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Agricultura Técnica
Instituto de Investigaciones Agropecuarias, INIA
ISSN: 0365-2807
EISSN: 0365-2807
Vol. 61, No. 1, 2001, pp. 42-50
Bioline Code: at01005
Full paper language: Spanish
Document type: Research Article
Document available free of charge

Agricultura Técnica, Vol. 61, No. 1, 2001, pp. 42-50

 en Detection of a Bovine Genetic Defect by a DNA Probe
Felmer, Ricardo D.; Butendieck, Norberto B.; Butendieck, Bárbara B. & Villegas, Juana M.

Abstract

The adhesion deficiency of bovine leukocytes to antigens, known as BLAD (bovine leukocyte adhesion deficiency), is a hereditary genetic disease which is lethal for the Holstein breed. It is a recessive autosomal disease that can be transmitted to the offspring. The objective of this research was to standardize the molecular techniques to diagnose BLAD and also to get a first approximation of the genetic frequency of the mutated allele in the bull population of the IX th and X th Regions. DNA amplification using polymerase chain reaction (PCR) and posterior digestion with restriction enzymes Taq I and Hae III was performed. The digested product was analyzed by 4% agarose gel electrophoresis and ethidium bromide staining to show the typical restriction fragments present in normal, carrier and infected cattle. The technique was validated with a screening test of 59 cattle. Out of 55 bulls analyzed, one turned out to be a BLAD carrier, which suggests a genetic frequency of 1.79% in the bull population of the IX th and X th Regions. The diagnostic technique of PCR and the digestion of the amplification product with two restriction enzymes ( Taq I and Hae III) has identified with accuracy the genotype of cattle at a specific locus and allows an early identification of the genetic defect known as BLAD in infected and carrier animals.

Keywords
bovine leukocyte adhesion deficiency, BLAD, PCR, Holstein breed, RFLP, disease

 
 pt Detección de un Defecto Genético en Bovinos Mediante una Prueba de ADN
Felmer, Ricardo D.; Butendieck, Norberto B.; Butendieck, Bárbara B. & Villegas, Juana M.

 
 es
Felmer, Ricardo D.; Butendieck, Norberto B.; Butendieck, Bárbara B. & Villegas, Juana M.

Resumen

La deficiencia en la capacidad de unión de leucocitos bovinos a los antígenos, más conocida como BLAD, es una enfermedad hereditaria que resulta letal para el ganado de la raza Holstein. Su principal característica es ser una enfermedad autosómica recesiva que puede ser transmitida a la descendencia. El objetivo del trabajo fue estandarizar la metodología para realizar un diagnóstico de la enfermedad mediante técnicas moleculares y lograr una primera aproximación sobre la frecuencia génica del alelo mutado en algunas poblaciones de toros de la IX y X Región. En base a la amplificación del ADN mediante reacción en cadena de polimerasa (PCR) y posterior digestión con enzimas de restricción Taq I y Hae III, fue posible visualizar, mediante electroforesis en gel de agarosa al 4%, los fragmentos de restricción característicos para bovinos normales, portadores o enfermos. La técnica se validó mediante un muestreo de 59 bovinos. De los 55 toros analizados uno resultó ser portador de BLAD, lo que implica una frecuencia génica de 1,79% en la población de toros de la IX y X Región. La técnica de PCR acoplada a la digestión con enzimas de restricción ( Hae III y Taq I) ha demostrado que identifica inequívocamente el genotipo del ganado en un locus determinado y permite el diagnóstico certero y precoz de aquellos animales enfermos y/o portadores del defecto hereditario conocido como BLAD.

Palabras-clave
deficiencia de adhesión leucocitaria bovina, BLAD, PCR, RFLP, Holstein, enfermedad

 
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