Biotecnología Aplicada 1999;16:232-235
Coamplificación del gen de la eritropoyetina humana
en células de ovario de hámster chino dhfr resistentes a
metotrexato
Diana García del Barco, Alina Rodríguez, Elsa
Rodríguez, Caridad Tamayo, Julio R Fernández, María M Vásquez, María P Rodríguez, Ricardo
Lleonart
Code Number:BA99037
Resumen
Los procesos de amplificación génica desempeñan un papel
importante en los mecanismos celulares de regulación. Para el estudio de la
amplificación y expresión del gen de la eritropoyetina humana (EPO), se
seleccionaron células de ovario de hámster chino (CHO) dhfr
cotransfectadas con genes quiméricos para la expresión de la EPO y la
dihidrofolato reductasa (DHFR), y que fueron seleccionadas en presencia de
concentraciones crecientes de metotrexato. Los resultados evidenciaron una
amplificación génica de tres veces, acompañada por un aumento en la
expresión de la EPO hasta 33 pg/célula/día. El amplicón, que
contiene secuencias genómicas del hospedero, muestra rearreglos originados durante
el proceso de integración-amplificación.
Palabras claves: amplificación génica, CHO, EPO,
eritropoyetina
Abstract
Erythropoietin gene co-amplification in methotrexate-resistant Chinese hamster
ovary dhfr cells. Gene amplification plays an important role in cellular regulatory
mechanisms. To study the amplification and expression of the human erythropoietin (EPO)
gene, Chinese hamster ovary (CHO) dhfr cells co-transfected with chimeric genes
for the expression of EPO and dihydrofolate reductase (DHFR) and selected in the presence
of increasing concentrations of methotrexate, were used. The results evidenced a three-fold
gene amplification, accompanied by an increase in EPO expression of up to 33 pg/cell/day.
The amplicon, which contains host genomic sequences, shows rearrangements originated
during the integration-amplification process.
Keywords: CHO, EPO, erythropoietin, gene amplification
Copyright Elfos
Scientiae 1999
