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Entomotropica
Sociedad Venezolana de Entomologia
ISSN: 1317-5262
Vol. 16, Num. 3, 2001, pp. 181-185
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Entomotropica antes/formerly Boletín de Entomología Venezolana ,
Vol. 16, No. 3, Diciembre ,2001, pp. 181-185
Bemisia tabaci (Gennadius,
1899) biotipo B,
primer registro para Venezuela utilizando RAPDs- PCR
Jorge Salas1, Eustaquio
Arnal2
1INIA-CIAE, Instituto Nacional de Investigaciones
Agrícolas-Centro de Investigaciones Agrícolas del Estado Lara, Apdo. 592,
Barquisimeto, Edo. Lara, Venezuela. E-mail: salasjl@hotmail.com 2INIA-CENIAP
Instituto Nacional de Investigaciones Agrícolas-Centro Nacional de
Investigaciones Agropecuarias, Apdo. 4653, Maracay, Edo. Aragua. E-mail: eustaquioarnal@yahoo.com
Recibido: 09-vi-2000 Aceptado: 21-x-2001 Correcciones
devueltas por el autor: 30-xi-2001
Code Number: em01024
RESUMEN
Salas J, Arnal E. 2001.
Bemisia tabaci (Gennadius, 1899) biotipo B, primer registro para
Venezuela utilizando RAPDs- PCR. Entomotropica
16(3):181-185.
Se reporta por primera vez en Venezuela la
presencia del biotipo B de Bemisia tabaci en tomate, melón, pepino y
auyama en dos importantes regiones hortícolas del país. La determinación se hizo
a través del análisis molecular utilizando RAPDs-PCR. En los cultivos melón
y auyama se encontraron poblaciones de los dos biotipos B y
no-B.
Palabras clave adicionales: Aragua,
electroforesis, hortalizas, Lara, mosca
blanca. ABSTRACT
Salas J, Arnal E. 2001.
Bemisia tabaci (Gennadius, 1899) biotype B, first record for Venezuela
using RAPDs- PCR. Entomotropica 16(3):181-185.
Bemisia tabaci B biotype is
reported for the first time in Venezuela attacking tomato, melon, cucumber and
pumpkin in two important vegetable producing regions. Determinations were based
on PCR-RAPD analysis. In melon and pumpkin populations of B. tabaci
biotype B and biotype non-B were found.
Additional key words: Aragua,
electrophoresis, Lara, whiteflies, vegetable crops.
INTRODUCCIÓN
La mosca blanca Bemisia tabaci (Gennadius, 1899)
(Homoptera: Aleyrodidae), fue reportada por primera vez en Venezuela por Wolf
et
al. en 1949, quienes citaron un virus transmitido por B. tabací en
tabaco, conocido como "virus del encrespamiento de la hoja del tabaco" ("tobacco
leaf curl"). Debrot et al. (1963), citan a B. tabaci en estudios sobre
la
transmisión del mosaico amarillento del tomate, siendo los adultos identificados
por Miss Louise Russell, U.S.D.A, Beltsville, Maryland, U.S.A. Más tarde, B.
tabaci es referida como vector de enfermedades virales, tipo "mosaico" en
tomate, soya, papa y plantas euforbiáceas (Debrot y Ordosgoitti 1975; Uzcátegui
y Lastra 1978; Debrot y Centeno 1985a,b). Arnal et al. (1993a, b; 1997),
reportan la presencia de B. tabaci en diferentes plantas
cultivadas, malezas y silvestres en distintas localidades de los estados Aragua,
Falcón, Bolívar, Lara, Portuguesa, Zulia, Anzoátegui, Guárico, Carabobo,
Cojedes, Barinas y Yaracuy. Brown (1990) en su trabajo de actualización de los
geminivirus transmitidos por moscas blancas en las Américas y el área del
Caribe, indica que en el pasado B. tabaci ha sido reconocida como una
plaga esporádica y vector de enfermedades virales en zonas tropicales y
subtropicales americanas. Igualmente, la misma autora reporta que durante la
década de los 70 y comienzos de los 80, la aparición de síntomas virales en
algodón y cultivos hortícolas asociados a B. tabaci comenzaron a
incrementarse, así como también la importancia de estas enfermedades Esta
tendencia continuó su escalada en las áreas tropicales americanas y
especialmente en la región caribeña, amenazando la producción comercial de
cultivos solanáceos como el tomate, así como leguminosas y cucurbitáceas. Estas
enfermedades fueron asociadas a las recientes infestaciones de B. tabacia
en Centroamérica (Brown 1990). En los últimos años de la década de los 80
(1987-88), se observaron desórdenes en plantas como la "madurez desuniforme del
fruto del tomate", y el síntoma de "hoja plateada" en calabacín Cucurbita
pepo L. en el estado de Florida, EEUU, asociados a poblaciones altas de
B. tabaci.
A finales de la década de los 80 y comienzos de la siguiente,
después de la aparición de una mosca blanca causando graves problemas económicos
en diversos cultivos en el sur de California, EEUU, se comenzó a hablar de 2
razas (biotipos) de B. tabaci en ese país, la raza B conocida también
como "raza Florida" o "raza poinsettia" que se detectó por primera vez en el
estado de Florida, y la otra raza de más vieja data que se conocía como B.
