (p<5; distancia
intercantal interna, 1.2 cm (p<5; distancia intercantal externa, 4.4
cm (p<5 tamaño total de la mano, 3.8 cm (p<5); pie, 4.5 cm
(p<5); sexo femenino. Al examen físico se encuentra
microcefalia, nariz especial, micrognatia, frente prominente,
clinodactilia bilateral y distensión abdominal, se solicito
ecografía abdominal que muestra gran quiste meconial, por lo que
se lleva a cirugía donde se encuentra atresia a nivel del ileon
ter-minal. Otros exámenes complementarios: ecocardiograma normal.
Paciente 2: Producto de
segundo embarazo, edad materna 37 años, se le atendió
parto hospitalario a las 37 semanas, al nacimiento peso, 1,070 g
(p<5); talla, 32 cm (p<5); sexo femenino, en el momento de la
consulta se encuentra paciente de dos años con peso de 3,500 g
(p<5); talla, 52 cm (p<5); perímetro cefálico, 37
cm (p<5); distancia intercantal interna, 2 cm (p<5);
tamaño total de la mano, 4.8 cm (p<5): al examen
físico se encuentra microcefalia, micrognatia, nariz especial,
clinodactilia bilateral, pie equino varo derecho, trae
radiografía de huesos largos que evidencian retardo en la
aparición de los núcleos epifisiarios.
Hermafroditismo verdadero y malformación de Dandy Walker: ¿una nueva asociación?
Natalia Rueda, Alejandro Giraldo
Facultad de Medicina, Genética Humana, Universidad Nacional, Bogotá, Colombia
Introducción: Tanto
la determinación como la diferenciación sexual se dan
como resultado de múltiples hechos moleculares que se inician
desde la embriogénesis y que son fundamentales para la
formación y funcionamiento de los órganos genitales y del
posterior desarrollo psicosexual. Los trastornos en el desarrollo
sexual comprenden varias entidades definidas que representan
alteraciones en diferentes vías específicas que hacen
parte de estos sucesos. Uno de los trastornos menos comunes es
precisamente el hermafroditismo verdadero, denominado hace poco como
desorden del desarrollo sexual ovotesticular. En este artículo
se informa un caso de hermafroditismo verdadero en una rarísima
asociación no descrita antes con la malformación de Dandy
Walker.
Descripción del caso
clínico: Se trata de una niña de 22 meses de edad, fruto
de la primera gestación de padres no consanguíneos con 34
y 53 años en el momento del parto. Durante el embarazo se
diagnosticó RCIU (retardo del crecimiento intra-uterino)
asimétrico y oligoamnios, y a las 37 semanas se hizo
cesárea. Desde el naci-miento se hallaron genitales ambiguos con
hiperplasia de falo, hipospadias y labios mayores escrotalizados sin
gónadas palpables, por lo que se realizó cariotipo y se
inició el estudio para hiperplasia suprarrenal congénita.
Con la evaluación cromosómica se encontró que la
paciente presentaba un cariotipo femenino normal 46,XX y con el estudio
paraclínico de hiperplasia suprarrenal congénita se
descartó este diagnóstico. Al nacimiento, los valores de
testosterona fueron de 2.99 ng/ml y a los 4 meses de 5.4 ng/ml, por
encima del rango normal en las niñas. Con estos hallazgos, una
laparoscopia evidenció la presencia de testículo inmaduro
en gónada derecha y en la gónada izquierda,
testículo inmaduro con focos de parénquima
ovárico. Otros hallazgos de la paciente incluyen una frente
prominente, cabello de baja implantación y escaso, pabellones
auriculares de baja implantación, hélix ancho, facies
alargada, desviación de hendiduras orientadas hacia arriba,
signo del «sol naciente», microsomía y micrognatia,
apiñamiento dentario, paladar alto y arqueado, cuello corto sin
pliegues, tórax en embudo, CIA tipo ostium secundum, DAP, piel
laxa, escoliosis izquierda, hiperlaxitud articular, flexión del
primer artejo sobre cara palmar, dedos largos, pie equino varo
bilateral, hipotonía e hipoactividad, asociado con un retraso en
su desarrollo psicomotor. La paciente tiene una RMN donde se
encontró la variante de Dandy Walker y un leve grado de
hidrocefalia supratentorial.
Discusión: El
hermafroditismo verdadero o desorden del desarrollo sexual
ovotesticular, es una causa rara de ambigüedad sexual, que se
caracteriza por la presencia de tejido ovárico y testicular en
el mismo individuo. En los casos de hermafroditismo verdadero se ha
encontrado que hasta 30% se pueden explicar por translocación
del gen SRY hacia el cromosoma X. Persiste por tanto, un gran
porcentaje de pacientes en quienes no se encuentra una causa que
explique su condición, y esto sugiere la necesidad de considerar
otros genes importantes en la determinación del sexo cuya
función no está completamente entendida. La niña
que se informa aquí presenta además otras manifestaciones
clínicas que incluyen anomalías faciales y
cardíacas que se han comunicado como manifestaciones
extraneurales de la malformación de Dandy Walker, y se describen
hasta en 30% de pacientes con esa malformación. Sin embargo, lo
raro es encontrar que esta malformación co-exista con el
hermafroditismo verdadero. En vista de los hallazgos en varios
órganos podría plantearse la co-existencia de dos
diagnósticos, que serían a) el hermafroditismo verdadero
y b), la malformación de Dandy Walter, asociada con las
manifestaciones extraneurales; pero, evidentemente la co-existencia de
dos diagnósticos es un hecho que se debe considerar una vez que
se desacarten todos los síndromes posibles que puedan explicar
los datos positivos de la paciente. Como
parte del estudio para entender esta extraña asociación,
se mencionan los genes ZIC1 y ZIC4 localizados en la región 3q24
en seres humanos, que al parecer tienen una función importante
en el desarrollo del cerebelo, pues su deleción genera un
fenotipo en ratones muy similar a la malformación de Dandy
Walker humanasen los hombres. Cerca de los genes ZIC1 y ZIC4,
específicamente, en la región 3q23, se encuentra el gen
FOXL2 que se consideró como un gen determinante en la
diferenciación del ovario. Este hallazgo surgió
después de los estudios en el síndrome PIS (polled
intersex syndrome), descrito en las cabras, donde las hembras XX
presentan reversión sexual hembra-macho, por una deleción
de la región 1q43, que es homóloga con la región
3q23 de los seres humanos, y en la cual se encuentran los genes FOXL2 y
PISRT1. En los humanos, se describió la misma deleción
3q23 en el síndrome de blefarofimosis epicanto inverso que se
asocia con malformaciones en los párpados y disge-nesia
ovárica en pacientes XX, aunque no se asoció
especificamente con hermafroditismo verdadero. Sin embargo, la
cercanía de genes que intervienen tanto en el desarrollo del
cerebelo como en el del ovario, podría sugerir una
asociación entre alteraciones moleculares que intervengan en la
región 3q23q24 y un cuadro clínico que comprometa estos
órganos. Aunque no existe conocimiento sobre casos similares
descritos en personas con hermafroditismo verdadero y
malformación de Dandy Walker, no se descarta que se trate de una
nueva asociación clínica.
