La neuraminidasa, una enzima secretada por Vibrio cholerae

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O1, es considerada un factor de virulencia por aumentar el numero de receptores a la toxina de este microorganismo en los enterocitos. Ademas, esta enzima es de amplio uso en las investigaciones con sialocompuestos, para el esclarecimiento de la participacion de los restos de acido sialico en diferentes funciones biologicas. En el presente trabajo comparamos los niveles de expresion de esta enzima por 5 cepas de diferentes biotipos y serotipos de V. cholerae O1. Se selecciono la cepa 569B (Biotipo Clasico, Serotipo Inaba) como la mas productora, y a partir de ella se establecio un protocolo de purificacion que incluyo: precipitacion con sulfato de amonio al pH de menor solubilidad de la proteina, y cromatografias de filtracion en gel (Sefacril S-200HR) e intercambio ionico (Q-Sefarosa FF). Estos pasos suministraron la enzima con un rendimiento del 30 % y un nivel de pureza del 98 % determinado por gel-filtracion en HPLC. La neuraminidasa obtenida fue utilizada para el tratamiento de sueros humanos previo a la prueba de inhibicion de la hemaglutinacion con virus influenza tipo B. La enzima fue efectiva en la eliminacion de inhibidores inespecificos de los sueros y dio resultados similares a los de una neuraminidasa comercial utilizada como control.