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VITAE Academia Biomédica Digital
Centro de Análisis de Imágenes Biomédicas Computarizadas-CAIBC0
ISSN: 1317-987x
Num. 27, 2006

VITAE Academia Biomédica Digital, Número 27, Abril-Junio, 2006

Micología

Identificación de especies de levaduras del género Candida provenientes de pacientes con vulvovaginitis

María Antonia De la Parte1, Mireya Mendoza2, Ana Brito

1delaparte@cantv.net , Escuela de Medicina “Jos é Mar ía Vargas ”, Universidad Central de Venezuela, Departamento de Micología, Instituto de Biomedicina, Caracas, Venezuela.
2Escuela de Medicina “Jos é Mar ía Vargas ”, Universidad Central de Venezuela.

Fecha de recepción: 05/04/2006 Fecha de aceptación: 31/05/2006

NOTA: Toda la información que se brinda en este artículo está destinada al conocimiento general. En ningún caso sustituye el asesoramiento de un médico. Ante cualquier duda que pueda tener en cuanto a su estado de salud, consulte con su médico o especialista.

Code Number: va06014

La candidiasis vaginal es una micosis de distribución mundial producida por levaduras del género Candida, la cual pertenece a la flora normal de la vagina. La vulvovaginitis constituye una de las primeras afecciones ginecológica y su causa m ás frecuente es la candidosis. Candida albicans ha sido considerado el agente más importante de esta patología; sin embargo, estudios más recientes revelan un incremento en la incidencia de otras especies del género. Algunas especies “no albicans” tienen la particularidad de presentar resistencia a los tratamientos usuales con antimicóticos, por lo que se hace necesario llegar al diagnóstico de especie para instalar tratamiento específico. El objetivo de este estudio fue identificar las especies de levaduras del género Candida asociadas a vulvovaginitis en pacientes provenientes de centros clínicos de Caracas, durante el período comprendido entre Junio de 2004 a Mayo de 2005, para determinar la frecuencia de las distintas especies del género involucradas en la etiología de la vulvovaginitis en nuestro medio. Se estudiaron 60 muestras obtenidas del fondo de saco y paredes vaginales; a cada muestra se le realizó examen al fresco con KOH al 10% y cultivo en medio de Agar Sabouraud con antibiótico. Para identificación de especie se realizaron las pruebas de tubo germinal, formación de clamidosporas en caldo harina de trigo-Tween 80, observación del color de las colonias en CHROMagar Candida , morfología en corn-meal y asimilación de azúcares. Entre las especies de Candida, C. albicans fue la más frecuentemente aislada 84%: n=50); C. tropicalis representó el 8% (n=5), C. glabrata el 3% (n=2) y C. guilliermondii 5% (n=3). Nuestros resultados son similares a los reportados por otros autores nacionales e internacionales por lo que concluimos que C. albicans es la especie aislada con mayor frecuencia en esta patología, sin embargo, las especies “no albicans ” se aíslan cada día con mayor frecuencia y es por ello que se hace necesario llegar hasta la identificación de especie en todos los casos del diagnóstico microbiológico de la vulvovaginitis por Candida y realizar de rutina las pruebas de sensibilidad a los antif úngicos de uso frecuente a estos aislados de levaduras.

Introducción

Las levaduras del g énero Candida son hongos dimorfos de distribución universal que forman parte de la flora residente de la boca, tracto digestivo y genital femenino de sujetos sanos. Bajo algunas condiciones, por razones a veces bien establecidas y en otros casos no bien conocidas, pudieran ser responsables de patologías de alto riesgo y en ocasiones fatales. Pueden producir lesiones en piel, uñas, cavidad oral, bronquios, pulmones y alcanzar todos los órganos y sistemas mediante la diseminación sanguínea de la levadura, lo que se denomina fungemia o candidemia [1,2]. El aumento de las infecciones causadas por levaduras es un fenómeno creciente a nivel mundial y Venezuela no escapa a esta problemática [3-5].

Ejemplos de patologías frecuentes en el hospedador inmunocompetente son: vulvovaginitis, candidiasis oral, conjuntivitis, dermatitis del área del pañal, paroniquias e intertrigo. En el sujeto inmunocomprometido es frecuente la esofagitis y se pueden presentar miocarditis, abscesos hepato-esplénicos, infecciones pulmonares, infecciones del sistema nervioso central (SNC), endoftalmitis e incluso formas crónicas de la enfermedad [1]. Se reporta que el 75% de la población femenina presentará por lo menos un episodio de vulvovaginitis por Candida en su vida y entre el 40 y 50% de éstas tendrán episodios recurrentes; se describe también el aumento de la incidencia de candidosis vaginal [4-6].

La vulvovaginitis constituye una de las primeras afecciones ginecológica y su causa más frecuente es la candidosis [7]. Candida albicans ha sido considerado el agente más importante de esta patología; sin embargo, estudios más recientes revelan un incremento en la incidencia de otras especies del género [8]. Algunas especies “no albicans ” tienen la particularidad de presentar resistencia a los tratamientos usuales con antimicóticos, por lo que se hace necesario llegar al diagnóstico de especie para instalar tratamiento específico. Está bien establecido que C. krusei presenta resistencia natural a fluconazol y para otras especies como C. glabrata y C. tropicalis ha sido reportada resistencia importante a la mayoría de los imidazoles. [3,9].