Identificacion de la mutacion del255A en el gen PARK2 asociada con Parkinson juvenil en una familia de Cauca, Colombia
Nicolás Pineda-Trujillo, Andrés Dulcey, William Arias,
Sonia Moreno, Amanda Saldarriaga, Daniel Camilo Aguirre, Adriana Rui, Gabriel Bedoya, Francisco Lopera, Andrés Ruiz-Linares
Facultad
de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín. Facultad de
Medicina, Universidad del Cauca, Popayán, Colombia. The Galton
Laboratory, University College London, Londres, Inglaterra
Objetivo: Evaluar el gen PARK2 y su región flanqueante en una gran familia caucana con Parkinson juvenil.
Materiales y métodos: Entre la consulta de neurología de la Universidad del Cauca y el
grupo de Neurociencias se adelantó una detallada
evaluación neurológica y neuropsicológica de los
pacientes en una familia de origen caucano, con Parkinson juvenil. Se
evaluaron once microsatélites tanto intragénicos en PARK2
como flanqueantes en la misma región, cubriendo 24 cM en total.
Se asumió herencia autosómica recesiva y penetrancia
completa. La región codificante de PARK2 se evaluó
mediante secuencia directa de productos de PCR y la segregación
de la mutación del255A se analizó mediante PCR-RFLP.
Resultados: La familia se
compone de los padres (consanguíneos) y 10 hijos. Se
identificaron cuatro hijos varones afectados y seis hijos sanos (3
varones y 3 mujeres). La edad de comienzo osciló entre 10 y 25
años. Se identificó un haplotipo homocigoto extendido a
lo largo de la región analizada, con excepción del
marcador telomérico (D6S383), que presentó
recombinación en uno de los cuatro enfermos. Al secuenciar el
exón 2 de PARK2 se identificó la mutación del255A.
Esta mutación se observó como homocigoto
únicamente en los individuos afectados. Todos los sanos eran
portadores del haplotipo que se asocia con la mutación
(portadores de la mutación). Los resultados sugieren una
penetrancia de 100% de la mutación identificada en esta familia.
Conclusión: En
Colombia se sabe de previa asociación de mutaciones en PARK2 y
parkinson juvenil, con un fuerte efecto fundador en Antioquia. El
presente estudio reconfirma la participación del gen PARK2 en la
etiología del parkinson juvenil. Además suministra
herramientas útiles en el estudio de la demografía del
país, al considerar que la mutación aquí
informada, ya se había descrito en familias españolas y
francesas.
Identificación de polimorfismos en el gen CRY1B en cepas nativas de Bacillus thuringiensis mediante LSSP-PCR
Martha Ilse Orozco, Javier Hernández-Fernández, Jaime Bernal
Centro de
Biología Molecular, Fundación Gimnasio Campestre,
Bogotá. Universidad Jorge Tadeo Lozano, Bogotá. Instituto
de Genética, Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá,
Colombia
Se estandarizó la
técnica LSSP (reacción en cadena de la polimerasa con un
único oligonucleótido en condiciones de baja
astringencia), para identificar polimorfismos del gen cry1B en
aislamientos nativos de Bacillus thuringiensis (Bt), que se
utilizarán como alternativa en el control biológico de
plagas agrícolas en Colombia. Para este propósito se
diseñaron un par de oligonucleótidos específicos
que amplifican una región variable de 930 pares de bases del gen
cry1Ab de Bt. Antes se evaluó por PCR la presencia de los genes
cry1 en 164 aislamientos nativos provenientes del Centro y Caribe
colombiano; este gen se identificó en 43% de los aislamientos
(70), y del gen cry1B en 16% de ellos (11). Estos 11 aislamientos se
analizaron con LSSP-PCR para el gen cry1B y los patrones
electroforéticos obtenidos se compararon con los de la cepa de
referencia Bt subespecie. aizawai HD137. Se encontró que el
aislamiento nativo BtGC120 tenía un patrón de bandas muy
distinto al de la cepa de referencia para el gen cry1B, este fragmento
se secuenció y la lectura nucleotídica se comparó
contra toda la base de datos del NCBI con el programa Blastn, y se
evidenció 93% de homología con el gen cry1Bc1. Un
extracto crudo del aislamiento BtGC120 se evaluó
biológicamente contra larvas de primera etapa del insecto plaga
Spodoptera frugiperda, y se determinó una concentración
letal de 1,896 ng de proteína total por cm2 . Los resultados
muestran que la LSSP-PCR es una técnica que permite identificar
de una manera rápida y específica, variantes de las
secuencias de los genes cry de Bt, con potencialidad de encontrar
nuevos genes y novedosas actividades biológicas. Es posible
ejecutar esta técnica para evaluar grandes colecciones de
aislamientos nativos de Bt en tiempos muy cortos y a costos muy bajos.
Identificación
y asociación de las mutaciones H63D Y C282Y del gen HFE de la
hemocromatosis hereditaria en pacientes con la enfermedad de Alzheimer
familiar (EAF) portadores de la mutación presenilina-1 PS1E280A
IC Ávila, F Lopera, M Jiménez Del Río, C Vélez-Pardo
Grupo de
Neurociencias de Antioquia, Departamento de Medicina Interna, Facultad
de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
La hemocromatosis
hereditaria (HH) es una enfermedad autosómica recesiva del
metabolismo anormal del hierro que se ha asociado a la patología
de la enfermedad de Alzheimer (EA). Hasta el presente se desconoce la
naturaleza de esta asociación entre HH y EA. El objetivo de esta
investigación fue determinar si las muta-ciones H63D y C282Y en
el gen de la HFE se asocian con la EA familiar presenlina-1 E280A. Con
este propósito, se seleccionaron 75 individuos con
diagnóstico clínico y molecular EAF-PS1:E280A; 100
controles sanos (sin síntomas neurológicos ni
metabólicos). De los 75 pacientes con EAF-PS1:E280A, se
identificaron 3 homocigotos (DD), 18 heterocigotos y 54 normales para
la H63D. De los 100 controles genotipificados, se identificaron 6
homocigotos (DD); 24 heterocigotos y 69 normales para la H63D. Ninguno
de los individuos con EAF-PS1:E280A y los controles presentaron la
mutación C282Y. Se concluyó: (1) la mutación C282Y
no se presenta en ninguno de los pacientes EAF-PS1E280A; (2) la
mutación H63D en el gen HFE no es un factor modificador de la
edad de comienzo de la EAF-PS1:E280A; (3) no se encontró una
diferencia significativa entre la edad en que se inicia la EAF-PS1E280A
y la frecuencia alélica de H63D. En conjunto estas
observaciones, sugieren que la mutación H63D no se relaciona con
la patología de la acumulación de hierro en los cerebros
de pacientes con Alzheimer. Este trabajo de investigación
constituye el primer estudio donde se informan enfermos de Alzheimer
familiar con doble mutación con una sola sintomatología y
patología clínica.
