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Riego, Eileen; Lleonart, Ricardo; de la Pena, Ma. Victoria Sainz; Amaro, Fermin; Bacallao, Ketty; Santiesteban, Marta; Rolo, Felipe; Herrera, Luis; Blanco, Madelyn & de la Fuente, Jose Abstract Although several methods have been described to extract human DNA from bone tissues, the results are variable and sometimes the purified DNA is not suitable for polymerase chain reaction analysis. Specially for forensic applications where PCR mediated typing of short tandem repeats STR loci is imperative, the presence of inhibitors of the T. aquaticus DNA polymerase is often an insoluble difficulty. Here we describe methods which has been used in our laboratory for some time already to do the genetic typing of several short tandem repeats loci on genomic DNA extracted from ancient bone remains as well as the amplification and sequencing of the hypervariable region of the human mitochondrial DNA from the same specimens. The usefulness of the method was documented even with bone remains 2 000 years old. These results are important not only from the forensic point of view but also for the applications of the so called "molecular archaeology techniques" to help trace back the origins of ancient human populations. Keywords genetic typing, bone, polymerase chain reaction, PCR, short tandem repeats, STR, mitochondrial DNA

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Obtencion de ADN util para analisis de tipaje genetico a partir de restos oseos humanos antiguos Riego, Eileen; Lleonart, Ricardo; de la Pena, Ma. Victoria Sainz; Amaro, Fermin; Bacallao, Ketty; Santiesteban, Marta; Rolo, Felipe; Herrera, Luis; Blanco, Madelyn & de la Fuente, Jose Resumen En ocasiones resulta de vital importancia para la aplicacion de tecnicas forenses el tipaje del ADN a partir de muestras oseas. Con frecuencia, sin embargo, la aplicacion de estas tecnicas se ve fuertemente afectada por factores tales como la inhibicion de actividad enzimatica de la ADN polimerasa de T. aquaticus que queda en estas preparaciones de ADN, los bajos rendimientos, el alto grado de degradacion de los acidos nucleicos extraidos, etc. Varios autores reportan procedimientos para la purificacion de ADN a partir de muestras oseas, sin embargo, los resultados son muy variables en terminos de rendimiento y utilidad del material extraido como sustrato de reacciones tales como la reaccion en cadena de la polimerasa. Aqui se describe un procedimiento que rinde ADN util para el tipaje genetico de fragmentos repetidos cortos en tandem y ADN mitocondrial humano a partir de restos oseos antiguos. Este metodo se ha usado de forma rutinaria en nuestro laboratorio para estudios forenses y de poblaciones aborigenes antiguas. Palabras-clave tipaje genetico, hueso, reaccion en cadena de la polimerasa, PCR, fragmentos repetidos cortos en tandem, STR, ADN mitocondrial

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