tabaci, nombrada después como raza A o "raza algodón", las cuales eran
diferentes en cuanto al daño causado y a la gama de plantas hospederas (Perring
et al.1991, Perring et al. 1992). Después del nombramiento de la mosca blanca de
la hoja plateada Bemisia argentifolii en 1994, como una nueva especie
(Bellows et al. 1994), algunos autores han considerado al biotipo B como una
nueva especie, pero referido como el biotipo B de B. tabaci ( Bentz et
al. 1995, Blua et al. 1995, Headrick et al. 1995, Liu & Stansly 1995,
Naranjo & Flint 1995, Zalom et al. 1995). Otros autores aun cuando mencionan
a B. argentifolii como una nueva especie, muestran una tendencia a
identificarse con la existencia de un complejo de biotipos dentro del género
Bemisia y prefieren señalarla como Bemisia spp. ( Brown et
al.1995, Rossel et al. 1997).
En Venezuela, en el año 1990, se reporta en los estados Guarico,
Aragua, Lara y Falcón, la repentina aparición de grandes poblaciones de una
mosca blanca, la cual se creyó en ese entonces fuera B. tabací atacando
varios cultivos especialmente tomate de uso agroindustrial, con perdidas
estimadas entre un 50 y 60% (Anónimo 1990). Jones (1991), reporta que en 1990 se
registraron en Venezuela, perdidas de hasta 50% en la cosecha de melones. A
inicios del año 2001, no existe en Venezuela una publicación, con una base
científica, sobre la existencia del biotipo B de B. tabaci.
MATERAIALES Y MÉTODOS
En 1998 se enviaron muestras de ninfas preservadas en etanol 70%
para la determinación de biotipos al Centro Internacional de Agricultura
Tropical (CIAT) en Cali, Colombia, que coordina el proyecto "Manejo Integrado
Sostenible de Moscas Blancas como Plagas y Vectores de Virus Vegetales en los
Trópicos". Las muestras de ninfas fueron colectadas en hojas en diferentes
cultivos y localidades de los estados Lara y Aragua (Cuadro
l). Los especímenes estudiados fueron previamente identificados como B.
tabaci, según las características morfológicas de la caja puparia. La
extracción y amplificación del ADN total se hizo de acuerdo a una modificación
hecha por Markham (en prensa) a la metodología de De Barro y Driver (1997). Para
la detección de B. tabaci biotipo B se utilizaron marcadores moleculares
de carácter dominante (RAPD-PCR) ( ADN Polimórfico Ampliado Aleatorio-Reacción
en Cadena de Polimerasas) empleando los cebadores Operon H9 (5' TGT AGC TGG G
3') y Operon F12 (5' ACG GTA CCA G 3'). Los productos de la amplificación se
separaron mediante electrofóresis en geles de agarosa de 1.5% y el marcador de
peso molecular empleado fue el 1 kb, ya que las bandas de diagnóstico para el
biotipo B se encuentran entre 500 y 1000 b. Inicialmente todos los especimenes
fueron evaluados con el cebador Operon H9 porque genera un perfil
electroforético no tan diverso, pero con polimorfismos suficientes para
identificar el biotipo B. En algunos casos, cuando la detección no era lo
suficientemente clara, se utilizó el cebador Operon F12, el cual es un poco más
diverso. Por lo tanto, los resultados están basados principalmente en perfiles
electroforéticos obtenidos con el cebador Operon H9. Especimenes documentales
(voucher specimens) de B. tabaci utilizados en este trabajo, son
conservados en las colecciones de insectos del Departamento de Protección
Vegetal del INIA, Centro Nacional de Investigaciones Agropecuarias (CENIAP) y
del Centro de Investigaciones Agrícolas de Estado Lara (CIAE-Lara)
RESULTADOS
De un total de 262 individuos analizados, 48 resultaron ser del
biotipo B de B. tabaci, por presentar el patrón de RAPD específico de
este biotipo (Figura 1) y 12 resultaron como biotipo
no-B (Cuadro l), mientras que los restantes pudieron
pertenecer a otros biotipos, o resultaron negativos para la amplificación. En la
figura 2, se presentan los patrones electroforéticos
obtenidos con el cebador H9. Las tres bandas diagnósticas más fuertes están
entre 500 y 1000 b, representadas con saetas o flechas de color rojo, y dos
bandas un poco débiles, representadas con el color azul, una a la altura de 400
b y la otra aproximadamente a 1200 b. Las bandas diagnósticas estuvieron entre
300 y 1200 b.