Mosaicismo 45X/47XYY en una paciente con síndrome de Turner
Natalia Rueda, Hernando Ruiz, Alejandro Giraldo
Facultad de Medicina, Universidad Nacional, Bogotá, Colombia
Introducción: El
síndrome de Turner descrito por primera vez hace casi 7
décadas por Henry Turner, se define como la ausencia total o
parcial del segundo cromosoma sexual X en mujeres. Esta anormalidad
genética se puede diagnosticar al nacimiento por presencia de
linfedema, hipoplasia del ventrículo izquierdo,
coartación de aorta, o, en la pubertad y adolescencia por
manifestaciones como talla baja, ausencia de desarrollo de caracteres
sexuales secundarios y amenorrea, entre otros. Aunque en 50% de las
pacientes es característica la monosomía del X (45,X), el
otro porcentaje de casos se distribuye entre mosaicismos, deleciones,
translocaciones, isocromosomas y cromosomas X en anillo. En este
artículo se informa un caso de síndrome de Turner
diagnosticado clínicamente y donde la evaluación
cromosómica evidenció un mosaico 45X/47XYY.
Descripción del caso
clínico: Paciente de 16 años de edad quien
consultó por amenorrea primaria y ausencia de desarrollo de
caracteres sexuales secundarios. Fruto de la primera gestación
de padres sanos no consanguíneos, con edad materna al nacimiento
de 15 años y paterna de 20 años. Al examen físico
se evidenció peso en el percentil 10 y talla en el percentil 3
para la edad, cabello de implantación baja posterior, orejas con
pabellón auricular amplio, cuello corto, alado, escápulas
prominentes, ligera lordosis, panículo adiposo abdominal lateral
y genitales externos normoconfigurados. Los hallazgos al examen
físico permitieron hacer diagnóstico de síndrome
de Turner. La evaluación cromosómica a partir de sangre
periférica evidenció mosaicismo 45X/47XYY, donde 56% de
las metafases analizadas presentaron cariotipo 45X y 44% presentaron
cariotipo 47XYY. Se hizo además una ecografía
pélvica que informó útero de
características infantiles. Debido a los hallazgos
clínicos y citogenéticos, se sometió la paciente a
laparoscopia que evidenció útero y trompas
hipoplásicas, de forma normal y con bandeletas ováricas
bilaterales. Se pinzaron y extrajeron los remanentes ováricos
bilaterales y se tomó tejido gonadal para la evaluación
cromosómica que dio cariotipo 45X en 93% y 47XYY en 7% de las
metafases, respectivamente.
Discusión: El
síndrome de Turner tiene una incidencia aproximada de 1 por cada
2500 recién nacidas vivas y se caracteriza por ciertas
manifestaciones clínicas clásicas que se pueden reconocer
con facilidad en la consulta médica. Aún así, el
cariotipo es decisivo para el diagnóstico definitivo. En la
mitad de los casos que corresponden a monosomía del X, el
informe se interpreta de manera relativamente sencilla, pero en los
casos de mosaicismo es importante tener en cuenta que el resultado del
cariotipo dependerá de la línea celular presente en cada
tejido analizado. En este caso en particular, al encontrar un mosaico
45X/47XYY en proporciones casi correspondientes en sangre
periférica, se entiende que el hallazgo es el reflejo de un
evento post-cigótico muy temprano que llevó a la
formación de dos líneas celulares con cromosomas
distintos provenientes de un solo cigoto. En los casos de mosaicismo,
la variabilidad de la proporción de los clones está
afectada tanto por la precocidad del proceso como por la
distribución de las líneas celulares durante la
embriogénesis. Por tal razón, se hace necesario en estos
casos, determinar la presencia de líneas celulares adicionales
en tejidos diferentes, más aún teniendo en cuenta el
riesgo de presentar tumores gonadales malignos en pacientes con
cromosomas derivados del Y. En concordancia con esto, para el caso de
la paciente descrita, la baja presencia de la línea 47XYY a
nivel gonadal puede explicar la ausencia de formación testicular
y supone un bajo riesgo de presentación de gonadoblastoma o
disgerminoma. Aún así, algunos estudios justifican la
búsqueda del cromosoma Y en pacientes con síndrome de
Turner para hacer la gonadectomía profilática respectiva,
si se tiene en cuenta que algunos estudios informan que hasta 35% de
las pacientes tienen un cromosoma Y oculto. Paralelamente, para este
caso, el estudio del gen SRY en el cromosoma Y podría orientar
de modo más concreto sobre una posible mutación
inactivadora del SRY que lleve a un TDF (factor determinante del
testículo) no funcional. En algunos estudios, el análisis
de secuencia de ese gen ha permitido explicar el fenotipo femenino de
una paciente con mosaicismo 45X/47XYY, similar al caso de esta
paciente. Además, en el caso actual, no se puede descartar la
presencia de un SRY funcional que sugiera por el contrario, que el
fenotipo femenino resulte por alteraciones en otros genes importantes
en la vía de la determinación y la diferenciación
sexual.
Otocefalia: Informe de un caso
José Luis Duque, Abelardo Motta, Camilo Torres, Clara Alvarado, Saulo Molina
Medicina Perinatal LTDA, Universidad del Rosario, Bogotá, Colombia
Introducción: La
otocefalia es una rara y letal malformación congénita que
se caracteriza por el desplazamiento ventromedial y en ocasiones
fusión de las orejas (sinotia), hipoplasia o ausencia de la
mandíbula (agnatia), hipoplasia de la cavidad oral
(microstomía) e hipoplasia o ausencia de lengua. Se considera
que esta entidad es producto del desarrollo anormal del primero y
segundo arcos faríngeos y en su forma más severa de
presentación se acompaña de holoprosencefalia. Son pocos
los casos en la literatura, con una incidencia de 1 en 70,000
nacimientos y muy pocos los diagnósticos in útero. Sin
embargo con el uso de ecografía 3D y el TAC helicoidal se ha
podido confirmar el diagnóstico prenatal en algunos casos.
Informe de caso: Paciente de
30 años, G4P3A0V3 remitida por diagnóstico
ecográfico de embarazo de 28 semanas y polihidramnios. En la
ecografía obstétrica se encuentra polihidramnios,
ciclopía y proboscis. En la ecografía tridimensional se
confirman los hallazgos descritos y se identifican las
características craneofaciales de la otocefalia, con agnatia,
sinotia y microstomía. La paciente es desembarazada por
cesárea a las 32 semanas de embarazo y se obtiene un
recién nacido cuyas características craneofaciales
corroboran los hallazgos ecográficos. El estudio
patológico no muestra alteraciones en otro nivel y el cariotipo
se informa como 46,XY normal.
Polimorfismos de 17 marcadores STR del cromosoma-Y en población del altiplano cundiboyacense
Korina M. Rojas, Martha Roa, Ignacio Briceño, Alberto Gómez
Grupo de Genética, Cuerpo Técnico de Investigaciones, Fiscalía General de la Nación, Bogotá. Instituto de Genética Humana, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia
Objetivos: Determinar las
frecuencias alélicas y la composición haplotípica
de 74 individuos masculinos no relacionados, originarios de los
departamentos de Cundinamarca y Boyacá, mediante 17 marcadores
tipo STR del cromosoma-Y.
Metodología: Para los
análisis de PCR multiplex se utilizó el estuche comercial
AmpFISTR® Y-Filer™ que incluye amplímeros para los
siguientes STR: DYS19, DYS389I, DYS389II, DYS390, DYS391, DYS392,
DYS393, DYS385a, DYS385b, DYS437, DYS438, DYS439, DYS448, DYS456,
DYS458, DYS635 y Y-GATA-H4.
