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African Crop Science Journal
African Crop Science Society
ISSN: 1021-9730
EISSN: 2072-6589
Vol. 19, No. 3, 2011, pp. 137-147
Bioline Code: cs11014
Full paper language: English
Document type: Research Article
Document available free of charge

African Crop Science Journal, Vol. 19, No. 3, 2011, pp. 137-147

 fr
Amugune, N. O.; Anyango, B. & Mukiama, T.K.

Résumé

Le haricot commun ( Phaseolus vulgaris check for this species in other resources L.) est un important constituant du regime alimentaire humain riche en protéines. Des variétés génétiquement améliorées sont nécessaires, les rendements optimum n’étant pas realisés suite aux contraintes comme maladies et pestes dues aux insects. L’objectif de cette étude était d’évaluer le potential de deux variétés de haricot commun, Mwitemania et Rose coco en transformation médiée in vitro Agrobacterium tumefaciens check for this species in other resources . De grains embryonnaires matures en germination sous papier filter pendant 1-2 jours, étaient inoculés en stab avec des strains de LBA 4404 (pBI 121) A. tumefaciens, EHA 105 (pCAMBIA 1201) et EHA 105 (pCAMBIA 1301), harbouring β-glucuronidase (GUS) "intron plasmids". Lews embryons infectés étaient c0-cultivés pendant 3-4 jours sur la base de media Murashige and Skoog, 1962 avec des vitamins B5 (MSB5) ou media supplémenté avec 10mM benzyl-aminopurine (BAP) et cultivé sur le média sélectionné et régénéré composé de 10 mM BAP et 50 mg L-1 kanamycin ou hygromycin. Les tiges et racines transformées, confirmées par la culture histochimique pour activité GUS étaient obtenues dans les plantules de Mwitemania âgées de 40 semaines issues des explants infectés avec A. tumefaciens LBA 4404 (pBI 121). Aucune expression GUS n’était observée dans toutes les tiges de Rose coco et Mwitemania shoots issues des explants infectés avec EHA 105 (pCAMBIA 1201) ou EHA 105 (pCAMBIA 1301).

Mots Clés
Agrobacterium tumefaciens, ß-glucuronidase, Phaseolus vulgaris

 
 en Agrobacterium-mediated transformation of common bean
Amugune, N. O.; Anyango, B. & Mukiama, T.K.

Abstract

The common bean ( Phaseolus vulgaris check for this species in other resources L.) is an important human dietary constituent being a rich source of protein. Genetically improved bean varieties are required as optimum yields are not realised due to constraints such as diseases and insect pests. The objective of this study was to evaluate the potential of two common bean varieties Mwitemania and Rose coco to in vitro Agrobacterium tumefaciens check for this species in other resources - mediated transformation. Mature seed embryos germinated for 1-2 days on moist filter paper, were stab inoculated with A. tumefaciens strains LBA 4404 (pBI 121), EHA 105 (pCAMBIA 1201) and EHA 105 (pCAMBIA 1301), harbouring β-glucuronidase (GUS) intron plasmids. The infected embryos were co-cultivated for 3-4 days on basal Murashige and Skoog, 1962 medium with B5 vitamins (MSB5) or medium supplemented with 10 µM benzyl-aminopurine (BAP) and cultured on regeneration and selection medium consisting of 10 µM BAP and 50 mg L-1 kanamycin or hygromycin. Transformed shoots and roots confirmed by histochemical staining for GUS activity were obtained in 40 weeks old Mwitemania plantlets from explants infected with A. tumefaciens LBA 4404 (pBI 121). No GUS expression was observed in all Rose coco and Mwitemania shoots from explants infected with EHA 105 (pCAMBIA 1201) or EHA 105 (pCAMBIA 1301).

Keywords
Agrobacterium tumefaciens, ß-glucuronidase, Phaseolus vulgaris

 
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