DISCUSIÓN
A través de las pruebas realizadas queda claramente establecida la
existencia del biotipo B de B. tabaci en Venezuela, en los cultivos
tomate, pepino, melón y auyama, pero como el insecto se cría en más de 100
plantas hospederas en Venezuela (Arnal et al. 1993b; 1997), estos resultados
justifican una investigación más intensiva para definir con más precisión la
distribución del biotipo B de B. tabaci u otros biotipos. Análisis de
esterasas no específicas han permitido confirmar la presencia de poblaciones del
biotipo B de B. tabaci en once países de América tropical, excepto
Venezuela y otros (Brown 1993). Quintero et al. (1998) confirmaron por primera
vez la presencia del biotipo B de B. tabaci en Colombia, mediante
estudios bioquímicos, moleculares y etológicos. En cuanto al biotipo no-B, la
Dra. P. K. Anderson (comunicación personal 1999), señala que el biotipo
determinado, presentó un patrón de bandas típico del biotipo A encontrado en la
región suroeste de EEUU, pero no indica que sea el biotipo A de B.
tabaci. Además, sugiere que para confirmar si el biotipo A está presente en
Venezuela, es necesario estudiar completamente su biología. Finalmente indica lo
interesante de la existencia en Venezuela de poblaciones de los biotipos B y
no-B en algunas plantas hospederas, ya que en los resultados del proyecto que
ella coordina, se consigue muy a menudo esta situación. Cabe destacar que de los
biotipos B detectados, 96% correspondieron al estado Lara y 4% a Aragua. La
información presentada, apenas refiere la existencia de dos biotipos de B.
tabaci en los estados Lara y Aragua, pero promueve la iniciativa de
diagnosticar con mayor precisión la existencia de otros biotipos y un mayor
número de enfermedades virales en nuestro país, ya que han sido citados, hasta
cinco biotipos en Centroamérica (Caballero 1993), lo cual indica la variabilidad
genética en las poblaciones de B. tabaci.
AGRADECIMIENTO
Los autores agradecen a la Dra. Pamela Anderson,
Ms. Natalia Villarreal, Dr. Leo Calvert y Dr. Francisco Morales en CIAT, Cali,
Colombia por
la colaboración prestada en la determinación de los biotipos de B.
tabaci, y a la agencia donante del proyecto Danish Internacional Development
Agency (DANIDA). Nuestras gracias a la Dra. Yuseli Zambrano, Instituto Nacional
de Investigaciones Agrícolas (INIA-CENIAP) y al Ingeniero Luis Tovar,
Universidad Central de Venezuela, Facultad de Agronomía (UCV), por la revisión
critica y observaciones al manuscrito. Igualmente reconocemos la valiosa labor
de los técnicos asistentes del INIA, Fidel Ramos y Omar Mendoza, en la
realización de este trabajo.
REFERENCIAS
- [Anónimo]. 1990. Daños al agroecosistema causados por la mosca
blanca. El Nacional (Caracas); Sección Ecología, jun 27, 1990, pagina C-3.
- Arnal E, Russell L M; Debrot E; Ramos F; Cermeli M; Marcano R;
Montagne A. 1993a. Lista de moscas blancas (Homoptera: Aleyrodidae) y sus
plantas hospederas en Venezuela. Florida Entomol 76(2):365-381.
- Arnal E, Ramos F, Debrot E. 1993b. Plantas hospederas de la rnosca
blanca Bemísía tabací (Gennadius) en Venezuela. Agronomía Trop 4(5-6)
267-283.
- Arnal E, Ramos F. 1997. Incorporación de plantas hospederas a la
colección de moscas blancas del genero Bemisia. En resúmenes XV Congreso
Venezolano de Entomología. Trujillo, Venezuela. p5.
- Bellows Jr. TS; Perring TM, Gill RJ, Headrick DH. 1994.
Description of a species of Bemisia (Homoptera: Aleyrodidae). Ann
Entomol Soc Am 87(2):195-206.
- Bentz J, Reeves III J, Barbosa P, Francis B. 1995. Within-plant
variation in nitrogen and sugar content of poinsettia and its effects on
the oviposition pattern, survival and development of Bemisia argentifolii (Homoptera:
Aleyrodidae).Environ Entomol 24 (2):271-277.
- Blua J M, Yoshida H A, Toscano N C. 1995. Oviposition preference
of two Bemisia species (Homoptera: Aleyrodidae). Enviromn Entomol
24 (1):88-93.