Resultados: Se identificaron
74 haplotipos de los cuales 68 son haplotipos únicos y los 6
restantes se encuentran repetidos sólo 2 veces en la
población estudiada.
Discusión: La
diversidad haplotípica encontrada superó los valores
ñeque informan otros trabajos y estuvo entre 99.8% para la
población de Cundinamarca y 99.9% para Boyacá.
También se calculó la diversidad haplotípica en la
población total, que fue 99.8% con un poder de
discriminación de 98.5%.
Conclusiones: Con los 17
marcadores STR del cromosoma-Y se obtuvo una amplia heterogeneidad
genética en las poblaciones del altiplano cundiboyacense, lo que
hace que los datos informados se conviertan en una herramienta
poblacional de referencia para los análisis forenses y de
filiación con marcadores de este cromosoma en los departamentos
de Cundinamarca y Boyacá en Colombia.
Polimorfismos de 17 marcadores STR del cromosoma-y en poblaciones del Pacífico colombiano
Sandra Julieta Ávila, Martha Lucía Camargo, Ignacio Briceño, Alberto Gómez
Instituto de Medicina Legal y Ciencias Forenses, Bogotá. Instituto de Genética Humana, Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia
Objetivos: Determinar las
frecuencias alélicas y la composición haplotípica
de 305 individuos masculinos no relacionados, originarios y residentes
de los departamentos de Valle, Cauca y Nariño, con 17 marcadores
tipo STR del cromosoma-Y.
Metodología: Para los
análisis de PCR multiplex se utilizó el estuche comercial
AmpFISTR® Y-Filer™ que incluye amplímeros para los
siguientes STR: DYS19, DYS389I, DYS389II, DYS390, DYS391, DYS392,
DYS393, DYS385a, DYS385b, DYS437, DYS438, DYS439, DYS448, DYS456,
DYS458, DYS635 y Y-GATA-H4.
Resultados: Se identificaron
285 haplotipos de los cuales 266 son haplotipos únicos, hay 19
haplotipos coincidentes entre las poblaciones y de ellos 18 se
encuentran repetidos 2 veces y sólo 1 se repite 3 veces en las
poblaciones estudiadas.
Discusión: La
diversidad haplotípica para cada una de las poblaciones
estudiadas fue 99.99%. También se calculó la diversidad
haplotípica de la población total, que coincide con la
calculada independientemente para cada una de las poblaciones.
Conclusiones: Mediante los
17 marcadores STR del cromosoma-Y se obtuvo una amplia heterogeneidad
genética en las poblaciones del Pacífico colombiano, lo
que hace que estos datos se conviertan en una herramienta poblacional
de referencia para los análisis forenses y de filiación
con marcadores de este cromosoma en los departamentos de Valle, Cauca y
Nariño en Colombia.
Polimorfismos en genes del sistema renina angiotensina comprometidos en el desarrollo y progresión de la nefropatía diabética
J Arango, J Vanegas, JM Martínez, G Bedoya, J Martínez,
M Uribe, E Klar, A Aristizábal, F Uribe, B Vital, A Ruiz
Laboratorio
de Genética Molecular, Universidad de Antioquia,
Medellín. Hospital Universitario San Vicente de Paúl.
Clínica Bolivariana, Medellín. Hospital Pablo
Tobón Uribe. Clínica Medellín, Instituto del
Riñón, Medellín, Colombia
Objetivo: Determinar el
factor de riesgo para desarrollar nefropatía diabética
(ND), asociado con los genes ACE-I/D y AGT-T704C en pacientes con
diabetes mellitus tipo 2 (DMT2).
Métodos: Se evaluaron
275 individuos de población antioqueña (paisa) con DMT2
(191-ND; 96 nefropatía incipiente (NI) y 95 con falla renal
crónica (FRC); y 84 controles. La asociación de genotipos
multi y unilocus y de haplotipos multiloci con el desarrollo de la ND,
se evaluó por una prueba X2. Para analizar el riesgo conferido
se calculó un OR con un intervalo de confianza de 95%.
Resultados: Al comparar las
poblaciones de casos contra las de controles, se observaron diferencias
significativas entre las frecuencias del alelo D y el genotipo DD para
el marcador ECA (p=0.002 y p=0.0004; p=0.008 y p=0.008,
respectivamente). Al comparar las poblaciones de casos entre sí
se observaron diferencias significativas para el genotipo CC de AGT
(p=0.005).
Discusión: Los
resultados son consistentes con la literatura, los genes AGT y ACE
están comprometidos en el desarrollo de ND en la
población. De manera novedosa se determinó que el alelo D
y el genotipo DD de ECA se asocian con la aparición de la
enfermedad (OR=1.71; CI 95%: 1.16-2.48 y 2.48 CI 95%: 1.21-5) y el
genotipo AGT-CC (OR=2.5 CI 95%: 1.27-4.75) se asocia con la
progresión a enfermedad renal terminal.
Conclusiones: El alelo D y
el genotipo DD de ECA se asocian con la aparición de la ND y el
genotipo AGT-CC se asocia con la progresión a falla renal
crónica.
Presencia de un polimorfismo en el gen de la Caspasa-12 en dos grupos de individuos colombianos
SP Mejía, JC Arango, LS Gómez, JD Matute, ID Gómez, JA López, F Toro, F Jaimes, PJ Patiño
Grupo de
Inmunodeficiencias Primarias, Facultad de Medicina, Universidad de
Antioquia, Medellín. Escuela de Bacteriología y
Laboratorio Clínico, Universidad de Antioquia, Medellín.
Grupo Académico de Epidemiología Clínica, Facultad
de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia.
Facultad de Ciencias, Universidad del Valle, Cali, Colombia
La sepsis es un problema
asociado con alta mortalidad en el mundo. Además de depender del
microorganismo causal y el estado inmune y nutricional del paciente, la
constitución genética determina en gran parte el curso y
pronóstico de la enfermedad. Uno de los genes de interés
en los últimos años es el que codifica para la
caspasa-12, donde un polimorfismo de un solo nucleótido (SNP),
que resulta en la síntesis de una caspasa-12 larga (Csp12-L),
tenía una frecuencia significativamente mayor en individuos de
ascendencia afroamericana que desarrollaron sepsis severa. Por lo
anterior y por la ausencia de estudios sobre la presencia de los
polimorfismos de la caspasa-12 en la población colombiana se
hizo un análisis genético en 26 individuos que
presentaban sepsis de la ciudad de Medellín y 20 individuos
sanos de una población negra del Chocó. Se analizó
la región del exón 4 del gen de Csp12-L donde se
encuentra el SNP mediante las técnicas de PCR- RFLP y SSCP. En
ambas poblaciones se identificó la presencia de los alelos que
codifican la caspasa-12 (Csp-12S y Csp-12L) pero sólo se
encontraron los genotipos S/S y S/L. Se observó la presencia de
la forma larga de la caspasa-12 en dos individuos de la
población negra del Chocó y en uno de los pacientes con
sepsis. Esto es algo significativo para la pequeña muestra de
estudio si se tiene en cuenta lo informado en estudios anteriores.
Así, este polimorfismo se convierte en un blanco de estudio en
la población colombiana, para comprender la respuesta de los
individuos con sepsis y posiblemente poder ofrecer una alternativa
terapéutica.