La identificación de C. albicans tradicionalmente se realiza mediante la técnica de tubo germinativo, una prueba simple, rápida y económica que permite la identificación en 2 a 3 horas. El problema que surge con esta prueba es que entre un 5 y 10% de los aislamientos de C. albicans no producen tubo germinativo, adem ás de darse falsos positivos en otras especies del género como C. tropicalis y C. parapsilosis que producen estructuras semejantes a un tubo germinativo [10,11]. Así, para identificar los aislados falsos positivos y falsos negativos, se deben utilizar además pruebas complementarias como la producción de clamidosporas [3,8], el uso de medios cromogénicos [5,11], la asimilación de azúcares [10,12,13] y en aislados dudosos se hace necesario utilizar la genotípificación.

El objetivo del presente estudio fue identificar las especies de levaduras del g énero Candida asociadas a vulvovaginitis en pacientes provenientes de centros clínicos de Caracas, durante el período comprendido entre Junio de 2004 a Mayo de 2005, para determinar la frecuencia de las distintas especies del género involucradas en la etiología de la vulvovaginitis en nuestro medio.

Métodos

Se estudiaron 60 pacientes con edades comprendidas entre 15 y 45 a ños, quienes asistieron a diferentes centros clínicos del área metropolitana de Caracas con sintomatología de vulvovaginitis. Fueron criterios de exclusión: tratamiento con antimicóticos tópicos o sistémicos durante las últimas 4 semanas, duchas vaginales y relaciones sexuales durante las 72 horas previas a la toma de la muestra. A cada paciente se le realizó historia clínica y se procedió a la toma de muestras con hisopos est ériles de las secreciones del fondo de saco y paredes vaginales. Cada muestra fue estudiada mediante examen al fresco con solución de KOH al 10% y sembrada en dos tubos con medio de agar Sabouraud dextrosa con antibiótico.

Las levaduras aisladas en el cultivo fueron identificadas en el laboratorio de Micología del Instituto de Biomedicina a través de estudios morfológicos y bioquímicos con técnicas convencionales [10,14]. Candida albicans se identificó mediante las siguientes pruebas: formación de tubo germinal, producción de clamidosporas, crecimiento y color de las colonias en el medio CHROMagar Candida (CHROMagar, Microbiology, Francia), prueba de la ureasa, auxonograma para la asimilación de carbohidratos y crecimiento a 42ºC. Para la identificación de especies del género Candida distintas a C. albicans, además de las pruebas anteriormente mencionadas, se realizaron siembras en corn-meal-Tweeen 80, para inducir la formación de hifas y pseudohifas [3, 8, 10, 12, 13].

Resultados

De las 60 muestras estudiadas procedentes de pacientes con clínica de vulvovaginitis, C. albicans fue la especie más aislada con el 84% (n=50) y las especies “no albicans” representaron el 16%, de las cuales la siguiente en frecuencia fue C tropicalis con el 8% (n=5), C. guilliermondii con un 5% (n=3) y C. glabrata con el 3% (n=2). (Tabla 1, Gráfico 1).

El 90% (n=45) de los aislados de Candida albicans produjeron clamidosporas (Figura 1), el 94% (n=47) fueron productores de tubo germinal (Figura 2), el 100% creció a 42º C y todos dieron negativa la prueba de la ureasa (Tabla 2).

En el cultivo en medio de CHROMagar Candida se apreció que las colonias de C. albicans presentaron un color verde claro, aquellas de C. tropicales y C. glabrata fueron de color morado claro y las de C guilliermondii mostraron color blanco (Figura 3).

Al analizar los datos obtenidos en las pruebas convencionales para la identificación de C. albicans, apreciamos que la producción de clamidosporas fue positiva en el 90% de los aislados y la de tubo germinal en el 94% siendo negativa en el 10 y 6% respectivamente, lo cual ha sido reportado en la literatura [10]. Con respecto al color de las colonias en el medio cromog énico (CHROMagar Candida) observamos que todos los aislados de C. albicans presentaron un color verde claro, lo cual coincide con los resultados de otros autores donde la sensibilidad y especificidad de este medio es de un 100% para C. albicans [15], mientras que las otras especies produjeron un color variable entre blanco y morado claro (Figura 3). La identificación de las levaduras “no albicans” se complementó con el patrón de asimilación de azúcares correspondiente para cada especie (Figura 4) y las características morfológicas de su crecimiento en el medio de “corn meal Tween 80 ” [10,12,14].

Candida albicans fue la levadura identificada con mayor frecuencia en nuestro estudio, con un 84%, lo cual coincide con diferentes autores quienes reportan entre 50 y 90% [8,16-22].sin embargo, las especies “no albicans ” como C. glabrata, C. tropicalis, C. guilliermondii así como C. krusei, entre otras, también están involucradas aunque en menor proporción [8,9]. Es importante considerar la necesidad de identificar las diferentes especies de Candida causantes de vulvovaginitis ya que éstas muestran resistencias variables a los antifúngicos azólicos [3, 9, 23, 24].

Los resultados de este trabajo nos permiten concluir que Candida albicans es la especie aislada con mayor frecuencia en la vulvovaginitis, sin embargo las especies “no albicans” se aíslan cada día con mayor frecuencia. Es por ello que se hace necesario llegar hasta la identificación de especie en todos los casos del diagnóstico microbiológico de la vulvovaginitis por Candida y realizar de rutina las pruebas de sensibilidad de estas levaduras a los antifúngicos de uso frecuente.

Referencias bibliográficas

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