- Brown JK. 1990. An Update on the Whitefly-transmitted
Geminiviruses in the Ameñcas and the Caribbean Basin. FAO Plant Prot Bull
39(1):5-23.
- Brown J K. 1993. Evaluación crítica sobre los biotipos de mosca
blanca en América, de 1989 a 1992. pp. 1-9. En: Memorias del Taller
Centroamericano y del Caribe sobre moscas blancas. CATIE, Turrialba, Costa
Rica Agosto 3-5,1992.
- Brown JK, Frolich D R, Rossel R C. 1995. The sweetpotato or
silverleaf whiteflies: Biotypes of Bemisia tabaci or a species complex?.
Annu Rev Entomol 40:511-534.
- Caballero R. 1993. Importancia de la identificación de biotipos de Bemisia tabaci (Gennadius)Centroamérica. En: Resúmenes
II Taller Centroamericano y del Caribe sobre Moscas Blancas. Managua. Nicaragua.
p 5.
- De Barro P J, Driver F. 1997. Use of RAPD-PCR to distinguish the B
biotype from other biotypes of Bemisía tabací (Gennadius) (Hemiptera:
Aleyrodidae). Austra J Entomol 36:149-152.
- Debrot C E; Herold F, Dao F. 1963. Nota Preliminar sobre un "Mosaico Amarillento" del Tomate en Venezuela. Agronomía
Trop 13(1):33-42.
- Debrot C EA, Ordosgoitti F A. 1975. Estudio sobre un Mosaico
Amarillo de la Soya en Venezuela. Agron Trop 25(5):435-449.
- Debrot E, Centeno F. 1985a. Infección Natural de la Papa en
Venezuela con el Mosaico Amarillo del Tomate, un Geminivirus transmitido
por Moscas Blancas. Agron Trop 35(1-3):125-138.
- Debrot E, Centeno F. 1985b.Ocurrencia del virus mosaico de las
Euforbiáceas infectando a Euphorbia heterophylla L., en Venezuela.
Agron Trop 36(4-6):5-12.
- Headrick D H, Bellows Jr T S, Perring T M. 1995. Behavior of
female Eretmocerus sp. n.r. californicus (Hymenoptera: Aphelinidae)
attacking Bemisia argentifolii (Homoptera: Aleyrodidae) on sweet potato.
Environ Entomol 24(2):412- 422.
- Jones K. 1991. Manejo Integrado de Plagas: Solución al Problema de
la Mosca Blanca?. Agrotec 91. Informe presentado por la Cámara Británica
de Comercio y el Banco Latino. mimeo. 6p.
- Liu T-X, Stansly P A. 1995. Oviposition by Bemisia
argentifolii (Homoptera: Aleyrodidae) on tomato: effects of leaf factor
and insecticide residues. J Econ Entomol 88(4):992-997.
- Naranjo SE, Flint H M 1995. Spatial distribution of adult Bemisia tabaci (Homoptera:
Aleyrodidae) in cotton and development and validation of fixed-precision
sampling plan for estimating population density.
Environ Entomol 24(2):261-270.
- Perring T M, Cooper A, Kazmer D J, Shields C, Shields J. 1991. New
strain of sweetpotato whitefly invades California vegetables. Calif Agric
45(6):10-12.
- Perring T M, Cooper A, Kazmer D J. 1992. Identification of the
poinsettia strain of Bemisia tabaci (Homoptera: Aleyrodidae) in brocoli
by electrophoresis. J Econ Entomol 85:1278-1284.
- Quintero C, Cardona C, Ramírez D Y, Jiménez N. 1998. Primer
registro del biotipo B de Bemisia tabaci (Homoptera: Aleyrodidae)
en Colombia. Rev Colombiana Entomol 24 (1-2):1-5.
- Rossel R C, Bedford I D, Frolich D R, Gill R J, Brown J K, Markham
PG. 1997. Analysis of morphological variation in distinct populations of Bemisia tabaci (Homoptera:
Aleyrodidae). Ann Entomol Soc Am 90(5):575-589.
- Uzcategui RC, Lastra R. 1978. Transmission and Physical Properties
of the Causal Agent of Mosaico Arnarillo del Tomate (Tomato Yellow Mosaic).
Phytopathology 68(7):985-988.
- Wolf FA, Whitcomb WH, Mooney WC. 1949. Leaf Curl of Tobacco in
Venezuela. J Elisha Mitchell Sci Soc 65:38-47.
- Zalom F G, Castane C, Gabarra R. 1995. Selection of some
winter-spring vegetable crops hosts by Bemisia argentifolii (Homoptera:
Aleyrodidae). J Econ Entomol 88 (1):992-997.
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