Presentación
de un caso de miocardiopatía familiar idiopática con
mutación espontánea (gen DES)
María E. Chamorro, Clara Arteaga
Universidad Nacional de Colombia, Bogotá, Colombia
Introducción: Las
miocardiopatías fibrilares son un grupo heterogéneo de
miopatías heredadas o espontáneas, que cursan con
acumulación de proteínas miofibrilares en fibras
miocárdicas, más frecuentemente desmina, una
proteína responsable de la integridad estructural de las
miofibrillas, acumulación debida a mutaciones en el gen de la
desmina (DES).
Resumen de historia
clínica: Se trata de una familia originaria y procedente de
Bojacá, constituida por 7 miembros (los padres y cinco hijos),
tres de los cuales presentan miocardiopatía restrictiva que
comienza clínicamente en promedio a los 11 años de edad,
con bloqueo auriculoventricular y evolución progresiva que
termina con la implantación de marcapaso, el mayor de los tres
hermanos afec-tados, de 24 años de edad, tiene el mayor
compromiso general (insuficiencia cardíaca congestiva) y
requiere de transplante, se realizó biopsia
endomiocárdica en la que se diagnosticó
miocardiopatía dilatada (agosto de 2006). Los padres no tienen
alteraciones al examen físico. No hay consanguinidad. Los otros
tres hermanos son sanos. Se considera que el cuadro de los tres
hermanos afectados es una miocardiopatía restrictiva familiar
idiopática, cuyo patrón de herencia podría ser una
mutación espontánea.
Conclusión: La
miocardiopatía restrictiva familiar idiopática como la
que presenta la familia de este caso, pertenece al grupo de
cardiopatías que se caracterizan por déficit en el
llenado diastólico a causa de una alteración en la
distensibilidad de la fibra miocárdica, que se puede deber a
muchas causas, frecuentemente por enfermedades de depósito o
fibrosis de la fibra miocárdica, se considera que en este caso
podría tratarse del depósito de una proteína
miocárdica defectuosa. Llama la atención el comienzo
temprano del cuadro y su evolución en los miembros afectados de
esta familia. Con la presentación de este caso se busca no
sólo poner en conocimiento el cuadro de la familia sino
también algunas guías de estudio y seguimiento en estos
pacientes.
Ptosis palpebral congénita. Presentación de una familia
JL Ramírez, R Caicedo, BE Mora
Unidad de Genética Médica, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Introducción: La
ptosis palpebral congénita (PPC) la describió
inicialmente Stuckey (1916). Tiene un patrón de herencia
autonómico dominante con expresividad y penetrancia variables
(OMIN, PTOS1). Se observa con frecuencia un grado variable de
caída uni o bilateral de párpados superiores con
limitaciones de la función visual, que se compensa con
hiperextensión del cuello y elevación de las cejas.
Descripción de casos: Se presentan dos familias con PPC provenientes del departamento de
Antioquia. Familia 1. Cuatro afectados en tres generaciones, tres de
ellos con evaluación clínica. El caso índice un
varón, octavo hijo de matrimonio no consanguíneo,
presenta ptosis palpebral derecha y estrabismo convergente
diagnosticados a los cuatro años. Una niña de siete
años, hermana del caso índice, tiene ptosis palpebral
bilateral sin otras manifestaciones oculares o visuales asociadas. La
madre de ambos pacientes presenta ptosis palpebral bilateral; el resto
del examen clínico es normal. Familia 2. Tres afectados en dos
generaciones, todos con ptosis palpebral bilateral y sin otras
manifestaciones asociadas.
Resumen: Se describen dos
familias con 7 pacientes que presentan grados variables de ptosis
palpebral congénita uni o bilateral; en un varón (familia
1) se presenta además estrabismo convergente sin otras
manifestaciones clínicas asociadas. A todos los enfermos del
estudio se les hizo fondo de ojo, agudeza visual, campimetría y
estudio citogenético.
Secuencia disruptiva de amioplasia congénita: presentación de un caso
P Páez, Ignacio Zarante, Fernando Suárez
Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia
Paciente de sexo femenino
conocido por proyecto ECLAMC por múltiples malformaciones:
facies anormal, contracturas articulares múltiples, pterigium en
la zona poplítea y los codos, pie equino varo bilateral,
gastrosquisis e hipotonía. Producto de primer embarazo de madre
de 21 años y padre de 22 años, no consanguíneos,
niega exposición teratogénica, movimientos fetales
referidos como normales. Ecografías prenatales que evidencian
gastrosquisis y pie equino varo por lo que realiza amniocentesis:
46,XX. Al examen físico: 2300 g (
Síndrome 18q- (síndrome de de Grouchy) presentación de un caso
BE Mora, CM Cristancho, G Vásquez, JL Ramírez
Unidad de Genética Médica, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Introducción: La monosomía parcial 18q-, la describieron De Grouchy et al. en
1964. Esta entidad corresponde a la deleción de un segmento del
brazo largo del cromosoma 18; ocasionalmente procede de un padre con
mosaicismo. El síndrome puede originarse por deleciones
terminales o intersticiales; las deleciones distales son las más
frecuentes. Lejeune en 1966 realizó una segunda
descripción y posteriormente Schinzel en 1975 hizo una
revisión. Hasta el momento se han publicado alrededor de 80
casos.
Descripción del caso: Paciente de 3 meses, producto de un primer embarazo de padres
jóvenes, no consanguíneos, remitido a consulta
genética por micropene, hipospadia, pie equinovaro bilateral
rígido y retardo pondoestatural. Embarazo de 40 semanas. La
madre presentó amenaza de aborto durante el primer trimestre.
PVE, sin complicaciones. Peso: 2,400 g, talla: 47 cm. Al EF: peso:
3,900 g (
Síndrome de Pendred (sordera y bocio congénito). Presentación de dos casos clínicos
JL Ramírez, M Schwartz, IC Alzate, G Vásquez, BE Mora
Unidad de Genética Médica, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Introducción: El
síndrome de Pendred (SP) fue descrito por V. Pendred en 1896,
informó una familia en la cual 2 de 5 hijos presentaban bocio y
sordera. El SP es una forma común de sordera congénita,
asociado con anomalías del desarrollo coclear, pérdida
neurosensorial auditiva unilateral o bilateral, aumento difuso del
volumen tiroideo (bocio), trastornos del equilibrio, anomalías
del oído interno y retraso mental. El SP presenta un
patrón de herencia autosómico recesivo. El gen
responsable es el SLC26A4, que se localiza en el cromosoma 7q-31, se
expresa en la región apical del tirocito y codifica la
proteína pendrina, que transporta yodo y cloro sanguíneos
al interior del tirocito. Casi todos los pacientes tienen
función tiroidea normal o presentan hipotiroidismo
subclínico (compensado por una respuesta exagerada a TRH).
Descripción de casos: Se presenta una familia de 9 descendientes en una sola
generación. Dos varones afectados, mestizos, naturales del
departamento de Antioquia, corresponden al séptimo y octavo
hijos de un matrimonio no consanguíneo, ambos embarazos y partos
sin complicaciones. Al nacer peso, talla y actividad motora dentro de
los límites normales.
Resumen: Se describen dos
pacientes con las manifestaciones clínicas
características del SP con bocio, sordera y retardo en el
desarrollo del lenguaje. Al examen físico se encontró
aumento de ambos lóbulos tiroideos con consistencia blanda,
hipoacusia y desarrollo limitado del lenguaje. El estudio de ambos
casos se complementó con audiometría, electrocardiograma
y radiografías de cráneo, huesos largos, muñecas y
mastoides, que revelaron hipoacusia severa bilateral y retardo en la
edad ósea.
Síndrome de Sotos (gigantismo cerebral). Presentación de un caso
BE Mora, IC Alzate, C Agudelo, R Caicedo, JL Ramírez
Unidad de Genética Médica, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Introducción: El
síndrome de Sotos o gigantismo cerebral fue descrito por primera
vez por Sotos et al. en 1964. Es una entidad genética
caracterizada por un marcado crecimiento intrauterino y postnatal.
Estudios recientes identificaron mutaciones en el gen NSD1, localizado
en el cromosoma 5q35 como el origen de un gran número de casos.
Este síndrome se caracteriza por crecimiento excesivo y
rápido, rasgos acromegálicos y desorden cerebral no
progresivo con retardo mental. Casi todos los casos presentan edad
ósea avanzada, aumento acelerado en talla, no en peso, retardo
del desarrollo motor y del lenguaje. Hay un patrón de herencia
autosómico dominante. Aunque ocurre transmisión de padre
a hijo, la mayoría de casos son esporádicos.
Descripción de un
caso: Niña de 10 años de edad, producto del primer
embarazo, padres no consanguíneos, proveniente del departamento
de Antioquia, remitida a la consulta de genética por retardo del
desarrollo psicomotor y del lenguaje, pubertad precoz, cráneo
normocéfalo, labios muy prominentes, hipoplasia del tercio medio
facial, prognatismo y estrabismo convergente corregido. PVE sin
complicaciones, al nacer talla 56 cm (>p95%), peso 3500 g. El
carpograma mostró edad ósea acelerada. Hormona del
crecimiento (GH): niveles normales. Cariotipo 46, XX normal, en 40
metafases. TAC de cráneo normal.
Resumen: Se describe una
paciente con manifestaciones clínicas características de
síndrome de Sotos: aceleración del crecimiento
óseo, retardo motor y RM moderado, sin evidencia de
megalencefalia. Se hicieron evaluación neuropsicológica,
pruebas hormonales: TSH, GH, estradiol sérico, FSH, LH y
glicemia preprandial, normales. Se realizó diagnóstico
diferencial con: síndrome de Weaver y Marshall.
Síndrome de disqueratosis congénita (síndrome de Zinsser-Cole-Engman). Presentación de un caso
BE Mora, SM Gutiérrez, JL Ramírez
Unidad de Genética Médica, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Introducción: La
disqueratosis congénita (DC), es un desorden genético
poco frecuente, menos de un caso por millón. Este
síndrome fue descrito inicialmente por Zinsser en 1906, luego
por Engman en 1927 y Cole et al. en 1930. Es más frecuente en
varones. Clínicamente la DC se manifiesta por la tríada
clásica de hiperpigmentación cutánea en cuello,
hombros, espalda y muslos, distrofia ungueal y leucoplaquia de la
mucosa oral. Se observan eritema y atrofia facial, hiperqueratosis
palmoplantar, acrocianosis, hiperhidrosis y ampollas palmoplantares,
cabello escaso, cejas y pestañas poco pobladas y otras
manifestaciones. Es una entidad con heterogeneidad genética
recesiva ligada al cromosoma X, autosómica recesiva y dominante.
En la forma ligada al X, la más frecuente, hay una
mutación del gen DKC1(Xq28) que codifica para la proteína
diskeratina y participa en el mantenimiento de los telómeros.
Descripción de un
caso: Varón de 9 años, proveniente del departamento de
Córdoba. Producto de primer embarazo, padres no
consanguíneos, consulta por manifestaciones clínicas
consistentes en: leucoplasia de la mucosa lingual (placa sólida
de bordes nítidos), distrofia ungueal, hiperpigmentación
cutánea en pliegues axilares, inguinales, antecubitales y
cuello. Además presenta osteopenia y hemoleucograma normal. La
biopsia de la lesión lingual no muestra hallazgos importantes.
Resumen: Se presenta un
paciente con diagnóstico de disqueratosis congénita, que
manifiesta la tríada dermatológica típica de la
enfermedad y otras alteraciones. Se realizaron exámenes
complementarios: cariotipo de alta resolución, biopsia de
lengua, endoscopia digestiva superior y hemoleucograma completo.
Síndrome de Proteus
BE Mora, C Piedrahita, RE Niño, C Agudelo, A Galeano, JL Ramírez
Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Introducción: El
nombre de síndrome de Proteus fue introducido por Wiedemann et
al. (1983), aunque su primera descripción se debe a Cohen y
Hayden (1979). El síndrome lleva este nombre por el dios griego
Proteus que podía cambiar de forma a voluntad para escapar de
quienes pretendían capturarlo. Los autores citados consideran
que indudablemente el desorden se determina genéticamente y
sugieren un patrón de herencia autonómico dominante. Se
caracteriza por gigantismo parcial de las manos y/o pies, lunares,
hemihipertrofia, tumores subcutáneos, macrocefalia y otras
anormalidades craneales. Este síndrome es un desorden
esquelético complejo que incluye alteraciones
mesodérmicas y crecimiento excesivo de múltiples tejidos.
Es altamente variable y parece afectar los pacientes a manera de
mosaico por la amplia variación del fenotipo.
Descripción de casos: Se estudiaron cuatro pacientes oriundos del departamento de Antioquia y
con diferentes edades quienes presentaron hemihipertrofia,
macrodactilia, exostosis, nevus, masas cerebriformes
características que comprometen las superficies palmares y
plantares y variedad de masas subcutáneas. La inteligencia era
normal.
Resumen: Se describen cuatro
pacientes de edades diferentes, cada uno de los cuales exhibe
manifestaciones clínicas variables como las antes anotadas. El
análisis citogenético en todos los casos fue normal.
Síndrome de Waardenburg. Presentacion de 7 casos familiares
JL Ramírez, G Vásquez, C Agudelo, BE Mora
Unidad de Genética Médica, Facultad de Medicina, Universidad de Antioquia, Medellín, Colombia
Introducción: El
síndrome de Waardenburg (SW) fue descrito inicialmente por el
oftalmólogo Petrus Waardenburg en 1948. Este desorden
genético presenta un patrón de herencia autosómico
dominante. Se origina por un defecto en la diferenciación de las
células de la cresta neural. Las manifestaciones clínicas
que lo identifican son: distopia cantorum (desplazamiento de los cantos
internos), trastornos pigmentarios (mechón de pelo blanco
frontal, heterocromía del iris, leucodermia) y sordera
neurosensorial. Su grado de compromiso es variable y las personas
afectadas pueden presentar una sola característica, el cuadro
completo o combinaciones de los rasgos. El SW tipo I se diferencia del
SW tipo II por la presencia de distopia cantorum, ausente en el tipo
II. El SW presenta heterogeneidad genética: El SWI muestra
mutaciones en el gen PAX3 y el SWII mutaciones en el gen MITF.
Descripción de casos: Se presentan 4 familias, familia A: 2 afectados en 2 generaciones,
familia B: 4 afectados en 2 generaciones, familia C: 1 afectado,
familia D: 1 afectado, los cuales tenían mani-festaciones
clínicas relacionadas con el SW tipos I y II. Todos los
pacientes provenían del departamento de Antioquia. Se
realizó audiometría, estudio citogenético, EEG y
evaluación oftalmológica.
Resumen: Se describen 7
afectados con SW en 4 familias evaluadas. Presentaron las
manifestaciones clínicas del síndrome SWI y SWII.
Síndrome Hermansky-Pudlak. Albinismo oculocutáneo con diátesis hemorrágica
Germán Narváez, Julián Ramírez
Universidad del Cauca, Popayán. Universidad del Valle, Cali, Colombia
Resumen: Se informa el caso
de un paciente colombiano con el síndrome de Hermansky-Pudlak
(SHP), y se hace una revisión de la literatura que comprende
epidemiología, características clínicas, criterios
diagnósticos, tratamiento y avances recientes en su
biología molecular.
Introducción: El SHP
es un trastorno autosómico recesivo raro que en la actualidad se
define como un grupo de desórdenes autosómicos recesivos
genéticamente heterogéneos caracterizados por albinismo
oculocutáneo tirosinasa positivo, diátesis
hemorrágica debida a un grupo de almacenamiento plaquetario
deficiente, cierto grado de lipofuscinosis y defectos de
función, transporte o formación de vesículas
intracelulares.
Informe de caso: Se trata de
una niña de 7 años, procedente de Roldanillo, municipio
en el norte del departamento del Valle del Cauca. Consultó al
Hospital Universitario del Valle por un cuadro de hematoquezia
intermitente desde los 3 años de edad. 5 meses antes del ingreso
presentó un episodio masivo de de rectorragia que la
llevó a choque. A la revisión por sistemas refería
equimosis espontáneas, epistaxis y nistagmus. Como antecedentes
personales de importancia tiene albinismo oculocutáneo y
disminución de la agudeza visual. Al examen físico de
ingreso se encontraron los siguientes hallazgos positivos: albinismo
oculocutáneo, nistagmus horizontal, disminución de la
agudeza visual, hipopigmentación del iris, nevus y equimosis en
extremidades. Los paraclínicos que se encontraron alterados
fueron los siguientes: endoscopia de vías digestivas altas:
gastritis crónica superficial; HP(-) gammagrafía
eritrocitos marcados: sangrado en colon derecho; colonoscopia:
hiperplasia nodular linfoide en íleon terminal, ciego, colon
ascendente, transverso y descendente proximal; microfotografía
electrónica que muestra disminución de los cuerpos densos
plaquetarios. El resto de exámenes practicados resultaron
normales (hemograma, PT, PTT, TS, ANAs, TSH, T4, biopsia de
médula ósea, pruebas de función pulmonar,
angio-resonancia, ecografía renal, gammagrafía negativa
para divertículo de Meckel).
Epidemiología: La
frecuencia más alta de este síndrome se encuentra en
Puerto Rico, otros lugares donde se encuentra son una villa en los
Alpes suizos (Schallreuter et al. 1993) y Japón (Ito et al.
2005). SHP tiene una prevalencia estimada global de 1 en 500,000 a 1 en
1’000,000 entre la población no puertorriqueña.
Clínica: Existe un
amplio rango de severidad de las características clínicas
que se pueden encontrar en SHP, entre otras: albinismo
oculocutáneo tirosinasa positivo; diátesis
hemorrágica, lipofuscina ceroide en lisosomas; fibrosis
pulmonar; colitis granulomatosa; falla renal; gingivitis granulomatosa;
miocardiopatía; neutrófilos y linfocitos con
función normal (excepto en SHP2).
Diagnóstico: El
diagnóstico de esta entidad se hace con la clínica
(albinismo oculocutáneo y diátesis hemorrágica)
asociada con ausencia de cuerpos densos plaquetarios. Las siguientes
son las entidades con las que se debe hacer el diagnóstico
diferencial: síndrome de Chediak-Higashy; síndrome de
Griscelli; coroideremia; síndrome de la plaqueta gris; albinismo
oculocutáneo tipo 1 (OCA1); albinismo oculocutáneo tipo 2
(OCA2); albinismo oculocutáneo tipo 4 (OCA4); albinismo ocular
ligado al cromosoma X (XLOA)
Tratamiento: Para el
tratamiento existen recomendaciones como vigilar el estad de la piel,
evitar la exposición al sol, evaluación
oftalmológica anual, transfusiones de ser necesarias, DDAVP
(1-desamino-8-D-arginina vasopresina) IV como profilaxis para
procedimientos invasivos, sólo soporte para fibrosis
quística, en caso de colitis granulomatosa, usar esteroides y
otros antiinflamatorios.
Informe de un caso de síndrome Ipex
Arturo Jhan, Heidi Mateus, Carolina Rivera, Cladelis Rubio
Universidad del Rosario, Bogotá, Colombia
Paciente de 12 años,
sexo masculino. Asiste a consulta por sospecha de fibrosis
quística. El cuadro clínico comienza desde el
período neonatal con apneas del sueño y crisis
convulsivas por lo cual requirió manejo en la Unidad de
Recién Nacidos. Posteriormente, como cursa con numerosos cuadros
de dolor abdominal y deposiciones diarreicas abundantes y
fétidas, se sospecha un síndrome de malabsorción.
Ha presentado neumonías a repetición y lesiones
eczematosas diseminadas en los miembros. Desde los 8 años de
edad cursa con hipertensión arterial, hiperglicemia,
hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, astenia, adinamia y mialgias
generalizadas. Actualmente hay incontinencia fecal. La hermana menor
presenta un cuadro similar al descrito desde hace aproximadamente dos
años. El cuadro clínico y los hallazgos
paraclínicos no se consideran típicos de fibrosis
quística pues engloban alteraciones que sugieren una
poliendocrinopatía, enteropatía e
inmunodisregulación, características compatibles con
IPEX. El síndrome de inmunodisregulación,
poliendocrinopatía, enteropatía es un desorden recesivo
ligado a X (IPEX) que se caracteriza por una alteración en los
linfocitos T CD4+ y sobreproducción de citoquinas. Esto lleva a
la expresión de múltiples desórdenes autoinmunes.
Se presenta con diabetes mellitus tipo 1 de comienzo temprano, diarrea
crónica, eczema, hipotiroidismo, anemia, trombocitopenia,
neuropatía membranosa e infecciones a repetición.
Usualmente lleva a la muerte en la infancia temprana.
Trisomía 3q: Informe de un caso en la clínica Materno Infantil de Saludcoop, Bogotá, Colombia
Sandra Ospina, Carlos Restrepo
Fundación
Universitaria de Ciencias de la Salud. Clínica Materno Infantil
Saludcoop, Bogotá. Universidad del Rosario, Bogotá,
Colombia
Resumen: Los síntomas
más importantes pueden incluir retraso prenatal y postnatal del
crecimiento, retraso mental severo, microcefalia, sinofridia,
hipertricosis, malformaciones cardíaca y renales.
Caso clínico: Recién nacido de sexo masculino fruto del tercer embarazo madre
de 28 años G3P2V1M1 Cursó con embarazo de 41 semanas dx
prenatal de trisomía parcial 3q. Nace vía vaginal. Peso
3,730 g, talla: 51 cm, PC: 34 cm, Pt: 33 cm, Pa: 33 cm.
Antecedentes: Madre y hermana con translocación recíproca equilibrada t(3:21). Prima con trisomía parcial.
Examen físico: Facies
aparentes, leve disminución del diámetro biparietal con
hirsutismo facial y corporal en tórax y antebrazos cabello de
implantación baja, cejas pobladas y tendencia a la sinofridia,
ojos almendrados puente nasal y nariz planas con narinas antevertidas y
filtrum de 1 cm, boca de 3.7 cm, orejas de implantación normal.
Paladar íntegro cuello muy corto, tórax ancho con
teletelia, Rscs rítmicos son soplo sistólico grado II/VI;
abdomen normal. Extremidades: pliegue palmar incompleto y clinodactilia
bilateral. Genitales externos masculinos, testículos no
descendidos con hipospadias, ano perforado neurológico
hipertonía leve en extremidades superiores principalmente no
contracturas. Rx. de tórax: cardiomegalia global ,
ecografía abdominal: normal.
Un predictor gráfico, altamente configurable, de genes de diversos organismos
Irene Tischer, Pedro Antonio Moreno, Margot Cuaran, Oscar Bedoya, Luis Garreta, Patricia Hoyos, Liliana Gómez, Iván Mauricio Cabezas, María Fernanda Morales, Silvio Jiménez, Orlando Bedoya
Universidad del Valle, Cali, Colombia
La predicción de
genes es uno de los problemas centrales de la bioinformática.
Generalmente se aplican métodos intrínsecos, como
búsqueda de secuencias consenso, matrices de puntajes, modelos
ocultos de Markov, redes neuronales o estrategias integradoras. Dentro
de esta estrategia de predicción se enmarca el proyecto de
investigación, desarrollado por los integrantes del grupo
BIOINFORMÁTICA de la Universidad del Valle. Se desarrolló
un prototipo de software más flexible y amigable que los
predictores actuales. El punto de partida para el proyecto fue el
Genezilla, un predictor de genes de código abierto que permite
configurar la selección de las bases de datos de entrenamiento y
los modelos de los componentes. En esta aplicación se integraron
modificaciones, diseñadas para aumentar la funcionalidad y
amigabilidad de la herramienta. El desarrollo de nuevos modelos (redes
neuronales para exones, modelos multiespaciales de Markov para
promotores), complementado por un modelo de predicción de islas
CpG, que son un indicador para una zona donde pueda comenzar un gen,
permite búsquedas con más especificidad, tendientes a
mejorar los niveles de predicción. Con la posibilidad de
entrenar y comparar diferentes configuraciones, que se introdujeron al
Genzilla, el investigador biólogo-bioinformático puede
construirse un predictor, adaptado al organismo específico de su
interés. El mismo entrenamiento es mucho más fácil
para el biólogo, pues se desarrolló un wizard que
guía al usuario por el proceso complicado de especificar los
parámetros necesarios para el entrenamiento. A
fin de representar el resultado de la predicción en forma
más comprensiva y completa, se agregaron elementos visuales
gráficos, entre ellos una visualización global de los
resultados de búsqueda junto con la posibilidad de hacer un zoom
para ver detalles de los genes y sus componentes, estadísticas
que resumen los resultados de búsqueda desde diferentes puntos
de vista y la predicción provi-sional de la proteína, que
un gen predicho expresará. Con el desa-rrollo de esta
herramienta, de distribución libre para la comunidad
bioinformática, se espera contribuir al análisis de la
estructura y función del gen a fin de ganar un mejor
entendimiento en el estudio de la organización de genes y
genomas, asignar nuevos genes potencialmente útiles y,
fortalecer la investigación en bioinformática en el
país, donde la bioinformática y la genómica a
nivel de la predicción del gen es poca. El trabajo ha sido un
gran estímulo para el aprendizaje, no sólo como grupo de
investigación, sino también en la formación de
estudiantes de pregrado y maestría quienes aportaron valiosas
avances a la investigación.
Una aproximación probabilística para la predicción de elementos de promotores eucariotas
Margot Edith Cuarán, Irene Tischer
Universidad del Valle, Cali, Colombia
En este artículo, se
presenta un modelo de identificación de los motivos del promotor
eucariota (MIMO). MIMO emplea un modelo probabilístico que
combina los modelos ocultos de Markov con probabilidad de
distribución multiespacial y los generalizados. Los elementos
del promotor como la caja TATA, CAAT y GAC se identifican alrededor del
sitio de comienzo de la transcripción (SIT) de la secuencia ADN,
mediante la información estadística provista por el
método de matrices de peso. Los resultados del experimento sobre
un conjunto de secuencias de mamíferos muestran una
predicción que favorece la estructura de los promotores
eucariotas.
Identificación basada en LSSP-PCR de nuevos genes cry1Aa, cry1Ab y cry1Ac en aislamientos nativos de Bacillus thuringiensis
Silvio Alejandro López-Pazos, Javier Hernández-Fernández, Jaime Bernal
Centro de
Biología Molecular, Fundación Gimnasio Campestre,
Bogotá. Universidad Jorge Tadeo Lozano, Bogotá. Instituto de Genética de la Pontificia Universidad Javeriana, Bogotá, Colombia
Se ejecutó la
LSSP-PCR (reacción en cadena de la polimerasa con un
único iniciador en condiciones de baja astringencia) para la
identificación de nuevos genes cry1 en aislamientos nativos de
Bacillus thuringiensis (Bt). Se utilizaron 18 aislamientos nativos de
Bt, previamente caracterizados para la presencia de genes cry1,
provenientes de la región andina y el caribe colombiano. Se
diseñaron iniciadores específicos para los genes cry1Aa,
cry1Ab y cry1Ac que amplificaron una región variable de 1000
pares de bases. Con éstos, se evaluaron los 18 aislamientos
nativos por PCR para la presencia de estos genes. Los aislamientos
amplificaron por lo menos uno de los 3 genes evaluados. Se
identificaron los 3 genes en el aislamiento 130BtGC. La
evaluación por LSSP-PCR, presentó perfiles diferentes
para los genes cry1Aa en 7 aislamientos y para los genes cry1Ab en 4
aislamientos. El aislamiento 130BtGC mostró el mayor
número de diferencias para el gen cry1Ab, pues se
identificó presencia o ausencia de 11 bandas
electrofóreticas para el iniciador directo Ab1 y 12 diferencias
para el iniciador reverso Ab2. Este fragmento del gen cry1Ab se
secuenció y se comparó con la base de datos GenBank, y
mostró 91% de identidad con el gen cry1Ab. El aislamiento nativo
130BtGC se evaluó biológicamente sobre larvas de primer
estadío del insecto-plaga de la papa Tecia solanivora y
presentó una CL50 de 1,298 ìg de proteína por cm2.
Este hallazgo demuestra las posibilidades de este método para la
identificación de nuevos genes cry de Bt, y por ende, para
identificar por medio de bioensayos específicos, nuevas
proteínas con actividades biológicas novedosas.
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